-
选修
3
——基因工程高考题
选修
3
——基因工程高考题
1
.
(
20 17
?新课标Ⅰ卷
.38
)
(
15
分)
真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除
内含子对应 的
RNA
序列的机制。
已知在人体中基因
A
(有内含子)
可 以表达出某种特定蛋白
(简
称蛋白
A
)
。回答下列问题:
(
1
)某同学从人的基因组文库中获得了基因
A
,以大肠杆菌作为受 体细胞却未得到蛋白
A
,其
原因是
___________________ __________________________
。
(
2
)
若用家蚕作为表达基因
A
的受体,
在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,
不选用
______________
作为载体,其原因是
___________ __________________________________________________ __
。
(
3
)若要高效地获得蛋白
A
,可选用大 肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有
________________________ _____________________________
(答出两点即可)等优点。
(
4
)若要检测基因
A
是否翻译出蛋白
A
,可用的 检测物质是
___________________
(填“蛋白
A
的基因” 或“蛋白
A
的抗体”
)
。
(
5
)
艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明
DNA
是遗传物质做出了重要贡献,
也可以 说是基
因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是
__________________________________________________ _____________________________
。
2
.< br>(
2017
?新课标Ⅱ卷
.38
)
(
15
分 )
几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质 酶
基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:
(
1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的
mRNA
,常选用嫩叶而不选用 老
叶作为实验材料,原因是
______________________________ __
。提取
RNA
时,提取液中需添加
RNA
酶抑制剂,其目的是< br>______________________________________
。
(
2
)以
mRNA
为材料可以获得
cDNA
,其原 理是
________________________________
。
(
3
)
若要使目的基因在受体细胞中表达,
需要通过质粒载体而不能直接 将目的基因导入受体细
胞,原因是
___________________________ _____________________________
(答出两点即可)
。
(
4
)
当
几
丁
质
酶
基
因
和
质
粒
载
体
连
接
时
,
D NA
连
接
酶
催
化
形
成
的
化
学
键
是
__________________________
。
(
5
)
若获得的转基因植株
(几丁质酶基因已经整合到植物的基 因组中)
抗真菌病的能力没有提
高,根据中心法则分析,其可能的原因是
______ ______________________________________
。
3.
(
2017
?新课标Ⅲ卷
.38
)
(
15
分)编码蛋白甲的
DNA
序列(序列甲)由
A
、
B
、
C
、
D
、
E
五个
片段组成,编码蛋白乙和丙的序 列由序列甲的部分片段组成,如图
1
所示。
回答下列问题:
(
1
)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,
若在启动子的下游直接接上编码蛋白 乙的
DNA
序列
(
TTCGCTTCT
??
CAGGAAG GA
)
,
则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,
原因是
___________________________________________ __________________
。
(
2
)
某同学 在用
PCR
技术获取
DNA
片段
B
或
D
的 过程中,
在
PCR
反应体系中加入了
DNA
聚合酶、
引物等 ,还加入了序列甲作为
________________
,加入了
________ ________
作为合成
DNA
的原
料。
(
3
)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激
T
淋巴
细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含
T
淋巴细胞的培养液平均分 成四组,其
中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测
T
淋巴细胞浓度,
结果如图
2
。
①由图
2
可知 ,当细胞浓度达到
a
时,添加蛋白乙的培养液中
T
淋巴细胞浓度不再增加,此 时
若要使
T
淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是
_____________ ___________
。细胞培养过程中,
培养箱中通常要维持一定的
CO2
浓度,
CO2
的作用是
________________________
。
②仅根据图、图
2
可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少
______________
(填“
A
”
“
B
”
“
C
”
“
D
”或“
E
”
)片段所编码的肽 段,则会降低其刺激
T
淋巴细胞增殖的效果。
4
.
(2017
·天津理综卷
9
)
(
20
分)玉米自交系(遗 传稳定的育种材料)
B
具有高产、抗病等优
良性质,但难以直接培育成转基因植株,为 使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤
I
、
II
试
验。
Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系
A
,技术路线如下图。
(
1
)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用
2
种限制酶,选择的 原则是
______
(单选)
。
①
Ti
质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②
G
基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
第
1
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1
页
选修
3
——基因工程高考题
③酶切后,
G
基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,
Ti
质粒形成的两个黏性末端序列相同
A
.①③
B
.①④
C
.②③
D
.②④
(
2
)
下表是
4
种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。
据表可知,
细胞脱分 化时使用的激
素是
_____________________
,自交系
_ ____________________
的幼胚最适合培养成愈伤组织作
为转化受体。
应的折线图。
(
8
)下表是鉴定含< br>G
基因植株的
4
种方法。请预测同一后代群体中,
4
种方法检 出的含
G
基因
植株的比例,从小到大依次是
________
。
方法
检测对象
检测目标
检出的含
G
基因植株的比例
PCR
扩增
基因组
DNA G
基因
x1
分子杂交
总
mRNA G
基因转录产物
x2
抗原
-
抗体杂交
总蛋白质
G
基因编码的蛋白质
x3
喷洒除草剂
幼苗
抗除草剂幼苗
x4
对
Hn
继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系
5
.
(
2017
·江苏单科
33
)
(8
分)金属硫蛋白(
MT
)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小
组 计划通过多聚酶链式反应(
PCR
)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的
净化处理。
PCR
扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(
3
)农杆菌转化愈伤组织时,
T-DNA
携带插入其内的片段转移到受 体细胞。筛选转化的愈伤组
织,需使用含
________________________ ___
的选择培养基。
(
4
)
转化过程中,
愈伤 组织表面常残留农杆菌,
导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生
长。含有内含子的报告基 因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质
K
呈现蓝色。
用
K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是
_______________
(多选)
。
A
.无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B
.无农杆菌附着的转化愈伤组织
C
.农杆菌附着的未转化愈伤组织
D
.农杆菌附着的转化愈伤组织
(
5
)组织培养获得的转 基因植株(核
DNA
中仅插入一个
G
基因)进行自交,在子代含
G< br>基因的
植株中,纯合子占
_____________
。继续筛选,最终选育出 抗除草剂纯合自交系
A
。
II
.通过回交使自交系
B
获得抗除草剂性状
(
6
)抗除草剂自交系
A
(
GG
)与自交系
B
杂交产 生
F1
,然后进行多轮回交(下图)
。自交系
B
作为亲本多次回交的 目的是使后代
________________________________
。
(
7
)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程
F1
、
H1
、
H2
、
H3
各代中含
G
基因植 株的比例,
并在图
1
中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交, 请在图
2
中画出相
(
1
)
从高表达
MT
蛋白的生物组织中提取
mRNA
,
通过
_____________ _
获得
______________
用于
PCR
扩增。
(
2
)设计一对与
MT
基因两端序列互补配对的引物(引物
1
和引物
2
)
,为方便构建重组质粒,
在引物中需要增加适当的____________________
位点。设计引物时需要避免引物之间形成
__ _____________________
,而造成引物自连。
(
3< br>)图中步骤
1
代表
_____________
,步骤
2代表退火,步骤
3
代表延伸,这三个步骤组成一
第
2
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页
选修
3
——基因工程高考题
轮循环。
(
4
)
PCR
扩增时,
退火温度的设定是成败的关键。
退火温度过高 会破坏
_____________________
的碱基配对。退火温度的设定与引物长度 、碱基组成有关,长度相同但
__________________
的
引物需要设定 更高的退火温度。
(
5
)如果
PCR
反应得不到任何扩增 产物,则可以采取的改进措施有
___________
(填序号:①
升高退火温度< br>
②降低退火温度
③重新设计引物)
。
6.(
2016
·江苏理综卷
33
)
(
9
分)下表 是几种限制酶识别序列及其切割位点,图
1
、图
2
中标
注了相关限制 酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(
1
)
上述嫁接体能够成活,
是因为嫁接部位的细胞在恢复分裂、
形成
_____ __________
组织后,
经
_______________
形成上下 连通的输导组织。
(
2
)
研究者对
X
和
M
植株的相关基因进行了分析,
结果见图
2.
由图可知,
M
植株的
P
基因发生
了类似于染色体结构变异中的
_____________ __
变异,部分
P
基因片段与
L
基因发生融合,
形成
P
-
L
基因(
P
-
L
)
。以
P -L
为模板可转录出
_______________
,在
________ _______
上
翻译出蛋白质,
M
植株鼠耳叶形的出现可能与此有关。
(
3
)嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶。为探明原因,研究者进行 了相关检测,结
果见下表。
实验材料
检测对象
(
1
)
用图中质粒和目的基因构建重组质粒,
应选用
____________
两种限制酶切割,
酶切后的载
体和目的基因 片段,通过
__________
酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,学
.< br>科
.
网需
将其转入处于
__________________
态的大肠杆菌。
(
2
)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选 平板培养基中添加
________________
平板上长出的菌落,常用
PCR
鉴定,所用的引物组成为图
2
中
_____________
。
(
3
)若
BamH I
酶切的
DNA
末端与
Bcl
I
酶切的
DNA< br>末端连接,连接部位的
6
个碱基对序列为
_________________ __________
,对于该部位,这两种酶
_________
(填“都能”、
“都不能”或
“只有一种能”
)切开。
(
4
)若用
Sau3A I
切图
1
质粒最多可能获 得
_________
种大小不同的
DNA
片段。
7.< br>(
2016
·北京理综卷
31
)
(
16
分) 嫁接是我国古代劳动人民早已使用的一项农业生产技术,
目前也用于植物体内物质转运的基础研究。研究 者将具有正常叶形的番茄(
X
)作为接穗,嫁接
到叶形呈鼠耳形的番茄(
M< br>)砧木上,结果见图
1.
P
-
L mRNA
P
-
L DNA
M
植株的叶
有
有
X
植株的叶
无
无
接穗新生叶
有
无
①检测
P
-
L mRNA
需要先提取总
RNA
,再 以
mRNA
为模板
_______________
出
cDNA,然后用
PCR
技术扩增的片段。
②检测
P
-
L DNA
需要提取基因组
DNA
,然 后用
PCR
技术对图
2
中
_____________
(选 填序
号)位点之间的片段扩增。
a.
Ⅰ
~
Ⅱ
b.
Ⅱ
~
Ⅲ
c.
Ⅱ
~
Ⅳ
d.
Ⅲ
~
Ⅳ
(
4
)
综
合上
述
实
验
,
可
以
推
测
嫁接
体
中
P
-
L
基
因
的
mRN A_________________________________________________ ___________________________
。
8.
(2016
·海南理综卷
31
)
(
15
分)基因工程又称 为
DNA
重组技术,回答相关问题:
(
1
)在基因工程中 ,获取目的基因主要有两大途径,即
________________________
和从
_______________________________
中分离。
(
2
)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建
cDNA
文库和基因组文 库,两个文库相比,
cDNA
文
库
中
含
有
的
基
因
数
目
比
基
因
组
文
库
中
的
少
,
其
原
因
是
_________ __________________________________________________ _____________
。
(
3
)
在基因表达载体中 ,
启动子是
______
聚合酶识别并结合的部位。
若采用原核生物作为基因
表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是
__________________
。
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选修
3
——基因工程高考题
(
4
)
将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,
常用的携带目的基因的金属颗 粒有
___________
和
____________
颗粒。
9.
(
2016
·上海)
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题 。
(
9
分)
在图
27
所示的质粒
PZH Z11
(总长为
3.6kb
,
1kb=1000
对碱基因)中,lacZ
基因编码
β
-
半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大 肠杆菌染成蓝色。
为模板,采用
PCR
技术扩增
HSA
基 因。下图中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方
向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的 位置及扩增方向。
(
1
)若先用限制酶
Ba m
HI
切开
pZHZ11
,然后灭活
Bam
HI
酶 ,再加
DNA
连接酶进行连接,最后
将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含< br>3.1kb
质粒的细胞颜色为
;
含
3.1kb
质粒的细胞颜色为
。
(
2
)若将两端分别用限制酶
Bam
HI和
Bgl
HI
切开的单个目的基因片段置换
pZHZ11
中0.5kb
的
Bam
HI
酶切片段,形成
4.9kb
的 重组质粒,则目的基因长度为
kb
。
(
3
)
上述
4.9kb
的重组质粒有两种形式,
若用
Bam< br>HI
和
Eco
RI
联合酶切其中一种,
只能获得
1.
7kb
和
3.2kb
两种
DNA
片段;那么联合酶切同等长 度的另一种重组质粒,则可获得
kb
和
kb
两种
DNA
片段。
(
4
)
若将人的 染色体
DNA
片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,
然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产生的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发
挥,那么上 述过程属于
。
A.
人类基因工程
B.
动物基因工程
C.
植物基因工程
D.
微生物基因工程
10.
(
2016
·天津理综卷7
)
(12
分
)
人血清白蛋白
(HSA)
具 有重要的医用价值,只能从血浆中制
备。下图是以基因工程技术获取重组
HSA
(rHSA
)的两条途径。
(
2
)启动子通常具有物种及组织特 异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达
rHSA
的载体,需要
选择的启动子是
_____________
(填写字母,单选)
。
A.
人血细胞启动子
B.
水稻胚乳细胞启动子
C.
大肠杆菌启动子
D.
农杆菌启动子
(
3
)
利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,
需添加酚类物质,
其目的是
____________________
________________________
。
(
4)
人体合成的初始
HSA
多肽,
需要经过膜系统加工形成正确的空间结构 才能有活性。
与途径
II
相比,
选择途径
I
获取
r HSA
的优势是
___________________________________ _____________
。
(
5
)为证明
rHSA< br>具有医用价值,须确认
rHSA
与
_________________
的生物学功能一致。
11.
(
2016
·全国理综Ⅱ卷
40
)
(
15
分)
下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。
供体的
A
体细胞
重组
早
期
代孕
新个体
细胞
胚胎
个体
去核卵
卵母
母细胞
细胞
回答下列问题:
(
1
)图中
A
表示正常细胞核,染色体数为
2n
, 则其性染色体的组成可为
____________
。
过程①表示去除细胞 核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用
________________ _________
的方法。
②代表的过程是
__________________ __________
。
(
2
)
经
过多次传代后,
供体细胞中
_______________
的稳定性会降低。
因此,
选材时 必须关注传代次数。
(
3
)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同, 从遗传物质的角度分析其原因是
________________________________ ______________________________________________
。
(
4
)
与
克
隆
羊
“
多
莉
(
利
)
”
培
养
成
功
一
样
,
其
他
克
隆
动
物
的
成
功
获
得
也
证
明
了
__________ _____________________________________________
。
12
.
(
2016
·
全国理综Ⅲ卷
40
)
(
15
分)
图
(
a
)
中的三个
DNA
片段上以此表示出了
EcoRI
、
BamHI
(
1
)未获取
HSA
基因,首先需采集人的血液,提取
____ _________
合成总
cDNA
,然后以
cDNA
和
S au3AI
三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(
b
)为某种表达载体示意图 (载
体上的
EcoRI
、
Sau3AI
的切点是唯一的)
。
第
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