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莫扎特胎教音乐海带粉对乳腺增生模型小鼠血清激素水平的影响

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-10 07:44

手上黄褐斑-百立乐奶粉

2021年1月10日发(作者:大人37°2度算发烧吗)
海带粉对乳腺增生模型小鼠血清激素水平的影响
摘要 目的:观察海带粉对乳腺增生症(Hyperplasia of mammary gland, HMG)小
鼠血清激素的影响。方法:采用注射苯甲酸雌二醇、黄体酮建立小鼠HMG模型,
将造模成功的 小鼠随机分为5组,即正常组、模型组、海带粉低、中、高剂量组,
给药30天后,测量各组小鼠同侧第 2对乳头的高度及直径;HE染色观察各组小
鼠乳腺组织变化;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测 血清雌二醇(Estradiol2,E2)、
孕酮(Progesterone,P)和促乳素(Pr olactin,PRL)、组织血管内皮生长因子
(VEGF)的含量。结果:与正常组比较,模型组 小鼠乳头直径、乳头高度增加
(P<0.05),模型组小鼠乳腺组织中腺泡数目增多,腺泡和导管增生 、扩张,细胞排
列紊乱,表现出典型的乳腺增生症状。与模型组比较,各给药组乳房直径、乳头
高度降低(P<0.05),海带粉各剂量组小鼠乳腺增生小叶和腺泡数量减少,血清E2、
PRL、V EGF含量降低,P含量升高(P<0.05),海带粉高剂量组乳房直径减小
(P<0.05),海带 粉各剂量组E2、PRL、P含量及VEGF含量差异无统计学意义。结
论:海带粉能减轻HMG发展, 其作用与降低小鼠血清E2、PRL、VEGF以及升高
P含量有关,可能与通过下调VEGF等途径促 进细胞凋亡有关。
关键词 海带粉;乳腺增生症(HMG);雌激素;细胞凋亡;动物实验;小鼠
乳腺增生症(Hyperplasia of mammary gland, HMG)是临床上常见的妇科疾 病,
也是乳腺癌的主要诱发因素[1]。随着生活环境改变及生活节奏的加快,HMG发
病率逐 年升高,已对女性患者身心健康造成严重影响[2]。目前临床上对HMG还
没有一种适用性广且疗效肯 定的治疗方案,且其发病机理尚不明确,因此对其机
理和治疗进行研究非常必要。目前中西医结合临床治 疗HMG得到广泛应用,有
学者研究发现,海藻可能对乳腺增生有一定的作用,但属海藻褐藻门,来源丰 富,
价格低廉,作为药食同源品的海带对乳腺增生的影响尚未有结论。且国内外尚没有
专门用海 带粉探究其对乳腺增生模型小鼠血清激素水平的影响的研究或实验。因
此本实验以小鼠为研究对象,建立 乳腺增生模型,探究海带粉对乳腺增生模型小
鼠血清激素水平的影响,为乳腺增生治疗提供一定的理论依 据。。故本研究利用
小鼠HMG模型,观察海带粉治疗HMG作用机制,为其临床应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1实验动物清洁级SD雌性未孕小鼠50只,体质量(103.58±6. 78)g,购自长沙医
学院实验动物中心,实验室室温控制在(22±3)°C,相对湿度45%~55 %,动物自由
饮水,适应性饲养1周后开始实验。
1.2试剂及药品他莫昔芬片(批号201 80506),辽宁一成药业有限公司。苯甲酸雌
二醇注射液(批号161109),广州白云山明兴制 药有限公司。黄体酮注射液(批号
170111),浙江仙琚制药股份有限公司。血清雌二醇(Estr adiol,E2)试剂盒,货号:
A001-3;孕酮(Progesterone,P)试剂盒,货 号:A001-3;以上两检测盒均购于上海
酶联生物科技有限公司。海带粉处方浸提液由长沙医学院附 属第一医院制备,海
带粉处方(中药饮片)纯净水浸泡30min,每次加水3L煎煮,共煎煮3次,将 3次
煎煮液合并后浓缩,最终制成含生药3gL的浸提液,-4℃保存备用,灌胃给药剂
量按照 临床用量10倍给药,每天1次。其余试剂均为国产分析纯。
1.3主要仪器离心机(北京医用离心机 厂);DK-80型电热恒温水浴槽(广东环凯微生
物科技有限公司);W-80A漩涡混合器(上海医 大仪器厂);酶标仪(美国赛默飞舍公
司)。
1.4模型制备及动物分组造模,从50只小鼠 中随机选取10只作为对照组,其余
40只用雌、孕激素序贯法进行造模,按体质量0.5mg(kg* d)于小鼠后肢后外侧肌
肉注射苯甲酸雌二醇,每天1次,左右交替,连续25天,继而腹腔注射黄体酮 ,
4mg(kg-d),每天1次,连续5天,在造模过程中每3天测量1次体质量,根据
其体 质量的变化及时调整给药量,对照组注射等体积的生理盐水,在造模过程中
小鼠乳头会出现红肿、增大等 情况,且有部分乳晕出现。连续造模过程中,随机
分批次共取出造模小鼠10只,麻醉处死并通过乳腺组 织病理切片观察乳腺腺泡
和导管的增生情况以确定造模成功。造模成功后将剩余40只模型小鼠利用SPSS21.0统计软件生成随机数字随机分为5组。各组受试对象体质量、乳头的肿
大程度等基 本情况差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.5给药方法模型组和对照组小鼠按药物 同体积生理盐水灌胃,海带粉低、中、
高剂量组按成人剂量生药提取液同体积的5、10、15倍混悬液 灌胃,海带粉低剂
量组(含量15%)、中剂量组(含量25%)和高剂量组(含量35%)给药剂量分
别为:2.6g(kg-d),持续21天。
1.6指标检测方法①利用游标卡尺精确测量小 鼠胸部第2对乳头的直径与高度,
小鼠乳腺组织病理变化观察末次给药后,脱颈椎处死各组小鼠,取下第 2对完整乳
房,用10%的甲醛溶液固定并用石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察;②实验结
束后,用水合氯醛麻醉动物,并通过心脏采血收集各组小鼠血液,在低温离心机
4℃下,以4000rm in离心15min,收集上清液,再用ELISA法测定各组小鼠血清
E2、P和促乳素(Prola ctin,PRL)、VEGF的含量。
1.7统计学方法采用SPSS21.0统计软件进行数据 处理,服从正态分布的计量资料
用(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异 有统计学意义。
2结果
2.1各组小鼠乳头直径、高度结果比较见表1。与正常组比较,模 型组小鼠乳头高
度及直径增高增大(P<0.05),说明造模成功。当给予药物连续治疗30天后,与 模
型组比较,海带粉各剂量组乳头高度及直径减小(P<0.05)。与阳性药组比较,海带
粉 高剂量组乳房直径减小(P<0.05)。
表1各组小鼠乳头直径、高度结果比较(x±s)mm

2.2各组小鼠乳腺组织病理学变化
对照组小鼠乳腺腺泡、小叶少见并散在分布于 脂肪和结缔组织内,导管和腺泡腔
基本未见扩张。模型组小鼠乳腺增生病理特征明显,腺泡腔扩张数量增 多及小叶
增多,间质内脂肪及结缔组织少见,乳腺细胞大多呈不规则排列。与模型组比较,
海带 粉低、中、高剂量组小鼠乳腺增生情况均有改善,腺泡腔扩张数量减少,导
管变窄且上皮增生减轻,见下 图1-5。

图1对照组 图2模型组


图3海带粉低剂量组 图4海带粉低剂量组 图5海带粉低剂量组
2.3各组小鼠血清E2、PR L、P检测结果比较见表2。与对照组比较,模型组E2、
PRL水平升高,P水平降低(P<0.05 )。与模型组比较,海带粉各剂量组血清E2、
PRL水平降低,P水平升高(P<0.05)。
表2各组小鼠血清E2、PRL和P检测结果比较(x土s)pgmL

3讨论
HMG属于中医“乳癖”范畴,特征为经前或经期乳房胀满疼痛,甚则乳房结块[3]。其致病机理尚不明确,尚无特效治疗方法及药物。有研究[4]认为HMG的发
病原因可能 与卵巢功能失调,雌、孕激素水平比例失调有关,E2及PRL、VEGF水
平增高,P水平降低,长期 剌激乳腺组织使乳腺导管和小叶增生过度而复旧不全
是本病的主要病因,故临床治疗药物的选择靶点主要 针对激素水平的调节。临床
应用显示局部手术切除也可达到治疗HMG的目的,但患者不易接受,且复发 率
高[5]。因此,改变血清雌、孕激素及PRL、VEGF水平,减少乳腺小叶组织对雌、
孕 激素的反应仍是目前治疗HMG的有效方法[6]。
本研究采用苯甲酸雌二醇联合 黄体酮制备HMG小鼠模型,模型组小鼠乳头
直径、乳头高度增加,E2、PRL、VEGF水平升高, P水平降低,病理切片进一步
证实造模成功。课题组人员在给药后检测发现海带粉可以有效抑制HMG小 鼠乳
头直径的增大以及乳头高度的增加,腺泡腔扩张数量减少,导管变窄且上皮增生
减轻。海带 属海藻中的褐藻,目前研究发现褐藻中主要的活性成分包括多糖类、蛋
白类、萜类、多酚类、氨基酸类, 还有多种维生素、矿物质和微量元素,这些活
性成分使之具有抗癌、降血压、降血脂、抗病毒、抗肿瘤、 抗凝血等多种生理活
性[7]。海带因其富含褐藻多糖、褐藻多酚以及碘等人体需宜营养成分, 具有抗 癌、
防癌、降三高、补钙、提高免疫力、皮肤祛皱增白等功效,还是低脂肪、低热量的
保健食品 。研究显示海带粉作用机制是由于其中含有大量的碘,可以促使卵巢滤
泡黄体化,从而降低体内雌激素的 水平,使内分泌失调得到调整,最终消除乳腺
增生[8]。另外也可能与降低E2、PR、VEGF的浓 度,升高P的含量有关,该结果
进一步提示海带粉与改善机体内环境中的激素水平有关[9]。雌激素可 刺激乳腺导
管生长,而P恰能对高雌激素状态产生抑制作用,使垂体和卵巢功能受到影响,
从而 控制病情的进一步恶化。另外依赖内分泌激素的组织器官在缺乏时可产生细
胞凋亡,这种现象同样可发生 于肿瘤组织,在雌激素依赖的组织如乳腺,激素可
能诱导细胞凋亡,这可能也是其治疗HMG的重要作用 机理[10]。
参考文献
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