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肺炎支原体肺炎的诊断
空军总医院
刘春灵
支原体是介于细菌和病毒之间的一类缺乏细 胞壁、
呈高度多型性、
能通过滤
菌器、
可在无生命培养基中生长繁殖的最小原 核细胞型微生物。
迄今分离到的支
原体已达
150
余种,已确定与人类疾病关 系最大的有
3
种,肺炎支原体
(
mycoplasma pneumonia, MP
)是其中的一种。
MP
在国内外都是儿童和成人呼
吸道感染的重要病原体之一,
主要导致肺炎,
所有肺炎的
15-20%
,< br>约
50%
的儿童
和青少年肺炎是由
MP
引起的
.因此
MP
肺炎(
MP pneumonia,MPP
)是常见病和多发病。但迄今为止,
MPP
仍缺乏快速、可靠的诊断试验,因而临床确诊困难。
MPP
的诊断包含两个层面:临床诊断(经验性)和结合了实验室病原学检测
的确定诊 断。
一、
MPP
临床诊断:根据流行病学、临床症状、体征、实验室辅助检 查等特
点经验性综合判断而出。
MPP
有着不同于一般感染性疾病的的特点:一般肺炎 多
发于冬季,
MPP
一年四季均可发病,但多发生于夏秋季节;临床症状大多只有发< br>热和咳嗽;外周血白细胞总数大多不高;疾病早期
X
线检查即可出现肺炎,约
1 0%-20%
的病例会出现肺不张;因
MP
无细胞壁,临床常用的、作用于细胞壁的、
安全性高的治疗肺炎的药物如
β
-
内酰胺类的青霉素类、头孢类抗生素对其无 作
用;
因此易被误诊为病毒性肺炎。
综合上述特点,
可作出初步的经验性临床 诊断。
二、实验室病原学诊断:包括直接病原体检测和血清学检测。下面介绍几
种常 用或经典的
MP
实验室诊断方法。
(一)直接病原体检测:主要有
MP
分离培养和聚合酶链反应(
PCR
)法检
测
MP-DNA
。检测用标本可取自可疑患者呼吸道的痰、咽拭子、鼻咽吸出物、支
气管肺泡灌洗液、胸水等。
1
、
MP
分离培养与鉴定:
MP
很挑剔,培养基的营 养要求比一般细菌高,生
长速度慢,
较一般细菌难培养;
分离培养需要
10- 14
天,
而通常需要
2-5
周才能
生长成肉眼可见的菌落。
通过生化反应和免疫学方法进行鉴定。
还有其它影响因
素,如
MPP
无细胞壁 ,对环境的影响更为敏感,易被灭活;标本采集后接种到培
养基的过程也是培养可能失败的一个环节。由 于其费时、费力、阳性率低,实际
临床已经弃用此方法,目前主要用于研究性项目。
2
、
PCR
法检测
MP-DNA
:
PCR
是一种模拟体内
DNA
复制的体外扩增法,以其
灵敏性、
特异性高,
检测所需时间短,
能够直接从标本中检出病原体并可定量及
分型,已广泛应用于各种感染性疾病 的诊断中,如
SARS
、禽流感、
A/H1N1
流感
的确诊都主要用 此方法。常用于
MP
检测的是双引物两次扩增反应的套(巢)氏
PCR
(nested
PCR
,
nPCR
)和基于荧光能量传递技术的实时定量
PCR
(
real-time
quantitative
PCR
)
,其中实时定量
PCR
可以检测到少于
5
个基因拷贝的< br>MP
。美
国
1996
年的一次
MP
感染暴发的流行病 学调查,
对部分患病者的呼吸道分泌物以
PCR
检测
MP-DNA
阳 性率为
57%
,同样患者的
MP
培养阳性率仅
5%
。
3
、直接镜检:
MP
没有细胞壁而没有固有型态而呈高度多型性,且革兰 氏染
色不易着色,因此难于用光学显微镜观察。
(二)血清学检测:检测
M PP
患者血清抗体有多种方法,传统、经典和常
用的有
4
种,
为冷凝 集试验、
补体结合试验、
间接血凝试验、
酶联免疫吸附试验。
1
、冷凝集试验(
CA
)
: MP
感染后患者血清中产生一 种非特异性冷凝集素
(
IgM
型)
,可能是
MP
作用于红细 胞Ⅰ型抗原,使其变性后产生的自身抗体。将
患者的稀释血清与人
O
型红细胞混合,< br>4
℃过夜,观察红细胞凝集现象,放
37
℃
后其凝集现象消失,
故称为冷凝集试验。
Garrow
建立了一种快速方法:
取
0.2ml全血,加
0.2ml
3.8%
枸橼酸纳混合,置于
0-4
℃冰 箱中
15-30
秒取出,倾斜试管
观察凝集情况,如有粗大絮状颗粒是为阳性。仅有< br>50%
左右的
MPP
患者冷凝集试
验阳性,一般在发病一周末或第二周 开始时出现,
2-3
月后消失。但传染性单核
细胞增多症、流感、风疹、腮腺炎、腺病 毒感染和其他病毒性疾病也可出现低效
价阳性,因此冷凝集试验的特异性不高,只能作为辅助诊断指标。
2
、补体结合试验(
CF
)
:
补体结合试验是 一种传统的免疫学技术,
是用免疫溶血机制做指示系统,
来
检测另一反应系统抗原或抗 体的试验。
如试验血清中不含抗体,
则补体不被结合,
在指示系统中能引起溶血;如有 抗体存在,则指示系统不发生溶血。早在
1906
年
Wasermann
就将 其应用于梅毒的诊断,即著名的华氏反应。
CF
的优点是:①
灵敏度高:
补体 活化过程有放大作用。
②特异性强:
各种反应成分事先都经过滴
定,
选择了最 佳比例,
出现交叉反应的机率较小。
但是补体结合试验参与反应的
成分多,
影 响因素复杂,
操作步骤繁锁并且要求十分严格,
稍有疏忽便会得出不
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本文更新与2021-01-18 05:01,由作者提供,不代表本网站立场,转载请注明出处:http://www.xapfxb.com/yuer/413841.html
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