芸香苷和槲皮素

2021年1月21日发(作者：谷小波)

槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识

[
适用对象

]
药学专业

[
实验学时

] 18
学时

、实验目的

学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求：

1
）通过芸香苷提取与精制，

掌握沸水提取黄酮类化合物的原理

和操作。

2
）掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。

3
）掌握黄酮苷和黄酮苷元的分离。

4
）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、

苷元和糖部分的检

识方法。

二、实验原理

由槐花中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水

和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，

或根据芸香苷分子中

具有酚羟
基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮

沸提取，其提取液
加酸酸化后则芸香苷游离析出。

三、仪器设备

单口园底烧瓶，冷凝管，铁架台，烧杯，电炉，烘箱、水浴锅、

三角烧
瓶，微量抽滤器，布氏漏斗，滤纸，试管，层析槽，石棉网，

毛细管等。

四、相关知识点

槐花为豆科植物槐
Sophora japonica L.
的干燥花及花蕾，主要含




芸香苷（芦丁）,
含量高达
12~20%
，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李

糖。

芸香苷（
rutoside
）
,
分子式C
27
出。分子量
610.51
，淡黄色

针状结晶，
mp.177~178
C
。难溶于冷水（
1
:
8000
）
,
略溶于热水（
1

:200
），溶于热甲醇（
1
:
7
）
,
冷甲醇（
1
:
100
）
,
热乙醇（
1
:
30
）
,
冷乙醇（
1
:
650
）
,
难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、

石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。

槲皮素（
quercetin
）
,
分子式

务

已。
O
7
,
分子量
302.23
,
黄色针

状结
晶，
mp.314
C
（分解）。溶于热乙醇（
1
:
23
）
,
冷乙醇（
1
:
300
）
,
可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、

氯仿、乙醚中，几不溶于水。

OH
HO
OR
OH O
芸香苷

R=-
葡萄糖
-
鼠李糖

槲皮素

R= H
OH

五、实验步骤

（一）芸香苷的提取（水提取法）

称取槐花米
50
克，置
1000 ml
烧杯中，加沸水
800 ml
,
加热保

持微沸
1
小时，趁热用棉花过滤，滤渣再加

600 ml
水煮沸
1
小时
,
趁热过滤，合并
2
次滤液，放置夜，析出大量淡黄色沉淀，抽滤，沉

淀用水洗
3~4
次，抽干置于空气中干燥即得粗芸香苷，称重计算得率。

（二）芸香苷的水解




称取芸香苷粗品

2
克，尽量研细，投入

500 ml
圆底烧瓶中，加

2%H
2
SO
4
溶液
150 ml
,
接上冷凝管，直火加热煮沸
1.5
小时，滤取沉

淀物（即苷元槲皮素）

，滤液保留以鉴定糖部分，槲皮素沉淀经水洗

涤抽干，
自然干燥，称重并计算水解得率。

三）芸香苷、槲皮素重结晶

称取芸香苷粗品

2
克，加甲醇

50 ml
，

加热溶解，趁热过滤，

滤液浓缩
一半，

放置析晶，

过滤。滤液适当浓缩后放置，

复析出结晶，

滤取结晶。必
要时结晶再用甲醇重结晶一次。

取槲皮素全部，加适量

95%
乙醇，同上法重结晶一次。

四）芸香苷、槲皮素和糖的纸色谱鉴定

1
、点样：取新华一号色谱滤纸，规格

20 cm
x
20 cm
,
在滤纸下

端约

2 cm
处用铅笔画一直线，

间隔

2 cm
分别点上下列样品或标准溶

液：

糖样品溶液

标准葡萄糖溶液


标准鼠李糖溶液

芸香苷标准品溶液

芸香苷样品甲醇溶液

槲皮素样品甲醇溶液


槲皮素标准品溶液

2
、

展
开剂：正丁醇
-
醋酸
-
水（
4
：

1


5
）上层上行展开。


挥尽后，在
3
、
显色：展开完毕，将滤纸取出，记录溶剂前沿位置 。待溶剂

（

3
）与（

4
）点之间剪开，分别显色。

（
1
）
糖的显色： 喷苯胺
-
邻苯二甲酸试剂，在
105
C
烘
10
分钟
,
显棕色斑点。计算并比较样品和标准品的

Rf
值。

2
）黄酮化合物的显色：

①

可见光下观察色斑，紫外灯下观察荧光斑点。

②

经氨气薰后再观察。