乳房炎

2021年3月3日发(作者：手心发热是怎么回事)
乳房炎的实验室诊断

一、

实验目的

掌握诊断 牛隐性乳房炎的一些常用实验室检验方法，比较各种方法的准确性和各自的优缺
点。为临床上正确诊断和 治疗乳房炎打下基础。

二、

实习器材

（
1
）健康牛及乳房炎患牛的新鲜奶样各若干份

（
2）离心机、
10ml
刻度离心管、直读式电导率仪、中型滤纸、
10ml
试管、载玻片、
5ml
吸管、乳房炎检验盘和各种试剂。

三、

实验内容

（一）乳中细胞检验法


（加利福尼亚乳房炎检测）法






此法简易，效果准确，可以定量。基本原理是
一种阴离子表面活性物质
------- -
烷基或烃基硫酸盐破坏乳中的体细胞，释放其中的蛋白质，
蛋白质与试剂结合沉淀或凝集。细 胞中聚合的
DNA
是
CMT
产生阳性反应的主要成分。乳
中体细胞数 越多，释放的
DNA
越多，产生的凝胶也就越多，凝集越紧密。

（
1
）
试剂配方。
烷基硫酸钠
（或烷基烯丙基硫酸钠，
烷基硫酸钾及烷 基烯丙基硫酸钾）
30~50g
、
苛性钠
15g
、溴甲酚紫
0.1g
、蒸馏水
1000ml
。

（
2
）方法。 先将
2ml
被检乳至于塑料乳房炎检验盘中，再加入试剂
2ml
，缓慢做同心 圆状
搅拌
10s
，观察判定。判定标准见表
26-1.
被检乳

乳汁反应

判定符号

细胞总数
（万个
/ml
）

嗜
中
性
白
细
胞
的比例（
%
）

阴性

可疑

弱阳性

阳性

强阳性

酸
性
（
pH5.2
以
下）

碱
性
（
pH7.0
以
上）

无变化，不出现凝块

微量沉淀，不久即有消失的倾向

部分形成凝胶状





-
±

+
0~2
15~50
40~150
80~500
500
以上


0~25
30~40
40~60
60~70
70~80

全部呈凝胶状，回转摇动时凝块向中央集中，

++
停止摇动时凝块呈凹凸状于皿底

全部呈凝胶状，回转摇动时凝块向中央集中，
+++
停止摇动时仍保持原状，并固着于皿底

乳汁变黄色，意味着细菌增多，乳糖被分解


乳汁呈深紫色，
为接近于奶期，
感染乳房炎和
泌乳量降低的现象




2.
白细胞分类计数的刻度法检验法

取被 检乳
10~15ml
装入刻度离心管，以
2000r/min
离心，待其沉淀 达到刻度
1
以上，仔细吸
除上清液及管壁上的脂肪，
将剩余的液体与沉淀混合 ，
然后按制作血液涂片的方法制作抹片，
待自然干燥后，置二甲苯中脱脂
2min，水洗，用姬母萨或其他血液染色液染色，镜检。按
表
26-2
的标准进行判定。



白细胞分类计数结果（嗜中性分叶淋巴细
胞占白细胞总数）

12%
以上

12%~20%
20%
以上

判定

健康

可疑

乳房炎

3.H
2
O
2
玻片法



此法 为间接测定乳中白细胞的方法，即测定乳中白细胞的过氧化氢酶，以
推断白细胞的含量。

（
1
）试剂。取双氧水（
30%

H
2
O
2
，按
1
；
2.33~4
的比例加入中性蒸馏水，配成6%~9%
的
H2O2
试剂，待用

（
2
）方 法。将载玻片置于白色衬垫物上，滴被检乳
1
滴，再加过氧化氢试剂
1
滴，混 合均
匀，静置
2min
后观察。判定标准见
26-3
被检乳

正常乳

可疑乳

感染乳

反

应

液面中心无气泡，或有小如针尖的气泡聚集

液面中心有少量大如粟粒的气泡聚集

液面中心布满或有大量粟粒大的气泡聚集

判定符号

－

±

＋

4.
苛性钠凝乳检验法

（
1
）方法


将载玻片置于黑色衬垫物上，先加被检乳< br>5
滴，再加
4%
苛性钠溶液
2
滴。用细玻璃棒
或火柴 杆迅速将其扩展成直径
2.5cm
的圆形，并继续搅
20~25s
，观察。如 乳样事先经冷藏
保存，则只加试剂
1
滴。

（
2
）判定标准

被检乳

阳性

可疑

乳


汁


反


应

无变化，无凝乳现象

出现细小凝乳块

判定符号

推算细胞总数

－

±

＋

＋＋

＋＋＋

50
以下

50
～
100
100
～
200
200
以上

500
～
600
弱阳性

有较大乳块，乳汁略微透明

阳性

乳凝块大，搅拌混合时有丝状凝结物形成，全乳略呈
水样透明

强阳性

大凝块，有时全部形成凝块，完全透明


试验

（
1
）试剂。烷基丙烯基硫酸钠
2g
，溴麝香草酚蓝
0.02g
。加中性蒸馏水至
100ml
。
（
2
）方法。取被检乳
1~2ml
至于塑料检验盘中，加入等量试剂，前 后左右缓慢倾斜摇晃检
验盘
5s
左右，使乳汁的凝集现象完全消失，在持续摇晃月1min
，最后检验盘倾斜观察，并
按表
26-5
标准判断结果

乳汁凝集成度

不凝集，乳汁沿检验盘倾斜下流

略微凝集，但乳汁仍沿检验盘下流

明显凝集，凝集片停留黏附在检验盘上

有大量凝集片，比较粘稠

相当于含白细胞数

约
8.8
万个
/ml
约
35.0
万个
/ml
约
92.1
万个
/ml
约
207.3
万个
/ml
判定

-
±

+
++