微生物检测菌落总数测定方法

2021年2月27日发(作者：淋巴细胞比率偏高)
微生物学检验菌落总数的测定


1

原理
< br>微生物活体数量的测定方法，
常用平板培养计数法。
它是通过将样品制成均匀的一系列< br>不同稀释度的稀释液，再取一定的稀释液接种，使其均匀分布于培养皿中特定的培养基内，
最后根 据在平板上长出的菌落数计算出每克（或
mL
）样品中的活菌数量。


2

材料和仪器

2.1

平皿：
φ90mm
。

2.2


无菌锥形瓶：容量
250mL
，
500 mL
。

2.3


无菌吸管：
1mL
（具
0.01mL< br>个度）
,10mL
（具
0.1mL
刻度）或微量移液器及吸头。

2.4


灭菌锅。

2.5

恒温培养箱

2.6

涂棒。

2.7

酒精灯。

2.8


超净工作台。

2.9

磁力搅拌器。

2.10

漩涡振荡器


3

检验程序




菌落总数的检验程序见下图。


检样

10g
样品
+90mL
无菌生理水，均质








































































10
倍系列稀释

























选择至少
3
个适宜样品稀释均液





































方法①↙

↘方法②



各取
1mL
分别加入无菌培养皿中，

在培养皿中加入
15mL~20mL
平板计数


































































































每皿中加入
15mL~20mL
平板计数

琼脂培养基，凝固。然后在每皿中加入







琼脂培养基，混匀，凝固。

0.2mL
样品稀释液，涂布均匀。




































↘

↙






































在
36
℃±
1
℃倒置培养
24
～
48
小时

























计算各平板菌落数













































计算菌落总数