人乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)定量检测试剂盒(ELISA)

2021年1月20日发(作者：尤太忠)


仅供科研使用，不得用于临床检验。


人乙型肝炎病 毒表面抗体（
HBsAb
）定量检测试剂盒
（
ELISA
）

说明书


【产品名称】

通用名称：人乙型肝炎病毒表面 抗体（
HBsAb
）定量检测试剂盒（
ELISA
）

英文名称：
Human Hepatitis B surface Antibody
（
HBsAb
）
ELISA KIT

【包装规格】

48
人份
/
盒，
96
人份
/
盒


【预期用途】

仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人 乙型肝炎病毒表面抗体
（
HBsAb
）的浓度。


【检验原理】

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（
ELISA< br>）。在预包被抗人乙型肝炎病毒
表面抗体（
HBsAb
）抗体（固相抗体）的微 孔酶标板中，加入人乙型肝炎病毒表面抗体
（
HBsAb
）校准品和待测样本，再加入
HRP
标记的人乙型肝炎病毒表面抗体（
HBsAb
）抗体
（酶标抗 体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体
-
抗原
-
酶标抗体的复合物。加底物
A
和
B
，底物在
HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液
（
2M
硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶 标仪上测定吸光度（
OD
值），吸光度（
OD
值）
与待测样品中人乙 型肝炎病毒表面抗体（
HBsAb
）的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计
算出样本 中人乙型肝炎病毒表面抗体（
HBsAb
））的浓度。


仅供科研使用，不得用于临床诊断。



【主要组成成分】

主要成分

组分

校准品

包被微孔板

HRP
标记抗体

底物液
A
底物液
B
20×浓缩洗涤液

说明书

自封袋

不干胶

数量

0.5ml/
管
*6
管

96T
10mL
6mL
6mL
30mL
1
份

1
个

2
片

主要成分

抗原配制的
6
个浓度标准品

预包被固相抗体

HRP
标记的检测抗体

过氧化脲工作液

TMB
工作液

含
0.15%Tween20
的
PBS
--
--
--
校准品浓度依次为：
16
、
8
、
4
、
2
、
1
、
0 ng/ml
。校准品已经通过测试，结果表 明
HBs
抗原阴性，
HIV1
、
HIV2
和
HCV
抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些
物质，本品必须按照具有潜在的感染 性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。


需要但未提供的材料及耗材

1
、酶标仪

2
、精密移液器及一次性吸头

3
、蒸馏水

4
、洗瓶或者自动洗板机

5
、37℃水浴锅或恒温箱

6
、
500ml
量筒

7
、无粉一次性乳胶手套

8
、质控品


【储存条件及有效期】

1
、
2-
8℃保存，切勿冷冻，有效期
6
个月。

2
、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放
回2-
8℃冰箱。

仅供科研使用，不得用于临床诊断。

2

3
、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和
HRP标记抗体，有效期为
14
天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。


【适用仪器】


半自动的酶标仪，如
Thermo MK3
，或者国产酶标仪。


【样本要求】


样本类型和采集

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用 叠氮钠做为防腐
剂。

1
、细胞培养上清：
4000rpm
条件下离心
20min
，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在
- 20
℃以下，避免反复冻融。

2
、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操 作过程中避免任何细胞刺激，
4000rpm
条
件下离心
20min
，小心地分离出血清，保存在
- 20
℃以下，避免反复冻融。

3
、血浆：肝素，
EDTA
，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在
4000rpm
条件下 ，离心
20
分钟取上
清，血浆保存在
-20
℃以下，避免反复冻融。


样本保存和稳定性

样本在
2-8
℃条件下，可以储存
72h
，或者在
- 20
℃储存
6
个月。样本收集后，不是一次
检测完，请按一次用量分装冻存，避免 反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分
解冻。


【检验方法】

试剂准备

1
、使用前，所有的组分都要至 少复温
120min
，确保充分复温到室温。

2
、浓缩洗涤液：从 冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热
使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏 水，按
1:20
稀释，即
1
份的浓缩洗涤液，添加
19
份的
蒸馏水。

3
、底物：底物液
A
和
B
，在 使用前，按
1:1
体积充分混合，混合后
15
分钟内使用。


操作程序

仅供科研使用，不得用于临床诊断。

3