乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒

2021年1月12日发(作者：年轻人心力衰竭的症状)
乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)
Yixingganyan Bingdu Biaomian Kangyuan Zhenduanshijihe
(Meilianmianyifa)
Diagnostic Kit for Hepatitis B Surface Antigen (ELISA)


本品系用乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）包被的微孔板和酶标记抗-HBs及其他试剂
制 成，应用双抗体夹心酶联免疫法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原
（HBsAg）。
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合 “凡例”的要求。
2 制造
2.1 专用原材料
2.1.1 抗-HBs
可使用HBsAg多克隆抗体或单克隆抗体，
抗体的活性、纯度应符合要求
。
2.1.2 辣根过氧化物酶
（或其他适宜标记的酶）

辣根过氧化物酶的RZ值应不低于3.0，
其他酶的纯度应符合相应的要求
。
2.1.3 阳性对照用血清或血浆
HBsAg检测为阳性的
人
血清或血浆。
2.1.4 阴性对照用血清或血浆
HBsAg检测为阴性的人血清或血浆。
2.1.5 微孔板
CV（%）应不高于10%。
2.2 制备程序
2.2.1 纯化包被抗体
采用盐析法、离子交换层析法纯化，亦可采用其他适宜的纯化方法。抗体纯度用非还
原性SDS -PAGE或其他方法测定，纯化后抗体的活性、纯度应符合要求，于低温下保存。
2.2.2 酶标记抗体的制备
抗体纯化及鉴定方法同2.2.1项，采用常规过碘酸钠-乙二醇法或其他适宜方法 进行
辣根过氧化物酶或其他酶标记，酶标记后抗体的活性、纯度应符合要求，加入适当保护剂于
低温下保存。
2.2.3 包被抗体浓度和酶标记抗体浓度的选定
采用方阵滴定法选择最佳包被抗体浓度和酶标记抗体的工作浓度。
2.2.4 包被抗体板的制备
采用最佳包被浓度的抗体包被微孔板孔，经封闭、干燥和密封等处理后，保存于2～
8℃。对包被板须抽样检定，应符合3.1.1～3.1.4项和3.1.7项要求。
2.2.5 阳性对照
选用HBsAg检测为阳性的人血清或血浆，经60℃加温1小时处理后，除菌过滤，置2～

1
8℃保存。也可采用重组抗原配制。
2.2.6 阴性对照
选用HBsAg ELISA法检测为阴性的5份以上人血清或血浆混合，
经60℃加温1小时 处
理后
，除菌过滤，置2~8℃保存。
2.2.7反应时间的设置
检测过 程中加入样本后反应时间应不低于60分钟，加入酶结合物后反应时间应不低
于30分钟，加入显色液后 反应时间应不低于30分钟。
2.3 半成品检定
按3.1项进行。
2.4 成品
2.4.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2 分装与冻干
应符合“生物制品分装与冻干规程”规定，分装或冻干后保存于2~8℃。
2.4.3 规格
应为经批准的规格。
2.4.4 包装
应符合“生物制品包装规程”规定
3 检定
3.1 半成品检定
3.1.1 阴性参考品符合率
用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，不得出现假阳性。
3.1.2 阳性参考品符合率
用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定， 检测3份浓度值大于5×
10IUml的HBsAg阳性参考品，不得出现假阴性。
3.1.3 最低检出量
用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，HBsAg adr、adw及ay亚型的
最低检出量应符合要求。
3.1.4 精密性
用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，CV（%）应不高于15%(n=10)。
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3.1.5无菌检查
依法检查（附录 XII A）含有蛋白成分的液体组分，半成品加防腐剂分装后留样做无
菌检查，采用直接接种法，应符合规定。
3.1.6 水分
冻干组分水分应不高于3.0% （附录 VII D）。
3.1.7 稳定性试验
试剂各组份放置37℃至少3天（有效期为6个月），检定结果应符 合3.1.1～3.1.4项
要求。

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3.2 成品检定
3.2.1 物理检查
3.2.1.1 外观
液体组分应澄清透明；冻干组分应呈白色或棕色疏松体。
3.2.1.2 溶解时间
冻干组分应在3分钟内溶解。
3.2.2阴性参考品符合率
同3.1.1项。
3.2.3阳性参考品符合率
同3.1.2项。
3.2.4 最低检出量
同3.1.3项。
3.2.5精密性
同3.1.4项。
3.2.6 稳定性试验
出厂前进行，方法同3.1.7项。
4 保存、运输及有效期
于2~8℃避光保存，有效期
自组装之日
起计算，按批准的有效期执行。
5 使用说明
应包括以下主要内容：
【制品名称】
通用名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)
汉语拼音：Yixingganyan Bingdu Biaomian Kangyuan Zhenduanshijihe
(Meilianmianyifa)
英文名称：Diagnostic Kit for Hepatitis B Surface Antigen (ELISA)
【定义】
本品系由抗- HBs包被的微孔板和酶标记抗- HBs及其他试剂配套组成，应用双抗体夹
心法原理检测人血清或血浆中的HBsAg。
【试剂盒组成】
本试剂盒应包括下列主要成份：
(1) 包被抗体的微孔板
(2) 酶标记抗体
(3) 底物及其稀释液
(4) 洗涤液
(5)阳性对照和阴性对照
【使用方法】
①每次实验每板设2孔阳性对照和3孔 阴性对照及空白孔，其余孔加待测样品。37℃
或其他适宜温度下放置后，用洗涤液充分洗涤后，拍干。 在规定温度下，放置规定时间。

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② 加酶标记抗体，空白孔不加，37℃或其 他适宜温度下按规定的反应时间放置后，
用洗涤液充分洗涤，拍干。
③各孔加入底物溶液，显色，在规定温度下，放置规定时间，加终止液终止反应。
【结果判定】
使用酶标仪，按规定波长测定各孔吸光值（A值）。各生产单位应对试剂盒检测 结果判
断提出明确的判断标准。
【注意事项】
(1) 不同批试剂组份不得混用。
(2) 试剂盒应按含有传染性材料对待。
【保存及有效期】
于2～8℃避光保存，在有效期内使用。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
【企业名称】
【生产地址】
【邮政编码】
【电话号码】
【传真号码】
【网址】


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