基因工程试题(8)

2021年2月28日发(作者：女生在小便高清图)
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基因工程试题

一、选择题（每题
1
分，共
15
分）

1
、下列有关基因的叙述，错误的是【
A
】

A
蛋白质是基因表达的唯一产物



B
基因是
DNA
链上具有编码功能的片段

C
基因也可以是
RNA

D
基因突变不一定导致其表达产物改变结构

2
、基因工程的单元操作顺序是【
B
】

A
增，转，检，切，接



B
切，接，转，增，检

C
接，转，增，检，切



D
切，接，增，转，检


3
、生物工程的上游技术是【
A
】

A
基因工程及分离工程

B
基因工程及发酵工
程

C
基因工程及酶工程
D
基因工程及细胞工
程

4
、下列各组专业术语中，含义最为接近的是

【
C
】

A
终止子与终止密码子
B
基因表达与基因转译

C DNA
退火与
DNA
复性
D
重组子与转化子

5
、根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成
【
B
】

A 2
大类

B 3
大类

C 4
大类
D 5
大类

1
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6
、
T

4

-DNA
连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段
DNA
片段连接
在一起，其底物的关键基团是【
D
】

A 2' -OH
和
5'
–
P B 2' -OH
和
3'
-P

C 3' -OH
和
2'
–
P
D 5' -OH
和
3'
-P

7
、下列有关连接反应的叙述，错误的是【
A
】

A
连接反应的最佳温度为
37
℃


B
连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于
10%

C
连接反应缓冲体系的
ATP
浓度不能高于
1mM

D
连接酶通常应过量
2-5
倍

8
、原生质体转化方法不大适用于

【
A
】

A
大肠杆菌

B
枯草杆菌
C
酵母菌
D
链霉菌

9
、下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是

【
A
】

A Cosmid >
λ
-DNA > Plasmid
B
λ
-DNA >
Cosmid > Plasmid

C Plasmid >
λ
-DNA > Cosmid D Cosmid >
Plasmid >
λ
-DNA

10
、
若某质粒带有
lacZ
标记基因，
那么与之相匹配的筛选方法
是在筛选培养基中加入

【
D
】

A
半乳糖
B
异丙基巯基
-
β
-
半乳糖苷（
IPTG
）

C
蔗糖

D 5-
溴
-4-
氯
-3-
吲哚基
-
β
-D-
半乳
糖苷（
X-gal
）

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11
、
下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应 关系
中，错误的是

【
C
】

A
大肠杆菌－繁殖迅速
B
枯草杆菌－分泌机
制健全

C
链霉菌－遗传稳定
D
酵母菌－表达产物
具有真核性

12
、分子杂交的化学原理是形成

【
D
】

A
共价键
B
离子键
C
疏水键

D
氢键

13
、某一重组
DNA
（
6.2
kb
）

的载体部分有两个
SmaI
酶切
位点。
用
SmaI
酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带 子，
其
长度总和与已知数据吻合，
该重组分子插入片段上的
SmaI
酶切
位点共有

【
D
】

A 4
个
B 3
个
C 2
个

D
至
少
2
个

14
、下列设计的探针中，最佳的是

【
D
】

A ACATTAAATTATT B GGGCA

C ACCTTGATAAGGT
D CGGACTTGACCATC

15
、
cDNA
法获得目的基因的优点是【
A
】

A
成功率高
B
不含内含子
C
操作简便
D
表达产
物可以分泌

二、名词解释（每题
2
分，共
20
分）

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1
、
Southern
blotting
:
Southern
印迹：
Southern
发明的一种影印转
移物 质的方法。

2
、
Cosmid vector:
黏粒载体：含有
cos
位点的质粒载体。

3
、
cDNA library:cDNA
文库：是指某生物某一发育时期所 转录形成
的
cDNA
片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

4< br>、
RACE:
是一种通过
PCR
进行
cDNA
末端快 速克隆的技术，是以
mRNA
为模板反转录成
cDNA
第一链后用
P CR
技术扩增出某个特异位点到
3
，
或
5
，
端之间 未知序列的方法。

5
、
Probe:
探针：指被标记物质标记了的核酸。

6
、
RT-PCR
：
逆转录
PCR
：先用逆转录酶 作用于
mRNA
，以寡聚
dT
为引
物合成
cDNA
第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方
法称为逆转录
PCR
。

7
、
Insert inactivation:
插入失活，基因工程载体上 的某些选择标
记基因常常含某种或某几种限制性内切酶的单一酶切位点，
在该位点
用相 应的限制性内切酶处理，
并将外源
DNA
片段插入该位点，
则插入
的 外源
DNA
片段将破坏原有基因的读码框，
往往导致原有的选择标记
基因无法 翻译表达，
或即使翻译表达，
形成的也是丧失了原有生物活
性的蛋白质，这一现象称为 插入失活。
。

8
、
S-D
Sequence:
S-D
序列：在大肠杆菌
mRNA
的核糖体结合位点上，
含有一个转译起始密 码子及同
16S
核糖体
RNA 3
，
末端碱基互补的序
列，该序列最初由
Shine
、
D algarno
发现，故后来命名为
Shine
—
Dalgarno
序列，简称
S-D
序列。

4
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9
、
Shuttle
plasmid
vector:
穿 梭质粒载体：指一类由人工构建的具
有两种不同复制起点的选择标记，
因而可在两种不同宿主细 胞中存活
和复制的质粒载体。

10
、
MCS:
指载体上人 工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的
酶切位点的
DNA
片段。

三、简答题（每题
5
分，共
25
分）

1
、理想质粒载体的必备条件？

答：

⑴具有较小的分子质量和较高的拷贝数。


⑵具有若干限制性核酸内切酶的单一酶切位点。


⑶具有两种以上的选择标记基因。


⑷缺失
mob
基因。


⑸插入外源基因的重组质粒较易导入宿主细胞并自制和表达。

2
、核酸操作的基本技术有哪些？

答：①核酸提取与纯化


②核酸的检测与保存


③核酸的凝胶电泳


④核酸分子杂交

3
、影响核酸保存的关键因素是什么？怎样保存核酸制品？

答：
关键因素
：

①
保存液的酸碱度


②
保存温度

保存方法：

①
一般保存可用浓盐液 ，
NaCL-
柠檬酸缓冲液或
0.1mol/L
醋酸缓
冲液。
②
对
DNA
来说，
在
pH4
～
11
的范 围分子的碱基较稳定，
超出此
5
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范围
DNA
易变性或降解，低温、稀碱下保存
DNA
及低温下保存
RNA
均较稳 定
。③
固态核酸通常在
0
℃以上低温干燥保存即可。

4
、合成
cDNA
第二链的主要策略有哪些？

答：①自身引导合成法


②置换合成法


③
PCR
合成法


④快速扩增
cDNA
末端法


⑤双链
cDNA
末端的处理


⑥
cDNA
与载体的连接

5
、基因工程诞生的理论基础是什么？

答：是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。



理论上的三大发现：

①证实了
DNA
是遗传物质

②揭示了
DNA
分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理

③遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定



技术上的三大发明：

①限制核酸内切酶的发现与
DNA
切割

②
DNA
连接酶的发现与
DNA
片段的连接

③基因工程载体的研究与应用

四、问答题（每题
10
分，共
40
分）

1 PCR
技术主要应用在哪些领域？

答：①核酸基础研究

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②序列分析

③检测基因表达

④从
cDNA
文库中放大特定序列

⑤研究已知片段邻近基因或未知
DNA
片段

⑥进化分析

⑦医学应用

⑧分析生物学证据

⑨性别控制

⑩转基因检测。

2
细菌的限制与修饰系统有什么意义？大肠杆菌
K12
限制与修饰系
统的遗传分析揭示的
4
种表型是什么？？

答：

宿主控制的限制与修饰现象广泛存在于原核细菌中，
它有两方
面的作用，
一是保护自身
DNA
不受限制；
二是破坏入侵外源
DN A
使之
降解。细菌正是利用限制与修饰系统来区分自身
DNA
与外源
DNA
的。
外源
DNA
可以通过多种方式进入某一生物体内，
但是它 必须被修饰成
受体细胞的限制内切酶无法辩认的结构形式，
才能在寄主细胞内得以
生存 ，否则会很快被破坏。因此，在基因工程中，常采用缺少限制作
用的菌株作为受体，以保证基因操作的顺 利完成。


大肠杆菌
K12
限制与修饰系统的遗传分析揭示，< br>它有以下
4
种表型：

r
k
+
m
k
+

野生型

r
k
-
m
k
+
限制缺陷型



r
k
-
m
k
-
限制和修饰缺陷型


7