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化妆品中霉菌和酵母菌的检验
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化妆品中霉菌和酵母菌的检验
科学
2006-3-5 23:47
化妆品中霉菌和酵母菌的检验
1
概述
1.1
化妆品真菌污染的现状
真菌在自然界中分布甚广
,
化妆品的酸碱度
,
温度湿度和营养适合其生长繁殖。
目前国内外有
资料表明 ，化妆品中真菌污染是相当严重的。
Wilson
对眉目化妆
品进行微生物 检查，结果
真菌污染率为
12%
，从睫毛油里检出茄病镰刀菌，密封的眼用化妆品染菌 率为
1.5%,
在使用
过程中急剧增至
60%
。所染真菌中曲
霉，念珠菌居首。我国部分省市化妆品中霉菌染菌率
也不低，一般为
7
～
62.7%
。有资料报道在
100
份化妆品中分离到真菌
15
个（属
14
种）。
优势菌为酵
母属，其次为青霉属和曲子霉属等 。
Kuehne
等人对
233
名妇女眉笔眼影霉菌检
查，结果有115
人（份）检出不同真菌
19
属（种），计有草酸青霉、黄曲
霉、交链孢霉和
致病的白色念珠菌和新型隐球菌等。
1.2
化妆品的真菌病
1.2.1
念珠菌病：由白色念珠菌（白色假丝酵母）引 起的急性、亚急性或慢性真菌病，可侵
犯皮肤、粘膜或指甲，也可侵犯内脏或血行播散引起鹅口疮、唇炎 、甲沟炎、泛发性皮肤念
珠病、念珠性肉芽肿、支气管及肺念珠病、心内膜炎及脑炎和血行播散性念珠菌 病等。
1.2.2
青霉病：
由少数青霉菌引起呼吸道及肺部感 染，
使皮肤暴露部位出现湿疹样改变，
还
可致敏引起鼻炎及哮喘。
1.2.3
新型隐球菌病
:
由新型隐球酵母及其变种引起的一种深部真菌病
,
可侵犯肺、
骨骼、
皮
肤淋巴结及内胖器官，主要侵犯中枢神经系统 ，引起隐球菌性脑膜炎。
1.2.4
曲霉病
:
由曲霉 菌引起
,
可侵犯皮肤
,
指甲、外耳道、鼻窦、眼、气管、肺、心膜、子
官、脑膜等器官形成炎性肉芽肿。
1.2.5
眼真菌病
:< br>真菌性角膜炎可由曲霉菌、镰刀菌、白色念珠菌等真菌引起角膜溃疡，见
表
3-2-1< br>。
作者
年份
倒数
菌种及株数
Fazakas
1955
20
烟曲霉
5
，黄曲霉
2
，放线菌
4
，毛霉
2
，其他
7
Gingerich
1963
125
曲霉
16
，白色念珠菌
17
，镰刀菌
12
，其他
8 0
Palack
1971
33
镰刀菌
15
，头孢霉
11
，念珠菌
2
，弯孢霉
21
，曲霉
2
，其他
2
渡道郁绪
1977
59
曲霉
21
，头孢霉
16
，白色念珠菌
14
，其他
8
齐绪哲、谭玉章
1957
～
1965
13
白色念珠菌
7
，曲霉
3
，镰刀菌
1
，酵母菌
1
，头孢霉
1
范德章
1978
204
曲霉
123
，镰刀菌
43
，其他
39
1.2.6
真菌毒素中毒：引起皮肤光过敏性皮炎、湿疹及皮肤变态，严重者导致机体中毒。
1.3
化妆品霉菌检验的意义
1.3.1
霉菌广泛存在于自然 界中，
化妆品从原料到成品生产过程各环节都可能存在霉菌污染
源。
1.3.2
化妆品是霉菌生长繁殖的良好培养基。
霉菌适宜在中性和微酸性的条件下 生长，
而一
般化妆品的
pH
在
4
～
7
之间 。霉菌、酵母菌生长最适温度为
20
～
30
℃，而
化妆品 储藏条件
是在此温度范围内。
化妆品中皆具备霉菌生长需要的营养，有的还含有人参、蜂蜜、蛇 油等
营养丰富的物品。
1.3.3
霉菌可产生毒素，
故化妆品除进行霉菌计数及分类鉴定外，
必要时还应开展霉菌毒素
测定。
1.4
几个概念
1.4.1
真菌及其在生物学上的地位
真菌是具有细胞壁、
无根茎叶、不含叶绿素，
以吸收方式吸取营养，具真核细胞的一类微生
物。根据目前国际上广泛应用的
Ainsworth
分类系统及陈世骧等（
1979
）提出三个总界，下设五个界的分类系统，真菌在生物学上的地位如下：
1.4.2
霉菌
霉菌是指真菌中不形成子实体的丝状菌类。< br>霉菌不是分类学上的名词，
是一种俗称。
霉菌常
寄生于粮食、食品、化妆品等物 品上，使其发霉变质。有的霉菌产毒，危害人体健康；有的
霉菌应用于工业，造福人类。
1.4.3
霉菌的形态
一般霉菌鉴定主要靠形态分 类。
不同培养条件下生长的同一种霉菌形态也有差异，
因此各种
霉菌均有其标准培养基 ，
如青霉和曲霉用察氏培养基、
镰刀菌用马铃薯培养基、
酵母菌用麦
芽汁等。
霉菌的形态主要分菌丝和孢子。
在显微镜下观察霉 菌的菌丝呈管状，直径
2
～
10
μ
m
。有的霉菌（如根霉和 毛霉）菌丝无隔
膜，为多核细胞。大多数霉菌如青霉和曲霉菌丝有隔膜。有些霉菌的菌
丝密集成团、坚硕
称菌核。
有些霉菌的菌丝特化成厚的壁呈球形的壳细胞。
菌丝又有 一定程度的分化。
长在培
养基内的称营养菌丝；
在培养基上生出的称气生菌丝；
产生孢子的气生菌丝又称繁殖菌丝，
菌丝能产生不同色素，呈不同颜色。这些都是分类鉴定 的依据。
霉菌的孢子是繁殖器管，
孢子分为无性生殖孢子和有性生殖孢子 。
无性生殖孢子有叶状孢子、
芽生孢子（酵母菌、念珠菌）；厚膜孢子（镰刀菌）；节孢子（白 地霉）。分生孢子和孢子
囊孢子均为无性生殖孢子器官。
这些不同形态和不同着生状态的生殖器 官是霉菌分类鉴定的
重要依据。
霉菌的有性生殖是经两个细胞交配后产生 的有性了解子。如卵孢子（水霉）、接合孢子（毛
霉和根霉）、子囊孢子（醇母）。
2
霉菌及酵母菌总数的测定方法
2.1
霉菌数测定
霉菌数的测定是指化妆品检样在一定条件下培养后，
lg
或
lml
化妆品中所污染的活霉菌数
量。藉此测定，判明化妆品被霉菌污染的程度及其一般卫生状况。< br>
2.1.1
培养基和试剂
2.1.1.1
稀释液
成分：氯化钠
8.5g
吐温
-80 7g
蒸馏水
1000ml
卵磷脂
1g
制法：先将卵磷脂用少量蒸馏水溶解，然后与氯化钠，吐温
80
加到蒸馏水中，混匀、溶解、
分装、高压灭菌
121
℃
20min
。
2.1.1.2
虎红（孟加拉红）培养基（
1
）
成分：蛋白胨
5g
葡萄糖
10g
磷酸二氢钾
1g
硫酸镁（含
7H20
）
0.5g
琼脂
20g
1
／
30000
虎红水溶液
100ml
蒸馏水
1000ml
制法：将上述各成分（除虎红外）加入 蒸馏水中溶解后，再加入虎红溶液，分装后，高压灭
菌
121
℃
20min< br>。
2.1.2
操作步骤（
2
）
似无菌操作称取检样
10g
（或
10m1
）加到
90ml
稀释液中，充分振荡，使之溶解并混匀，即
为
1:10
稀释液。
用灭菌吸管吸取
1m1
1:10
稀释液，
沿管壁 注入装有
9ml
灭菌稀释液的试管中，
另取
1
支
lml灭菌吸管反复吸吹，使之混匀，即为
1:10
稀释液，同法再作
1:1000稀释液。
取
1:10
，
1:100
，1:1000
的稀释液各
1ml
分别注入灭菌平皿内，每个稀释度各用
2
～
3
个平
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