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光辉岁月之再见理想人脐带血造血干细胞体外分化为NK细胞的效率及功能检测

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-07 19:03

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2021年1月7日发(作者:月经不来的原因有几种)

人脐带血造血干细胞体外分化为NK细胞的效率及功能检


罗琦1,尹洁2,李杨2,黄珊2,王玺2,何景华1△

【摘 要】摘要:目的 检测人脐带血造血干细胞(HSCs)体外分化为自然杀
伤(NK)细胞的效率及功能。方法 从人脐带血中分离CD34+HSCs,接种于
含20 μgL FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3 L)、干细胞生长因子(SCF)、白
细胞介素(IL)-7、IL-15及IL-21的SCGM培养 基中,定向诱导
CD34+HSCs分化为NK细胞。观察细胞生长状态,在分化的第7、14、21及
28天,采用流式细胞术检测各阶段CD56、NKG2D、NKp46、CD3、CD19
及 CD34等细胞免疫表型的表达变化;分化的第21、28天,以分化得到细胞
为效应细胞,K562细 胞作为靶细胞,设置8∶1、4∶1、2∶1和1∶1 4组效
靶细胞比,分别采用乳酸脱氢酶(LDH )细胞毒性检测法和7AADCFSE标记
法,检测分化得到的细胞杀伤功能。结果 脐带血来源的CD 34+HSCs在体外
适宜的条件下可大量增殖;整个分化进程的不同阶段中,CD3和CD19表达量
差异无统计学意义,CD56、NKG2D及NKp46的表达量逐渐增加,最高达
(72.5 7±1.60)%、(32.83±1.29)%和(29.53± 2.40)%,CD34的表达量
逐渐降低,最低为(12.13±2.01)%。LDH毒性检测法和7AADCFSE标记法
测得最大 杀伤效率可达(49.91±2.76)%和(40.87±1.12)%,8∶1、4∶1、
2∶1和 1∶1组NK细胞杀伤能力均依次降低(P<0.05),诱导分化28 d的
NK细胞杀伤能力与21 d差异无统计学意义。结论 人脐带血HSCs在体外适
宜的培养条件下,可定向分化为NK细胞,诱导 分化得到的NK细胞具有杀伤
功能。

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