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四川绵阳四〇四医院检验科标准操作文件
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全自动血液分析仪操作手册
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CRL1-SOP-2001
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1
目的
检测血液中血细胞
(红细胞、白细胞和血小板)
数量,
白细胞分类及相关参数
(
HGB
、HCT
、
MCV
、
MCH
、
MCHC
、
RDW
及
MPV
等)的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾
病的变化及治疗 效果具有重要参考价值。
2
适用范围
****
血液分析仪使用操作。
3
分析参数和方法学名称
Sysmex XE-5000
提供
43
项参数的结果,各检测参数和方法见 表
1
。
表
1. Sysmex XE-5000
各检测参数和方法
参数
白细胞
红细胞
血红蛋白
红细胞比积
平均红细胞体积
平均红细胞血红蛋白量
平均红细胞血红蛋白浓度
血小板
中性粒细胞百分比
淋巴细胞百分比
单核细胞百分比
嗜酸性粒细胞百分比
嗜碱性粒细胞百分比
中性粒细胞数
淋巴细胞数
单核细胞数
首字母缩写
检测方法
WBC
RBC
HGB
HCT
MCV
MCH
MCHC
PLT
NEUT%
LYMPH%
MONO%
EO%
BASO%
NEUT#
LYMPH#
MONO#
流式细胞计数
鞘流
DC
检测方法
SLS
血红蛋白检测法
RBC
累积脉冲高度检测法
由
RBC
和
HCT
算出
由
RBC
和
HGB
算出
由
HCT
和
HGB
算出
鞘流
DC
检测方法
流式细胞计数
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嗜酸性粒细胞数
嗜碱性粒细胞数
红细胞分布宽度-标准差
红细胞分布宽度-变异系数
血小板分布宽度
平均血小板体积
大血小板比率
血小板压积
网织红细胞百分比
网织红细胞数
幼稚网织红细胞比率
低荧光强度网织红细胞比率
中荧光强度网织红细胞比率
高荧光强度网织红细胞比率
网织血小板比率
网织红细胞血红蛋白含量
有核红细胞百分比
有核红细胞数
未成熟粒细胞百分比
未成熟粒细胞数
造血祖细胞数
白细胞数-体液
红细胞数-体液
单个核细胞比例-体液
单个核细胞数-体液
多个核细胞比例-体液
EO#
BASO#
RDW-SD
RDW-CV
PDW
MPV
P-LCR
PCT
RET%
RET#
IRF
LFR
MFR
HFR
IPF
RET
-
He
NRBC%
NRBC#
IG%
IG#
HPC
#
WBC
-
BF
RBC
-
BF
MN
%
MN
#
PMN
%
流式细胞计数
直流+射频
根据红细胞直方图算出
根据红细胞直方图算出
根据血小板直方图算出
根据血小板直方图和
PLT
算出
根据血小板直方图算出
根据血小板直方图算出
流式细胞计数
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单个核细胞数-体液
4
检验原理
RF/DC
检测方法
PMN
#
通过直流电阻的变化测定血细胞的大小,并通过射频电阻测定血细 胞内的密度。一个
血液样品经过吸液、定量、稀释为指定比,然后输送给相应的检测室。检测室内有一个 称
为
“
小孔
”
的圆孔,两侧均为电极。两个电极之间施以直流电和射 频电流。稀释后样品中悬
浮的血液细胞通过该孔,使两个电极之间的直流电阻和射频电阻发生变化。通过 直流电阻
的改变测定血细胞的体积大小,而射频电阻的变化检测血细胞内的密度(细胞核大小与其
它信息)
,
这种检测是以电脉冲的形式进行的。
根据这些脉冲大小的不同,
可得到血细胞大
小和内部密度的二维分布(散点图)
。通过对这些分布的检测,可得到各种测量 数据。
鞘流
DC
检测方法(< br>RBC
、
PLT
、
HCT
)
在该检测器内,样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷 嘴
推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。
通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防
止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性
和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,
所以也可防止产生异常血细胞脉冲。
使用半导体激光器的流式细胞计数方法
使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子 的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只
需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。
< br>一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。然后将该样品送
入流动池中。
这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该
流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。
一个半导体激光束通过该 流动池照射到血细胞上。
前向散射光由光电二极管接收,
侧
向散射光和侧向荧光则由光 电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血
液细胞的信息。
前向散射光(
FSC
)和侧向散射光(
SSC
)
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当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。
XE-5000
检测前向散射光和侧向
散射光,前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧 向散射光的强度反映细胞内部(如
细胞核的体积大小)的信息。
侧向荧光(
SFL
)
当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色
集团浓度的增加,
荧光强度也增加。
通过测量荧光强度,
可以得到有关血细胞染色的信 息,
XE-5000
检测侧向荧光。
SLS-
血红蛋白测定法
在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的血红蛋白 被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠
的作用下,二价铁转变成三价铁,并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb
,
SLS- Hb
进入血红
蛋白检测系统。测定
SLS-Hb
在
555nm
波长下的吸光度值,并通过与加入样品前稀释液的
吸光度进行对比进行计算。
计算(红细胞指数)
红细胞指数(
MCV
、
MCH
和
MCHC
)通过
RBC
计数(
RBC
)
、Hb
浓度(
HGB
)和红细
胞压积(
HCT
)的值计算 出。计算公式如下:
MCV
(
fl
)=
HCT×
10
15
RBC/L
HGB(g/L)×
10
12
RBC/L
HGB(g/L)
HCT
MCH (pg)
=
MCHC(g/L)
=
5.
仪器异常信息提示
XE-5000
异常报警信息:
40
项
WBC
异常:
WBC
Abn Scattergram
Neutropenia
Abn
NRBC
散射图
异常
嗜
中性粒
细胞
WB C
散
射
图
异
NRBC
常
Scattergram
嗜中性粒细胞减
Neutrophilia
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少
Lymphopenia
Monocytosis
Basophilia
Leukocytosis
WBC
怀疑:
Blasts?
Left Shift?
Abn
Lympho/L-Blasts?
RBC Lyse resistance
RBC
异常:
RBC
Abn Distribution
RET
Abn Scattergram
Anisocytosis
Macrocytosis
Anemia
RBC
怀疑:
RBC Agglutination
Iron Deficiency?
Fragments?
PLT
异常
淋巴细胞减少
单核细胞增加
嗜碱性粒细胞增加
增加
Lymphocytosis
Eosinophilia
Leukocytopenia
淋巴细胞增加
嗜
酸性粒
细胞
增加
白细胞减少
有
核红细
胞增
加
未成熟粒细胞
异形淋巴细胞
有核红细胞
双峰红细胞
白细胞增加
原始细胞
左移
异常淋巴
/
原始淋
巴
红细胞溶解不全
NRBC present
Immature Gran?
Atypical Lympho?
NRBC
红细胞粒子分布
Dimorphic
异常
RET
散
射
图
异
常
红细胞大小不均
大红细胞症
贫血
红细胞凝聚
缺铁性贫血
碎片
Population
Reticulocytosis
Microcytosis
Hypochromia
Erythrocytosis
Turbidity/HGB
Interference?
HGB Defect?
RET
增加
小红细胞症
低血红蛋白症
红细胞增多症
乳
糜
/HGB
影
响
HGB
异常
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PLT
Abn Scattergram
Thrombocytopenia
PLT
怀疑
PLT Clumps?
6.
样品要求
血小板减少
血小板散射图异
常
血小板凝集
PLT
Distribution
Trombocytosis
PLT Clumps(S)
Abn
血
小板直
方图
异常
血小板增加
血小板凝集
用真空采血管(紫色盖头)采集
EDTA-K
2
抗凝的静脉血。采 血后立即与抗凝剂混匀,
在试管外壁贴上单据号等病人信息或检验联号后,放置室温立即送检。
穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员,以避免血液中传染性病原 如肝炎病毒、人类免疫缺
陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。
标本在 室温下最多保留
4
小时。
不能在
4
小时内检测的标本,
放置 于冷藏冰箱
(
2
℃
~8
℃)
中保存,
8
小 时内有效,使用前从冰箱中取出回复室温后检测。
7
试剂
7.1
稀释液(
CELLPACK
)
7.1.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
PK-30L
包装规格:
20L
试剂成份:
氯化钠
硼酸
6.38g/L
1.00g/L
0.20g/L
0.20g/L
四硼酸纳
EDTA-K
2
7.1.3
储存条件:须 存储于干净的环境中,防止阳光直射,适宜温度为
15~30
℃。
7.1.4
使用期限:在失效期前使用;开封后的使用期限为
60
天。
7.1.5
安全事项:
在使用前确认是否有污染或 颜色变化,
一经发现,
请速更换。
如出现
冻结现象,将其解冻,混匀后使用。
7.1.6
注意事项:注意防尘。
7.2
鞘液(
CELLSHEATH
)
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7.2.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
SE-90L
包装规格:
20L
试剂成份:
氯化钠
7.1g/L
氨丁三醇缓冲液
2.0g/L
乙二胺四乙酸二钾
0.20g/L
表面活性剂
0.8g/L
7.2.2
储存条件:须存储于干净的环境中,防止阳光直射,适宜温度为
5~30
℃。
7.2.3
使用期限:在失效期前使用;开封后的使用期限为
60
天。
7.2.4
安全事项:避免和眼睛、皮肤接触,一旦接触, 用大量清水冲洗,并适当考虑必
要的医疗措施。
7.2.5
注意事项:
若试剂有污染或颜色的变化,
更换试剂。
如 出现冻结现象,
将其解冻、
混匀后使用。
7.3
嗜碱细胞溶血素(
STROMATOLYSER- FB
)
7.3.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
FBA-200A
包装规格:
5L
7.3.2
试剂成份:非离子表面活性剂
0.4%
7.3.3
储存条件:须存储于干净的环境中,适宜温度为
5~30
℃。
7.3.4
使用期限:
在失效期前使用;
开封后的使用期限为
60
天。
3.5
安全事项:
避免和
眼睛、皮肤接触,一旦接触,用大量清水冲洗,并适当考虑必要的医疗措施。
7.3.5
注意事项:
在试剂使用前须确认是否有 污染或颜色的变化,
一经发现,
须速更换。
若试剂出现冻结现象,用前将其解冻充分混 匀后使用。
7.4
白细胞分类溶血素(
STROMATOLYSER-4DL
)
7.4.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
FFD-200A
包装规格:
5L
7.4.2
试剂成份:
非离子表面活性剂
0.18%
有机季铵盐
0.08%
7.4.3
储存条件:须存储于干净的环境中,适宜温度为
5~30
℃。
7.4.4
使用期限:在失效期前使用;开封后的使用期限为
60
天。
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7.4.5
安全事项:避免和眼睛、 皮肤接触,一旦接触,用大量清水冲洗,并适当考虑
必要的医疗措施。
7.4.6
注意事项:在试剂使用前须确认是否有污染或颜 色的变化,一经发现,须速更
换。若试剂出现冻结现象,用前将其解冻充分混匀后使用。
7.5
白细胞分类染液(
STROMATOLYSER-4DS
)
7 .5.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
FFS-800A
包装规格:
42ml×
3
袋
7.5.2
试剂成份:
聚次甲基染料
0.002%
甲醇
3.0%
1
,
2-
亚乙基二醇
96.9%
7.5.3
储存条件:须存储于干净的环境中,避光,适宜温度为
2~35
℃。
7.5.4
使用期限:在失效期前使用;开封后的使用期限为
60
天。
7.5.5
安全事项:避免和眼睛、皮肤接触,一旦接触, 用大量清水冲洗,并适当考虑必
要的医疗措施。
7.5.6
注意事项:若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象,须更换。但避< br>免冻结。
7.6
有核红细胞染色液(
STROMATOLYSER
-
NR
)
7.6.1
试剂品牌:
Sysmex
代码:
SNR-800
包装规格:
12ml×
3
袋
试剂成份:
聚次甲基染料
0.01%
1
,
2-
亚乙基二醇
99.9%
7.6.2
储存条件:须存储于干净的环境中,避光,适宜温度为
2~35
℃。
7.6.3
使用期限:在失效期前使用;开封后的使用期限为
60
天。
7.6.4
安全事项:避免和眼睛、皮肤接触,一旦接触, 用大量清水冲洗,并适当考虑必
要的医疗措施。
7.6.5
注意事项:若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象,须更换。但避< br>免冻结。
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