试管打降调是什么意思ABO血型正、反定型

2021年1月19日发(作者：试管胚胎着床后HCG才升高吗)

























ABO
血型正、反定型操作规程

[
目的
]





保证
ABO
血型鉴定准确，确保临床输血安全。

[
适用范围
]





XXX
医院输血科

[
职责
]





具有专业技术的工作人员主要负责本院输血
（或备血）
标本的
ABO
血型鉴定
（但
只对该单份标本负责）
。

[
相关文件
]





试剂采购、保存和使用管理程序






设备采购、使用管理程序






消毒与清洁管理程序






标本采集、运输、保存和报废管理程序

紧急用血管理程序

[
相关记录
]





仪器设备的采购、使用和维护记录






仪器的温度记录






恒温水温箱的换水和消毒记录






消毒液的配置记录






清洁消毒记录






试剂采购、使用记录






标本交接和报废记录






紧急用血记录

[
实验原理
]


< br>ABO
血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在
A
凝集原的称为
A
型，
存在
B
凝集原的称为
B
型。而血清中还存在凝集素 。当
A
凝集原与抗
A
凝集素相遇
或
B
凝集原与抗< br>B
凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般
A
型血清中含有抗
B< br>凝集素，
B
型血清中含有抗
A
凝集素，
因此可以用标准血清中 的凝集素与被测者的
红细胞反应（称为正定型）
，用标准红细胞与被测者血清中的凝集素反应（ 称为反定
型）
，以确定其
ABO
血型。


[
仪器器械
]





< br>玻璃试管、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、普通离心机、试管架、
恒温水温箱、试剂保 存冰箱、标本保存冰箱。

[
试剂
]





抗
A
标准血清、抗
B
标准血清、
A< br>型标准红细胞、
B
型标准红细胞、
O
型标准
红细胞、生理盐水 。以上试剂均为有合格证件的正品。

[
标本收集与处理
]
1．受检者血清：采集受检者静脉血
2
~
3ml
，经
1000r/ min
离心
1
分钟或室温静
置
1
小时后取上清。

2
．
2
~
5%
的受检者红细胞：采集受检者静脉血或末梢血 ，用生理盐水制成
2
~
5
％
红细胞盐水悬液备用，制备方法见本节质 量控制和注意事项。


3
．标本出现中度以上溶血者，为不合格标本，不能用于检测。

[
实验方法与步骤
]


血型的正定型（试管法）
：


1




























⑴、取
2
支试管，分别标上抗
A
和抗
B
；




⑵、制备待测标本
2~5%
的红细胞悬液（取
1
支试管，加入
2ml
生理盐水，再加
入
1
滴待测标本红 细胞，混匀备用）
；




⑶、在抗
A
管中加入
2
滴抗
A
标准血清，在抗
B
管中加入
2< br>滴抗
B
标准血清；

⑷、在抗
A
和抗
B管中分别加入
1
滴已制备好的待测标本
2~5%
红细胞悬液；

⑸、混匀后，立即对称放入离心机中进行
1000r/min
离心
1
分钟，或室温静置
1
小时，再轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，先肉眼观察有无凝集现 象，如内
眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

⑹根据有无凝集现 象判定结果如下。注意凝集强
度，此有助于
A
、
B
亚型、类
B
或
cisAB
的发现。


ABO
血
抗
A
标准血
抗
B
标准血清


型

清


A
型

＋

－


B
型

－

＋



O
型

－

－


AB
型

＋

＋



⑺凝集强度判断标准

4
十


红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。


3
十


红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。


2
十


红细胞凝块分散成许多小块，
见到游离红细胞。

1
十


肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。


土

镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多

游离红细胞。

MF
混合凝集外观
(mixed
field)
是指镜下 可见少数红细胞凝集，而极大多数红细
胞仍呈分散分布。



一

表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。


血型的反定型（试管法）
：

⑴、取
3
支试管，分 别标上
A
、
B
和
O
；




⑵、在
3
支试管中分别加入
2
滴待测标本的血清；




⑶、将
ABO
标准红细胞轻轻地充分混匀后，在A
管中加入
1
滴
A
型标准红细
胞，在
B
管中加入
1
滴
B
型标准红细胞，在
O
管中加入
1
滴
O
型标准红细胞；

⑷、混匀后，对称放入离心机中进行
1000r/min
离心
1
分钟（或
3400 r/min
离心
15
秒）
；

⑸、取出后，先观察是否溶血 （溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染）
，再轻
轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不 易分辨的用显微镜观察；

⑹根据有无凝集现象判定结果如下。注意凝集强度，此有助于
A
、
B
亚型、类
B
或
cisAB
的发现。

ABO
血型

A
型标准红细胞

B
型标准红细胞

O
型标准红细胞

A
型

－

＋

－

B
型

＋

－

－

O
型

＋

＋

－

AB
型

－

－

－


2

























⑺凝集强度判断标准

（同
ABO
血型的试管法正定型）

[
质量控制和注意事项
]
1
、分型标准血清试剂必须为三证齐全的 合格产品，质量性能符合要求，且在有
效期内使用。
试剂开封后必须贴上注有开封日期和开封人 的标签，
使用后应及时置于
2~8
℃专用冰箱中保存，以免细菌污染和变质而影响试验 结果。试剂开封后有效期为
一周。

2
、商用分型标准红细胞试剂必须为三证 齐全的合格产品，质量性能符合要求，
且在有效期内使用；
自制分型标准红细胞试剂必须以3
个健康者同型新鲜红细胞混和，
用生理盐水洗涤
1
~
3次，以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原，再制成
2
~
5%
的
红细胞悬液备用。
试剂开封或制备后必须贴上注有开封或制备日期和开封人或制备人
的标签， 使用后应及时置于
2~8
℃专用冰箱中保存，以免细菌污染和变质而影响试验
结果。试 剂开封或制备后有效期为一周。

3
、生理盐水启用后，有效期为二周。
< br>4
、所有试剂在使用时，必须检查是否有浑浊、变色、凝集等变质现象；凡可疑
者，必须 更换新的试剂进行检测。若分型标准血清使用时间较长后，最好用已知的
ABO
标准红细胞检查 结果是否与已知的血型相符；若分型标准红细胞使用时间较长
后，
最好用已知的分型标准血清检 查结果是否与已知的血型相符，
以防标准血清或红
细胞制品污染、变质失效而造成鉴定错误。< br>
5
、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

6
、操 作方法应按规定进行，一般应先加血清，后加红细胞悬液，以便容易核实
是否漏加血清。
7
、
IgM
抗
-A
和抗
-B
与相应红细胞的反 应温度以
4
℃为最强，但为了防止冷凝集
现象的干扰，一般仍在室温
(20< br>~
24
℃
)
内进行试验，
37
℃可使反应减弱。
8
、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
用试管法进行
ABO
血型的正定型时不能测出亚型（如
A
X
），需延长作用时间。

9
、
在反定型试验中，
如果受检者的血清 或血浆与
O
型标准红细胞产生阳性反应，
则需要添加自身对照试验。如果自身对照试验 为阳性，表明是自身冷凝集素导致。如
果自身对照试验为阴性，则表明被检者血清或血浆中可能存在ABO
系统以外其它系
统的抗体干扰，此时需做其它相关试验加以解决上述定型问题。
10
、
对含有较多自身冷凝集素的受检者，
在使用标准血清进行正定型 时往往被误
定为
AB
型，
遇到此种情况，
需用
37
℃生理盐水洗涤受检者的红细胞
2~3
次，
以去除
吸附在红细胞上的冷凝集素 ，然后再鉴定血型。

11
、观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱 状排列的区别。对
于可疑结果，必须更换所用的试剂，重新检测。

12
、对 于可能存在不完全抗原的时候，应在各反应中加入凝聚胺试剂，以检验不
完全抗原的存在。

13
、判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。

14
、
2
~
5%
红细胞悬液的配制：先用生理盐水洗涤红细胞
3
次，再根据 下表进行红
细胞悬液的配制。

悬液浓度（
%
）

压积红细胞（滴）

盐水（滴）

2
1
40(2ml)
5
1
16 (0.8ml)
[
临床应用
]
用于检验人的
ABO
血型归属。



3