新生儿溶血病血清学检查标准操作规程

2021年1月21日发(作者：东尧叟)
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程

(
一
)
检验目的

检测孕妇产前与其丈夫
ABO< br>及
Rh
血型相容性、
孕妇
IgG
抗体效价、产后新生儿体内不 相容抗体存在情况、新生儿与
产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗
提供可 靠的实验室依据。





(
二
)
检验原理




新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红
细胞抗原不配合的
IgG
性 质的血型抗体进入新生儿体内，破
坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早
期 ，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的
新生儿黄疸。新生儿溶血病产前诊断方法主要包 括检测胎儿
父母的
ABO
及
Rh
血型、
孕妇不规则抗体筛查 、
外周血抗
A
／抗
B
或
Rh
抗体效价来判断新生儿 溶血病发生的可能性及
严重程度；
新生儿溶血病产后诊断主要包括母子
ABO
及
RhD
血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步
采取治疗手段提供 可靠的依据。





(
三
)
适用范围





适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。





(
四
)
设备性能参数





参见血清学专用离心机、达亚美
ID
离心机、达亚美
ID
孵育器、< br>强生
Ortho BioVue
离心机及各全自动血型／配血系
统使用说明书。





(
五
)
器材与试剂





1.
器材血清学专用离心机、
达亚美
ID
离心 机、
达亚美
ID
孵育器、
强生
Or-tho BioVue
离心机、
塑料软试管、
塑料硬质
试管
(75mmXl2mm)
、试管 架、一次性塑料滴管、记号笔、移
液枪、一次性移液枪头。





2.
试剂


DiaMed ABO
／
RhD
血型卡、
OrthoBioVueABO
／
RhD
血型卡、抗
A
、抗
B
血清、
Rh
分，型血清、生理盐
水、抗球 蛋白试剂
(
市售单克隆
)
、抗体筛查试剂红细胞、抗
体鉴定试剂红细 胞、致敏的阳性对照细胞
(
自制
)
。





(
六
)
标本要求





1.
夫妇标本


EDTA-K
2< br>或
EDTA-K
3
抗凝全血≥
3ml(
手工
操作时也 可以使用不抗凝标本
)
，经
B600-A
型离心机在
1
760g
条件下，离心
5
分钟，离心后无溶血及明显乳糜。





2.
患儿标本


ED TA-K
2
或
EDTA-K
3
抗凝全血≥
3ml(
手工
操作时也可以使用不抗凝标本
)
，经
B600-A
型离心机在< br>1
760g
条件下，离心
5
分钟，离心后无明显乳糜。





(
七
)
校准步骤





参照血清学专用离心机、达亚美
ID
离心 机、达亚美
ID
孵育器、
OrthoBioVue
离心机及各全自动血型／配 血系统使
用说明书中的校准要求执行。

’



(
八
)
操作程序





1.
产前血清学检查





(1)< br>取夫妇全血标本分别测定
ABO
血型及
RhD
血型，
具
体操作参照《
ABO
及
RhD
血型鉴定试验标准操作规程》
。




(2)
夫妇
ABO
血型不配合时，做孕妇血清抗体检查。





①
IgG
抗
A(B)
或
R h
血型抗体效价测定：参照《
ABO
及
Rh
血型抗体效价测定试验标 准操作规程》
。





②中和孕妇血清做交叉 试验：
用
DTT
或
2-Me
破坏母血
清中
IgM< br>抗体，
以此处理后血清与其丈夫细胞做凝聚胺法或
IAT
的交叉配血试验，如果 出现阳性则可能引起
HDN
。





2.
产后血清学检查





(1)ABO
新生儿溶血病血型血清学检查。





①母子标本的
ABO
血型鉴定：分别取产妇、新生儿的
洗涤红细胞 鉴定
ABO
血型，
具体操作参照
《
ABO
及
RhD
血
型鉴定试验标准操作规程》
。





②新生儿标本的三项试验。
a.
直接抗人球蛋白试验：将
新生儿红细胞用生理 盐水充分洗涤
3
遍，最后
1
遍将上清控
干，然后加
1
滴抗人球蛋白试剂，经血清学专用离心机在
1
000g
条件下，离心
15
秒，在显微镜下观察结果，有凝集为
阳性，无凝集为阴性。也可以采用卡式抗人球法检测。参见
《手工抗人球蛋白试验标准操作规程》
。
b.
游离
IgG
抗 体测
定：取试管
3
支，分别标记
Ac
、
Bc
、Oc
，每管中各加
2
滴
新生儿血清及相应
A
、
B
、
O
型试剂红细胞各
1
滴，置
37
℃