试管婴儿可以选性别吗常见的微生物检测办法

2021年1月19日发(作者：试管生化后多久流出)
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摘要：



微生物的检测，
无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，
本文分生长
量测定法，微生物计数法，生 理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物
重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余 种常用的检测方法，简要介绍了这些方
法的原理，应用范围和优缺点。




概述：




一个微生物细胞在合适的外界条 件下，
不断的吸收营养物质，
并按自己的代谢方式
进行新陈代谢。
如果同化作 用的速度超过了异化作用，
则其原生质的总量
（重量，
体积，
大小）就不断增 加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组
分是按恰当的比例增长时，
则达到一定程度后就会发生繁殖，
从而引起个体数目的增加，
这时，原有的个体已经发展成一 个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了
这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓 度作指标来衡量。微生物的生长不同
于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情 况下也没有实际意
义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖
是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。
因此生长繁殖情况就可作为研究各种
生理生化和遗传等问题的重要指标，
同时，
微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，
霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。
所以有必要介绍一下微生物生长情况
的检测 方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以
次为根据，而测定繁殖则 都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重

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量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。




生长量测定法




体积测量法：又称测菌丝浓度法。




通过测定一定体 积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
方法是，
取一
定量的待测培养液（ 如
10
毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如
5
分钟）和转 速（如
5000rpm
）
，离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为
v
，则菌丝浓度
为（
10-v
）
/10
。菌丝浓度测定法是大规模工 业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指
标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理 条件，否则偏差很大，由
于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。




称干重法：




可用 离心或过滤法测定。一般干重为湿重的
10-20%
。在离心法中，将一定体积待
测培 养液倒入离心管中，
设定一定的离心时间和转速，
进行离心，
并用清水离心洗涤
1-5
次，
进行干燥。
干燥可用烘箱在
105
℃或
100
℃下烘干，
或采用红外线烘干，
也可在
80
℃
或
4 0
℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸
纤维膜等滤 膜过滤，
过滤后用少量水洗涤，
在
40
℃下进行真空干燥。
称干重发 法较为烦
琐
，
通
常
获
取
的
微
生< br>物
产
品
为
菌
体
时
，
常
采< br>用
这
种
方
法
，
如
活
性
干< br>酵
母
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（
activity dry yeast,ADY
）
,
一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。




比浊法：




微生物 的生长引起培养物混浊度的增高。
通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸
光值，判断微生物的 生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种
特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入 光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长
情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监 测。如我所使用
UNICO
公司
的紫外
-
可见分光光度计，在波长< br>600nm
处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值
OD600
，以此监控
的生长及诱导时间。




菌丝长度测量法：




对于丝状真菌和一些放线菌，< br>可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，
或
是利用一只一端开口并带有刻度的细 玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端
接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡 量丝状微生物的生长。微生物计
数法




血球计数板法
:



血球计数板是一种有特别结构刻度 和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，
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中央有一短横沟和两个平台 ，
两嵴的表比两平台的表面高
0.1mm
，
每个平台上刻有不同
规格 的格网，中央
0.1mm2
面积上刻有
400
个小方格。通过油镜观察，统计 一定大格内
微生物的数量，即可算出
1
毫升菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观 ，快捷，但
只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，
并且所得结果是 包
括死细胞在内的总菌数。




染色计数法：




为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，
而直接用血球计 数板法又无法区分死
细胞和活细胞的不足，
人们发明了染色计数法。
借助不同的染料对 菌体进行适当的染色，
可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色 后在
显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。




比例计数法：




将已知颗粒
（如霉菌孢子或 红细胞）
浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比
例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的 数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数
方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。




液体稀释法：