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胚胎工程之胚胎分割
胚胎工程
是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微 操作
和处理技术,胚胎工程技术内容丰富,如胚胎移植、体外受精、胚
胎分割、胚胎干细胞培养 等技术。经过处理后获得的胚胎,还需
移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。
胚胎工程技术广泛用于生殖生物学、胚胎学、发育生物学、
遗传育种学和生殖医学的研究应用, 并成为这些研究领域的重要
技术手段。目前在生产上应用较多的是动物繁殖控制技术,包括人
工 受精技术、试管家畜技术、
胚胎分割技术等。胚胎工程是生物技术
的重要组成部分,
它 的研究和应用不仅推动了制药、
器官移植医学等
领域的变革,
而且还加速了畜牧业生产 的发展。
目前我国在胚胎移植
改良牛、
羊品种,体细胞克隆牛、羊等家畜的技术方面已 经进入国际
先进行列。
从本世纪的三十年代起,胚胎工程技术就逐步成功地应用于< br>畜牧业生产,尤其是在优良种畜的引进、品种的保存、种畜的迅
速扩繁、品种的改良和濒危动物的 保护等方面发挥了极其重要的
作用,极大地提高了畜牧生产的科技水平,产生了巨大的经济效
益 和社会效益。胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的
工程技术操作,
然后让它继续发 育,
获得人们所需要的成体动物的新
技术。实际上是动物细胞工程的拓展与延伸。早在1891 年,
英国
剑桥大学的赫普就在兔子身上首次成功地进行了受精卵的移植实验。
到本世纪 30年代,这项技术已在畜牧业上获得了越来越明显的效
益。进入70年代,出现了专门从事受精卵移植 的企业。
高等动物的
受精卵移植又叫
“家畜胚胎移植”。
它是将优良种畜的早 期胚胎从供
体母畜体中取出来,移到受体母畜输卵管或子宫中,
“借腹怀胎”繁
殖优良 牲畜的技术。
为成倍甚至成数倍地提高优良胚胎移植后所得到的成体数,
用显
微外科的手术方法将一个胚胎分割为2个或多个,
制造同卵多仔。
国
内外科学家们已 在鼠、兔、牛、羊、猪的胚胎分割上取得了成功,这
一技术成为胚胎分割
胚胎分割(
Embryo bisection
)
是指借助显微操作技术或徒
手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体母畜,
从而获得同卵双胎或多胎的生物 学新技术。由于来自同一胚胎的
后代有相同的遗传物质,
因此
胚胎分割可看 成动物无性繁殖或克
隆的方法之一。胚胎分割技术可用于扩增可用的优良胚胎的数目和
生产同卵 双胎、
同卵多胎的克隆动物,可用于濒危动物的保护,
也可
为早期胚胎遗传疾病的检查 和性别鉴定等技术提供一种活
体组织检
查的方法。
胚胎分割的研究概况
早在
1904
年,
Spemann< br>就进行了蛙类
2
细胞胚胎的分割实验,
并获
得同卵双生后代。
20
世纪
30
年代,
Pincus
等首次证明
2
细 胞兔胚的单
个卵裂球在假孕受体兔体内可发育为体积较小的胚泡。
哺乳动物胚胎
分割技 术始于
Nicholas( 1942)
对大鼠
22
细胞胚胎卵裂球的分离和
培养研究。其后
,1959
年
Tarkow
ski
研究了小鼠
1/4 ,2/4
,3/4
卵裂
球的发育规律
,
得到了世界上首例半胚来源的活体动 物。
20
世纪
70
年
代以来,
随着胚胎培养及移植技术的发 展和完善,
哺乳动物胚胎分割
取得了突破性进展。
1979
年,
Wi lladsen
等通过分离
2
细胞胚胎的卵裂
球,也获得绵羊同卵双生后代。
20
世纪
80
年代以后,哺乳动物胚胎分
割技术进人快速发展时期。
1998
年
,Rho
等又利用卵母细胞体外培养
成熟、体外受精 的方法获得了牛胚胎
,
移植
12
枚四分胚给
6
头受体
,
获得
2
头四分胚的犊牛
,
这是第一次利
用体外胚分割得到活体后
代。当然
,
胚胎并不是随着分割次数的增加
,
产生的克隆动物就越多。如果超过四分割以上则产生的克隆动物个体数可能反而减少
,
甚至一
个也得不到。 为了使胚胎分割技术更便于在生产中推广应用
,
一些学
者开始对这种显微操作技术加以 改进
,
简化其方法并避免使用昂贵仪
器
,
而采用在体视显微镜下徒手 操作的简易方法进行胚胎分割。
1988
年
Williams
用止血钳夹 住用刮胡刀片制成的显微手术刀片分割
7
龄
牛胚得到了同卵双生牛犊。
我国家畜胚胎分割及相关的研究工作,
自
20
世纪
80
年代晚期 以后
进展也很快。
1986
年窦忠英等得到了国内首批分割胚牛犊
(
单生
) ,
该实验将分割所 得的半胚装入透明带后移植受体与裸胚直接移植受
体的产仔率均为
25
%
。
谭丽玲等
(
1988
年)
对兔胚胎进行了半胚分割,
并获得 仔兔。
1989
年,
江苏农科院、
中科院遗传所获得山羊鲜胚分割
羔 羊;同年,张涌等也获得了山羊鲜胚和冻胚分割羔羊;此外,
我国
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