常用染色剂

2021年2月28日发(作者：男性性功能健康)
常用染色剂


实验室
常用染料性能介
绍及常用药品试
剂和培养基的配
制



生物标本常用染料性能简介



（一）天
然染料
(Natural Dyestuff)


1
、苏木精

苏木精是从
南美的苏木（热带豆科植物）干
枝 中用乙醚浸
制出来的一种
色素，是最常用的染料之一。苏
木精不能直接染色，必须暴< br>露在通气的地
方，使他变成氧化苏木精（又叫
苏木素）后才能使用，这叫
做“成 熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长
，配置后时间愈久，染色力
愈强。被染材
料必须经金属盐作媒剂作用后才
有着色力。所以在配制苏木
精染剂时都要
用媒染剂。 常用的媒染剂有硫酸
铝按、钾明矾和铁明矾等。



苏木精是< br>淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶
于酒精，微溶于水和甘油，
是染细胞核的
优良材 料，他能把细胞中不同
的结构分化出各种不同的颜色
。
分化时组织所
染的颜色 因处理的情况而异，用
酸性溶液（如盐酸—酒精）
分化后呈红色
，水洗后仍恢复青蓝色 ，用碱性
溶液（如氨水）分化后呈蓝
色，水洗后呈
蓝黑色。



2
、洋红

洋红又叫胭脂
红或卡红。一种热带产的雌性胭
脂虫干燥后，
磨成粉末，提
取出虫红，再用明矾处理，除去
其中杂质，就制成 洋红。单
纯的洋红不能
染色，要经酸性或碱性溶液溶解
后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或
苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂
等。


洋红使细
胞核的优良染料，染色的标本不
易褪色。用作切片或组织块
染都适宜，尤
其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能
保持几年。洋
红溶 液出现浑浊时要过滤后再用
。



（二）人
工染料
(Synthetic dyestuff)


人工染料
，即苯胺染料或煤焦油染料，种
类很多，应用极广。它的缺
点是经日 光照
射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲
基绿等更易褪色。在制片中
注意掌握酸碱
度，并避免日光直射，也能经几
年不褪色。



1
、酸性品红

酸性品红
是酸性染料，呈红色粉末状，能
容 于水，略溶
于酒精（
0.3%
）。他是良好的细胞制染色剂，
在动物制片上应 用很广，在
植物制片上用
来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤
维素壁。他跟甲基绿同染，< br>能显示线粒体
。



组织切片
在染色前先浸在带 酸性的水中，
可增强它的染色力。酸性品
红容易跟碱起
作用，所以染色过度，易在自来
水中褪色。



2
、刚果红

刚果红 是酸
性染料，呈枣红色粉末状，能溶
于水和酒精，
遇酸呈蓝色。
他能作染料， 也用作指示剂。他
在植物制片中常作为苏木精
或其他细胞染
料的衬垫剂。他用来染细胞 质时
，能把胶制或纤维素染成红
色。在动物组
织制片中用来染神经轴、弹性纤
维、胚胎材料等。刚果红可
以跟苏木静作
二重染色，也可用作类淀粉染色
，由于他能溶 于水和酒精，
所以洗涤和脱
水处理要迅速。



3
、甲基蓝

甲基蓝是弱
酸性染料，能溶于水和酒精。甲
基 蓝在动植物
的制片技术方
面应用极广。他跟伊红合用能染
神经细胞，也是细菌制片中< br>不可缺少的染
料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化
，
因此 用他染色
后不能长久保存。



4
、固绿
< br>固绿是酸性染
料，能溶于水（溶解度
为
4%
）和酒精（溶解度
为
9%
）
。固绿是一种染含有浆质的纤
维素细胞组织的染色剂，在染
细胞和
植物组织上应
用极广。他和苏木精、番红并列
为植物组织学上三中最常用
的染料。



5
、苏丹Ⅲ 苏丹Ⅲ是弱
酸性染料，呈 红色粉末状，易溶
于脂肪和酒精
（溶解度
为
0.15%
）。
苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。



6
、伊红

这类染 料种类很多。常用的伊红
Y
，是酸性染料，呈红色带蓝
的小结晶或棕
色粉末状 ，溶于水（
15
摄氏度是溶解度达
44%
）和酒精（溶
于无水酒精的
溶解度为
2%
）。伊红在
动物制片中广泛应用，是很好
的细胞
质染料，常用
作苏木精的衬染剂。



7
、碱性品（复）红

碱
性品红是碱性染料，呈暗红色粉
末 或结晶状，
能溶于水（溶解
度
1%
）和酒精（溶解度
8%
） 。碱性品红在
生物学制片中用
途很广，可用
来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜
复 红性颗粒和中枢神经组织
的核质。在生
物学制片中用来染维管束植物的
木质化壁，又作 为原球藻、
轮藻的整体染
色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。在

尔根氏反应
中用作组织化
学试剂，已核查脱氧核糖核酸。



8
、结晶紫

结晶紫是碱
性染料，能溶于水（溶解
度
9%
）和酒精（溶解
度
8.75%
）。结晶紫在细胞学、组织学 和细菌学等
方面应用极广，是一种优
良的染色剂。
他是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染
淀粉、纤维蛋
白、神经胶质等。凡是用番红和
苏木精或 其他染料染细胞核
不能成功时，
用它能得到良好的结果。用番红
和结晶紫作染色体的二 重染
色，染色体染
成红色，纺锤丝染成紫色，所以
也是一种显示细胞分裂的优
良染色剂。用
结晶紫染纤毛，效果也很好。用
结晶紫染色的切片，缺点是
不易长久保存
。



9
、龙胆紫

龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和
甲基紫的混合
物。在必要是
，龙胆紫能跟结晶紫互 相替用。
医药上用的紫药水，主要成
分是甲基紫，
需要时能代替龙胆紫和结晶紫。


10
、中性红

中性红
是弱碱性染料 ，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度
4%
）和酒精（
溶解度
1.8%
）。它的碱
性溶液中呈现黄色，在强碱性
溶液中
呈蓝色，而在
弱酸性溶液中呈 红色，所以能用
作指示剂。中性红无毒，常
做活体染色的
染料，用来染原生动物和显示 动
植物组织中活细胞的内含物
等。陈久的中
性红水溶液，用作显示尼尔体的
常 用染料。



11
、番红

番红是碱性染料，能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物
组织学生常用
的染料，能染细胞核、染色体和
植物蛋白质，示维管束植物
木质化、木栓
化和角质化的组织，还能染孢子
囊。



12
、亚甲蓝或美蓝

亚甲
蓝或 美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于
水（溶解度
9.5%
）和酒精（溶解度
6%
）。亚甲蓝是动物学
和细胞学染色上
十分重要的细
胞核染料，其优点是 染色不会过
深。



13
、甲基绿

甲基绿
是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度
8%
）和酒精（
溶解 度
3%
）。甲基绿是
最有价值的细胞和染色剂，细
胞学上
常用来染染 色
质，跟酸性品红一起可作植物木
质部的染色。



把 硫酸铜
溶液缓缓倒入柠檬酸钠
-
碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产
生沉淀， 要过
滤。本尼迪克溶液配制后能长期
使用（存放时间较久而产生
沉淀是，取上
层清液使用，不必重新配制）。



本尼迪克
溶液用来测试食物、血液和尿中
的葡萄糖，可测出
0.15
～
0.20%
的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加
热时，如果未知物中有葡萄糖，会< br>形成红色的氧
化亚铜沉淀物。



配方二

裴林（
Fehling
）溶液



（
1
）把
34.5
克硫酸铜溶于
500
毫升蒸馏
水中。



（
2
）把
125
克氢氧化钾（钠）和< br>173
克酒石酸钾钠溶
解在
500
毫升蒸
馏水中。



上述两种
溶液应分别保存。在检测葡萄糖
时，使他们等量的混合 ，加
入待测物的试
管内，加热到沸腾。如果有葡萄
糖，会形成红色的氧化亚铜
沉淀物。



2
、检查淀粉的试剂



鲁哥氏（
Lugol’
s）溶液（碘液）



取
6
克碘
化钾溶于
20
毫
升蒸馏水中，搅拌到溶解 后，加入
4
克碘，等
碘充分溶解，
在加入
80
毫升
蒸馏水，贮存在棕色试剂瓶内。



碘液用来
测试食物样品或叶 片中的淀粉，
也用作染色剂，例如可染色
鞭毛、纤毛和
细胞核等。



3
、检查蛋白质的试剂



配方一

米伦（
Millon
）试剂



在
60
毫升浓硝酸（比
重
1.42
）中溶解40
克汞（水浴加温可助
溶），
溶解后加入两
倍体积的蒸馏水稀释，静置 澄清
后，取它上层的清液备用。
这种试剂可长
期保存。



在待测物
中加入少量米伦试剂，加热，如
果有蛋白质，会出现红色。
这种试剂不能
用来测定尿中的蛋白质。



配方二

双缩脲试剂



分别配
制
10%
氢氧
化钠溶液和
1%
硫酸铜溶
液。



在
3
毫升待测物
中加入
1
毫升
10%
氢
氧化 钠溶液和
1
滴
1%
硫酸铜溶液
。
如果有蛋白质
，会 出现紫色反应。



4
、检查脂肪的试剂



苏丹Ⅲ（
Ⅳ）酒精饱和溶液



取
0.2
克
苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ），放入纯酒精中，加热，使它充分溶解
，
成为饱 和酒精
溶液，过滤后密闭在试剂瓶内保
存备用。



5
、酸碱指示剂



配方一

酚酞试剂和试纸



酚酞试剂

取
1
克酚酞，溶解在
100
毫
升
60%
的
酒精溶液里， 装在试剂
瓶内密闭保存
。



酚态试纸
取
1
克酚酞，
溶解
在
100
毫升
95%
酒精溶液里，
加
入
00
毫升
蒸馏水。把绿纸条放入
酚酞溶 液中浸湿后，取出，放在无氨气影响处晾干
。



酚泰试剂（试纸）
pH
值变色范
围
8.2
～
10
，在酸性和中性溶液中都无
色，再碱性溶
液中呈深红色。



配方二

红蓝石蕊试纸



取市售 石
蕊
1
克，放在
80
毫升
10%
酒精溶液中搅拌， 使它溶解
，然后
过滤。把滤液分成两
份。
1
份滴入稀
磷酸或 稀硫酸，到出现红色为止。另
1
份滴入稀氢氧
化钠溶液，到出现蓝色为止。在
上述制备的溶液中分别浸湿
滤纸条，随后
取出滤纸条，放在蔽光处、无酸
碱性气体影响 的地方晾干，
即的红、蓝两
种石蕊试纸。



红石蕊试
纸在碱性溶液中变蓝，蓝石蕊试
纸在酸性溶液中变红。



6
、检查二氧化碳的试剂



检查二氧
化碳的试剂，可用溴代麝香草酚
蓝溶液和石灰水。



配方一

溴代麝香草酚蓝溶液



取
0.1
克
溴代麝香草酚蓝，溶解
在
100
毫
升蒸 馏水里，滴入少
量
0.1%
氢氧化钾溶液
，使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。



溴代麝香
草酚蓝溶液
pH
值变色范 围是
6.0
（黄）～
7.6
（蓝）。待测物
中如果有二氧
化 碳，会形成碳酸而使溶液变成
黄色。



配方二

石灰水



在蒸馏水
中加入生石灰（氧化钙），变加< br>边搅拌，直到加入的生石灰
不再溶解，呈
饱和状态时为止。在石灰水澄清
后，倾 出上层清液，用滤纸
过滤，放在密
闭瓶内保存。



如果测定
的物质中有二氧化碳，会生成碳
酸钙，使石灰水变浑浊。



7
、检查细胞生活力的试
剂



检查细胞
有无生活力，可用中性红甲基蓝
试剂。配制的方法是先分别
配制1%
中性红溶液和
1%
甲基
蓝溶液，这两种溶液各取
1
份混合，用来鉴定
细胞的死活。
该试剂使活细胞的液泡染上红色
，而使死细胞全部染成 蓝色



（二
）分离液



1
、肌细胞分离液



配方一

马克凯郎（
Maccallum
）液



取< br>1
份浓
硝酸、
2
份甘油、
3
份水，混合后就得到马克 凯
郎液。



把新鲜的
肌肉组织小块（横纹肌、心肌和
平滑肌）投入这种溶液里浸
渍，分离时间
需
1
～
3
日。这
种溶液尤其适于分离横纹肌核心
肌细胞。



配方二

氢氧化钾溶液



取
35< br>克氢氧化钾，放
在
100
毫升蒸馏水中，加热，使它
完全溶解后，在室温下冷却
。



把新鲜的
肌肉组织块投入氢氧 化钾溶液中，浸
泡
15
～
30
分钟后，肌细
胞便可分离。< br>


2
、上皮细胞分离液



配方一

福尔马林—氯化钾溶液



称
取
58.44
克氯化钠，用蒸馏水溶解，再稀释到
1000
毫升，加入2
毫
升福尔马林。



这种溶液
是很好的 上皮细胞分离液，分离
很迅速，而且能保护纤细的
上皮细胞纤毛
。小肠和气管的上皮组 织小块，
放在此溶液里
2
小时即可分
离，口腔和皮
肤上皮组织小块的 细胞分离一般
需
3
日左右。



配方二

水和氯醛溶液



称
取5
克
水和氯醛，用蒸馏水溶解，再稀
释到
100
毫升，就得到
5%
水
合氯醛溶液。



从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上
皮组织一小块，投入以上溶
液中，浸
泡
2 4
～
48
小时。



3
、神经细胞分离液



配方一

可 以用上皮细胞分离液配方一福
尔马林—氯化钠溶液来分离
神经细胞（
见
2）。



配方二

硼酸生理盐水溶液



在生理盐
水溶液内加入一些硼酸，搅拌到
不再溶解时为止，使成 为饱
和溶液。



把脊椎灰
质和脑皮质部位的神经组织一小
块投入这种溶液中分离。



4
、植物茎细胞分离液



杰弗里氏
（Jeffrey’
s）液



取等 量
的
10%
铬酸
溶液和
10%
硝酸溶液混合，成铬酸—硝< br>酸溶液。



这种溶液
用来分离木本植物茎部的导管、< br>管胞、筛管、伴胞和韧皮纤
维等。把材料
切成小块放在水里，加热煮沸，
冷却后 再加热煮沸。这样重
复几次，
到材料全
部沉于水底后，
投入分离液内，
分离时间
是
24
～
48
小时
。



5
、植物根尖细胞分离液



配方一

盐酸—酒精溶液



在
1< br>份
95%
酒精中
慢慢的加入
1
份浓盐酸
，
即 成盐酸—酒精溶液
，
装瓶
密闭保存。



把植物根
尖部位截下一小段，投入以上溶
液中分离。



配方二

4%
盐酸溶液



配
制
4%
盐酸溶液。



截下植物< br>根尖部位，
投入盛
有
4%
盐酸溶液的小烧杯
内，
在< br>60
摄氏度温
水中隔水温
热
1
～
2
分钟，使
根尖软而不酥，这时分离效果最
好。



6
、植物纤维分离液



取
10
克氢 氧化钠（或氢氧化钾），溶解在
90
毫升水里，制成
10%
氢氧
化钠 （或氢氧
化钾）溶液，放在瓶里密闭保存
。



把植物茎
纵切成细条，剪成小段后，投入
分离液内。



7
、植物细胞质壁分离液



配方一

30%
蔗糖溶液



取
30
克蔗糖， 溶解
在
70
毫升蒸馏水里，
装瓶备用。



配方二

5%
氯化钠溶液



取5
克食
盐，溶解在
95
毫升蒸馏水里，装瓶备用。



配方三

5%
硝酸钾溶液


取
5
克硝
酸钾，溶解在
95
毫升蒸馏水里，装瓶备用。



（三
）生理盐水



配方一

各种动物需用的生理盐水



哺乳类

需用生理盐水浓度是
0.9%
。
称取
0. 9
克氯化钠
，
溶解在少量蒸
馏水中，稀释
到
100
毫升。



鸟类

需
用的生理盐水浓度是0.75%
。
称
取
0.75
克氯化钠
，
溶解后 用蒸
馏水稀释
到
100
毫升。



两栖类

需用的生理盐水浓度是
0.65%
。
称
取
0.65
克氯化钠
，
溶解后用
蒸馏水稀释
到
100
毫升。



配方二

任氏（Ringer’
s）生理盐水



氯化钠

6.5
克

碳酸氢钠
0.2
克



氯化钾

0.14
克

磷酸二氢钠

0.01
克



氯化钙

0.12
克



先把氯化
钠、氯化钾、碳酸氢钠、磷酸二
氢钠分别溶解在少量蒸馏水
中，混合 后用蒸馏水稀释
到
980
毫升。然后取氯化钙溶解在
20
毫升蒸馏水
中，把氯化钙
溶液逐滴加入到上述溶液内，边
滴、边搅拌，以免产生不溶
解的 磷酸钙沉
淀。



此溶液用
于变温动物，尤其常用于两栖类
。



配方三

乐氏（Locke’
s）生理盐水



氯化钠

9.0
克

碳酸氢钠
0.1
～
0.3
克



氯化钾

0.42
克

氯化钙

0.24
克