做试管婴儿前需要哪些检查东湖水质检测

2021年1月19日发(作者：试管前白蛋白)

东湖水质的检测

摘要
：
本试验通过检测东湖水中的大肠 菌群来检测东湖水质。取东湖水样，制作合适的稀释梯度，每一稀
释度
5
支试管，在< br>37
℃下培养后，产酸或产气为阳性
;
阳性试管转接至
45
℃ 下培养，产气为阳性。将两个
温度下的阳性试管中的菌液接种到伊红美蓝培养基中培养，以及进行革兰氏 染色，进一步验证确实有大肠
杆菌。根据证实为阳性的管数，查
MPN
检索表，得到< br>100mL
水样中大肠菌群数量为
54000MPN/100mL
，属于
劣五类水质。东湖治理迫在眉睫！

关键词：
东湖水质

大肠菌群

检测

前言

我们武汉大学坐落于东湖 之滨，
东湖与我们的生活息息相关，
东湖的水质直接影响到我
们的生活质量和身心健康 ，因此，进行东湖水质检测、治理水体污染至关重要。

国家颁布的
《生活饮用水标准 检验方法微生物指标》
是衡量水质的权威指标，
按照这一
文件对东湖水样用多管发酵法 进行实验，
将实验结果与标准进行比对即可判断水质情况。
本
实验按照文件标准进行， 可了解东湖的污染情况，并采取相应的治理措施。

目的和意义

1
、

学习检测水中大肠杆菌数的基本原理和操作方法。

2
、

了解水中大肠杆菌总数和耐热大肠杆菌数与水质的关系。

3
、

巩固微生物实验操作技术，培养设计实验和结果分析的能力。

4
、

通过实验了解东湖水质污染的严重性，提高环保意识。

材料与方法

1.
实验材料

1.1
水样

东湖水样

1.2
培养基

乳糖蛋白胨培养液、
EC
培养基、伊红美蓝培养基

1.3
实验仪器和试剂


试管，接种环，恒温水浴箱，恒温 培养箱，移液管，显微镜，平皿，小倒管，载玻片，
滤纸，擦镜纸，蒸馏水，结晶紫染液，卢戈氏碘液，
95%
乙醇，沙黄复染液

2.
实验方法

2.1
取样

取样地点为烟霞桥，如下图：

本步骤已由教师完成。


2.2
制备样管


取三支试管，依次编为
1
、
2
、
3
号，
1
号管为空，
2
、
3
号管中加入
9mL
无菌生理盐水 。

向
1
号管中加入
10mL
水样，再从中吸取
1 mL
加入
2
号管中，混匀后，吸取
1mL
加入
3
号 管
中，混匀。
1
、
2
、
3
管备用。

2.3
总大肠菌群检测

总大肠菌群是指一群在
37
培养< br>24h
能发酵乳糖、产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏
阴性无芽孢杆菌。
< br>2.3.1
将
15
支装有
9mL
乳糖蛋白胨培养液和德汉氏小 管的试管编号，依次编为
1-1
、
2
、
3
、
4、
5
，
2-1
、
2
、
3
、
4
、
5,3-1
、
2
、
3
、
4
、< br>5
。

2.3.2
从
1
号管中依次吸取
1m L
菌液加入编号为
1-1
、
2
、
3
、
4< br>、
5
的试管中，制成稀释度为
-1
10

的菌液，再 从
2
号管中依次吸取
1mL
加入编号为
2-1
、
2
、
3
、
4
、
5
的试管中，制成稀释
-2
度为
10
的菌液，再从
3
号管中依次吸取
1mL
加 入编号为
3-1
、
2
、
3
、
4
、
5
的试管中，制成
-3
稀释度为
10
的菌液。把
3
个稀释度的试管摇匀，备用。

2.3.3
先将
15
支试管放在
37
℃的恒温水浴槽中保温
3-5
分钟，
取出后置于
37
℃的恒温培养
箱中培养
24
小时，第二天取出，观察是否产酸或者产气。记录结果并拍照。

2.4
耐热大肠菌群的检测


用提高培养温度的方法将自然 中的大肠杆菌和粪便中的大肠杆菌区分开来，在
45
℃条
件下仍能生长的为耐热大肠杆 菌。

2.4.1
从
2.3.3
中产酸或产气的试管中吸取
50uL
加到有
EC
培养液的试管中，
将这些试管对
应的编号为1-1
’、
2
’……直到将所有的呈阳性的试管转接完。

2. 4.2
将原来的
15
支试管放回
37
℃的恒温箱中保存。
新 接的试管先在
45
℃的水浴槽中保温
3-5
分钟，再转入
45
℃的恒温培养箱中培养
24
小时，第二天取出，观察是否产气。记录结
果并拍照。< br>
2.5
分离培养

2.5.1
将
37
℃条 件下产酸或产气的试管接种到伊红美蓝琼脂平板上，于
37
℃恒温培养箱中
培养
24
小时；
将
45
℃条件下产气的试管接种到伊红美蓝琼脂平板上，
置于
45
℃恒温培养箱
中培养
24
小时。

2. 5.2
第二天取出平板观察菌落的形态，挑取符合下列特征的菌落做革兰氏染色并镜检：


深紫黑色、具有金属光泽的菌落；

紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落；

淡紫红色、中心较深的菌落。

观察后记录结果并拍照。

结果与讨论

1
．实验结果

1.1
总大肠菌群检测结果

观察
37
℃条件下培养的试管内菌液颜色及小倒管内是否有气体产生，可知编号为
1-1< br>、
2
、
3
、
4
、
5
，
< br>2-2
、
3
、
4
、
5
及
3-1的试管既产酸又产气，编号为
2-1
及
3-4
的试管只产酸
不产 气，均为阳性试管，编号为
3-2
、
3
、
5
的试管既不产酸 也不产气，为阴性试管。部分结
果如下图所示：


编号
1-3
，产酸产气

编号
2-1
，只产酸不产气


编号
3-5
，既不产酸也不产气

1.2
耐热大肠杆菌检测结果

观察在
45
℃条件下培养的 试管内小倒管中是否有气体，
可知编号为
1-1
’，
1-3
’
,2-2
’
及
3-4
’的试管中产气，呈阳性，其他试管均呈阴性。部分结 果如下图：