做完人流后要注意什么黄酒降脂功效的研究

2021年2月23日发(作者：小儿脑瘫的治疗方法)
黄酒降脂功效的研究

目






录

摘要
………………………………………………………………… ………………………
2

1
前言
………………………………………… ……………………………………………
3
1.1
黄酒简介
……………………………………………………………………………
3
1.2
黄酒的营养成分及功能
……………………………………………………………
3

1.3
国内外研究状况
……………………………………………………………………
4

2
实验材料
…………………………………………………………………………………6

2.1
实验动物
……………………………………………………………………………
6

2.2
实验试样
……………………………………………………………………………
6

2.3
试剂
…………………………………………………………………………………
6

2.4
主要试剂配制
………………………………………………………………………
6
2.5
主要仪器
……………………………………………………………………………
6

3
方法
………………………………………………………………………………………7

3.1
黄酒的制备
…………………………………………………………………………
7

3.1.1
黄酒浓缩物的制备
……………………………………………………………
7

3.1.2
黄酒组分分离流程
……………………………………………………………
7

3.2
动物实验方法
………………………………………………………………………
8

3.2.1
动物分组
………………………………………………………………………
8

3.2.2
大白兔饲养方法
………………………………………………………………
9

3.2.3
实验方法
………………………………………………………………………
9
< br>4
结果
……………………………………………………………………………………
12

4.1
黄酒对大白兔体重的影响
…………………………………………… ……………
12

4.2
黄酒对大白兔血液中胆固醇
(TC)
含量的影响
……………………………………
12

4.3
黄酒对大 白兔血液中甘油三酯
(TG)
含量的影响
…………………………………
13< br>
5
分析与讨论
………………………………………………………………………… …
14

谢辞
………………………………………………………………………… ……………
16

参考文献
………………………………………………………… ………………………
17








武汉工业学院





























1
黄酒降脂功效的研究

黄酒降脂功效的研究


学生：王念

指导教师：刘志国

（武汉工业学院生物与制药工程系

武汉


430023
）

摘要
：
研究黄酒和黄酒的浓缩物对新西兰兔降低血清胆固醇和甘油三脂的含量，
预防
动脉粥样硬化等 功能的作用。以新西兰兔为实验对象，将
8
只新西兰兔随机分为
4
组：
基础组，高脂组，黄酒预防组，黄酒浓缩物组，分别灌喂黄酒和黄酒二倍的浓缩物，
喂食高脂饲料构造 高脂模型。
实验步骤：
每隔
2
周称体重并记录，
喂养一个月后抽血，
采用化学比色法检验血液中胆固醇的含量，
用甘油三酯试剂盒的甘油氧化酶法检测甘
油 三酯含量。得出结论：黄酒有降低新西兰兔血液总胆固醇和甘油三酯的功能。

关键词
：黄酒


降低血脂


胆固醇


甘油三酯


动脉粥样硬化


抗氧化


Rice Wine effect of lowering blood lipid
Nian Wang,Zhiguo Liu
(Department of Biological and Pharmaceutical Engineering
，
Wuhan Polytechnic University
，

Wuhan

430023
）

Abstract:
On the rice wine and rice wine concentrates on rabbits lower serum cholesterol
and
triglyceride
in
the
prevention
of
atherosclerosis
and
other
function.
New
Zealand
rabbit
for
the
experiment,
eight
rabbits
were
randomly
divided
into
four
groups:
Group
based, high fat group, prevention group rice wine, rice wine concentrates groups, feeding
irrigation
of
rice
wine
and
rice
wine
twice
concentrates,
feeding
high
fat
diet
Effect
of
structural
model.
Experimental
steps:
Chen
Tizhong
every
two
weeks
and
record,
one
month
after
blood
feeding,
a
chemical
method
of
testing
blood
cholesterol
levels,
and
triglyceride kit glycerol enzymatic oxidation test triglyceride levels And then executed, for
observation
of
the
liver,
using
optical
microscopy
cross
section
of
the
aortic
wall
lipid
plaque.
Concluded:
yellow
rice
wine
has
reduced
the
function
of
blood
lipid
rabbits,
rabbits rice wine on the atherosclerosis prevention role.
Keywords:
rice
wine


Lower
blood
lipid


cholesterol

triglyceride


Atherosclerosis

Antioxidant





武汉工业学院





























2
黄酒降脂功效的研究

1
前言

1.1
黄酒简介

黄酒
(Chinese rice wine)< br>是以稻米、黍米、玉米、小麦等谷物为原料，经蒸煮、加
曲、糖化、发酵、压榨、过滤、煎酒、储 存、勾兑而成的酿造酒。黄酒是我国的民族
特产，也称为米酒，属于酿造酒，在世界三大酿造酒
(
黄酒、葡萄酒和啤酒
)
中占有重
要的一席。
酿酒技术独树一帜，< br>成为东方酿造界的典型代表和楷模。
其中以浙江绍兴
黄酒为代表的麦曲稻米酒是黄酒历史 最悠久、
最有代表性的产品；
山东即墨老酒是北
方粟米黄酒的典型代表；福建龙岩沉缸 酒、福建老酒是红曲稻米黄酒的典型代表
[1]
。

在最新的国家标准中，按 黄酒的含糖量将黄酒分为以下
4
类
[2]
：

干黄酒：“干”表示酒中的含糖量少，糖份都发酵变成了酒精，故酒中的糖份含
量最低，最新的国家标准中， 其含糖量小于
1.00g/100mL(
以葡萄糖计
)
，含酒精
16 ~19%
，总酸
0.45g/100mL
以下。这种酒属稀醪发酵，总加水量为原料米 的三倍左
右。发酵温度控制得较低，开耙搅拌的时间间隔较短。酵母生长较为旺盛，故发酵彻
底 ，残糖很低。

半干黄酒：
“半干”表示酒中的糖份还未全部发酵成酒精，还保留了一 些糖份。
酒的含糖量在
1.00~3.00%
之间，含酒精
17.5~19. 5%
，总酸
0.45g/100mL
以下。在发
酵过程中，要求较高。酒质厚 浓，风味优良。可以长久贮藏。

半
甜
黄
酒
：
这< br>种
酒
含
糖
份
3.00~10.00%
之
间< br>,
含
酒
精
13.5~16.5%
，
总
酸0.5~0.55g/100mL
。这种酒采用的工艺独特，是用成品黄酒代水，加入到发酵醪中，
使糖化发酵的开始之际，
发酵醪中的酒精浓度就达到较高的水平，
在一定程度上抑制< br>了酵母菌的生长速度，
由于酵母菌数量较少，
对发酵醪中的产生的糖份不能转化成酒精，故成品酒中的糖份较高。

甜黄酒
：这种酒，一般是采用淋饭操作法，拌入酒 药，搭窝先酿成甜酒娘，当糖
化至一定程度时，加入
40~50%
浓度的米白酒或糟烧 酒，以抑制微生物的糖化发酵作
用，酒中的糖份含量达到
10.00~20.00g/100m L
之间
,
含酒精
17.5~19.5g/100mL
，总酸
0.4g/100mL
以下由于加入了米白酒，酒度也较高。


1.2
黄酒的营养成分及功能

黄酒有丰富的内涵，
其中不仅含有大 量的蛋白质、
碳水化合物及维生素，
还含有
多种有机酸、酯类物质及矿物质，完全具备 了“含多种氨基酸，发热量高，易被人体
消化吸收”这
3
项认定营养食品的必要条件， 被形象地誉为“液体蛋糕”
。黄酒经长
时间的糖化发酵，
原料中的淀粉和蛋白质被酶分 解为低分子糖类、
肽和氨基酸等浸出
物，最易被人体吸收，故黄酒被列为营养食品
[3 ]
。

黄酒中含有的多肽、
维生素、
酚类物质和功能性多聚糖具有抗 氧化，
清除自由基，
降低血脂功效，预防动脉粥样硬化，抗衰老以及提高记忆力等功能。

武汉工业学院





























3
黄酒降脂功效的研究

黄酒有很高的营养价值，< br>最新研究发现，
黄酒含丰富的蛋白质，
每升绍兴酒的蛋
白质为
16g< br>，是啤酒的
4
倍。黄酒中的蛋白质经微生物酶的降解，绝大部分以肽和氨
基酸的 形式存在，极易为人体吸收利用。黄酒含
21
种氨基酸，其中
8
种是人体不能
合成或合成的速度远不适应机体需要，必须由食物供给的。每
1L
绍兴酒中的必需氨< br>基酸达
3400mg
，
半必需氨基酸达
2960mg
。
黄酒中还含有较高的功能性低聚糖，
仅已
检测出的异麦芽低聚糖，每
1L
绍 兴酒就高达
6g
。异麦芽低聚糖又称为分支低聚糖，
具有显著的双歧杆菌增殖功能，< br>能改善肠道的微生态环境，
促进
B
族维生素的合成和
钙、镁、铁等矿物 质的吸收，提高免疫力和抗病力，预防各种慢性病及癌症。每天只
需摄入几克功能性低聚糖，就能起到显 著的双歧杆菌增殖效果
[4]
。

绍兴黄酒含活性很强的降血压生物活性物质 和降胆固醇生物活性物质，
特别是已
检测出的无机盐有
18
种之多，包括钙、 镁、钾、磷等常量元素和铁、铜、硒等微量
元素。镁既是人体内糖、脂肪、蛋白质代谢和细胞呼吸酶系统 不可缺少的辅助因子，
也是维持肌肉神经兴奋性和心脏正常功能，保护心血管系统所必需的。黄酒含镁< br>200
至
300mg/L
。锌具有多种生理功能，是人体
100
多种酶的组成成分，对多种代谢及免
疫调节过程起着重要的作用，
锌能保护心肌细胞，
促进溃疡修复，
并与多种慢性病的
发生和康复相关。
绍兴元红酒含锌
8.5 mg/L
，
健康成人每日约需
12.5mg/L
锌，
喝
30 0mL
黄酒相当于
20%
以上的需要量。
硒是谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，
能消除体内产生
的过多活性氧自由基，
因而具有提高机体免疫力、
抗衰老、< br>保护心血管和心肌健康的
作用。每
1L
绍兴元红酒及加饭酒含
10至
12?
g
硒。

研究发现，黄酒中含有的多肽、维生素、酚类 物质、类黑精、谷胱甘肽等生理活
性成分和功能性多聚糖具有抗氧化，
清除自由基，
降 低血脂功效，
预防动脉粥样硬化，
抗衰老以及提高记忆力等功能
[5]
。

1.3
国内外研究状况

目前对黄酒的研究尚停留在蛋白质 、氨基酸、维生素、矿物质微量元素等常规
营养物质的层次上，
且缺乏较为系统全面地检测与研 究。
对黄酒生物活性肽、
多酚类
物质的检测与研究至今尚未开展。

日本对清酒及清酒槽中具有抑制脯氨酰肽链内切酶活性的肽进行了研究，脯氨
酰肽链内切酶能分解抗利尿 激素，
该激素有保持记忆的作用。
在各种酿造酒中，
对功
能性成分研究最多最 为深入的是葡萄酒。对葡萄酒保健功能的研究是从
Richard
在
1981
年提出“法国悖论”之后
[6]
。经过对葡萄酒成分的研究和分析，发现葡萄酒中含
有 大量的酚类物质。
现在已经分离鉴定的酚类物质主要有白黎芦醇、
儿茶酚、
表儿茶酚、檞皮酮、芸香苷、杨梅酮和没食子酸等。这些酚类物质具有抗氧化功能，抑制低
密度脂蛋白(LDL)
的氧化，预防心血管病，抗癌，抗炎症和血小板凝聚的功能。对葡
萄酒中酚类物 质的研究除了生物活性外，
还有代谢途径和作用机制等多方面的深入研
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4
黄酒降脂功效的研究

究，
特别是对特殊酚类物质白藜芦醇进行了大量研究，
提出了白藜芦醇的含量、
功能
作用、分子结构、前驱体、形成机制和作用机制
[7]
。

在过去的几十年中，随着对葡萄酒中酚类物质研究的深入，
“法国 悖论”及大量
病理学研究报告的葡萄酒保健功能得到了科学的解释，
从而使喝葡萄酒有益健康的 宣
传令人信服，
据有关统计，
美国
70%
的民众认为喝葡萄酒以及其 中的酚类物质的保健
功能的研究仍在深入进行
[8]
。

黄酒保留了 发酵过程中产生的营养和活性物质，其保健养生功能历来倍受行家
推崇，但是对黄酒保健的科学研究甚少 。为此，开展了

“黄酒的保健功能研究”项
目的研究工作，
取得了初步的成 果。
通过动物实验等科学手段证实，
黄酒具有降低血
脂、增强记忆能力、预防动脉粥样 硬化、延缓衰老、抗氧化能力、调节肠道菌群等多
种保健功能
[13]
。
< br>黄酒中的碳水化合物、蛋白质、矿物质、微量元素和维生素等相互协调和相互
补充作用构成了黄酒 较高的营养价值及保健作用，
这些成分对人体有着重要的生理功
能。目前对黄酒的研究尚停留在 蛋白质、氨基酸等常规营养物质上，由于蛋白质、氨
基酸也存在其它酒中，只是量的差别而已，无法从机 理上阐明黄酒的保健养生功能，
使宣传缺乏深度，
与当今科技发展极不相称。
在大力研 究葡萄酒和宣传其保健养生功
能的今天，黄酒的保健养生功能被忽视
[9]
。因此，若 能通过应用先进仪器设备和实验
方法，
对黄酒功能性成分进行深入研究与检测，
提出几 个特异的功能性成分，
必将大
大促进黄酒的发展。

















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5
黄酒降脂功效的研究

2
实验材料

2.1
实验动物

雄性新西兰大白兔
8
只
(
东西湖养殖场提供
)
，
5~6
月龄 ，体重
1.5~2.0kg
。

2.2
实验试样

黄酒由中粮绍兴酒有限公司生产的花雕酒
(
黄中皇
)
，酒精度
>16 .5%vol
，总糖：
15.1~40.0(g/L)
，酒龄：
2~3
年。

2.3
试剂

胆固醇
(
分析纯）















天津市凯通化学试剂有限公司

猪油


























自制，为新鲜炼制常用食用油

油红
O
染料




















北京试剂二厂

甘油三酯
(TG)
试剂盒












长春汇力生物技术有限公司

三羟基甲基氨基甲烷
(Tris)







武汉市华顺生物技术有限公司

10%
FeCl
3
溶液

磷硫铁试剂
(P-S- Fe)
2.4
主要试剂配制

(1)Tris- HCl(pH=8.6)
缓冲液配制

将
50mL
、
0.1 mol/L
的
Tris
溶液与
12.4mL
、
0.1mol /L
的盐酸混合后，加水稀释至
100mL
。
0.1mol/L
的相 对分子量为
121.12
。
0.1mol/L
的溶液中含
12.11 4g/L
。
Tris
溶液
可以从空中吸收二氧化碳，使用时应注意将瓶盖严。

(2)Tris-HCl(pH=8.1)
缓冲液配制

将
50mL
、
0.1mol/L
的
Tris
溶液与
26.2 mL
、
0.1mol/L
的盐酸混合后，加水稀释至
100mL
。< br>0.1mol/l
的相对分子量为
121.12
。
0.1mol/L< br>的溶液中含
12.114g/L
。
Tris
溶液
可以从空中吸 收二氧化碳，使用时应注意将瓶盖严
。

(3)10%
的三氯化铁溶液

将
10gFeCl
3
·
6H
2
O
溶于磷酸中，定容至
100mL
，储于棕色瓶 中冷藏。

(4)
磷硫铁试剂
(P-S-Fe)

取
10%
的三氯化铁溶液
1.5mL
于
100mL
棕色瓶内，加浓硫 酸定容至刻度。

(5)
胆固醇标准储液

准确称取胆固醇
80mg
，溶于无水乙醇中，定容至
100mL
。

(6)
胆固醇标准溶液

将储液用无水乙醇准确稀释
10
倍 。此标准液每毫升含
0.08mg
胆固醇。

2.5
主要仪器

5ml
注射器

武汉恒康医疗器械有限公司

电子天平

上海民桥精密仪器有限公司

SL302N
型

离心机
(TDL-5
型
)

CENTRIFUGE

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6
黄酒降脂功效的研究

紫外可见分光光度计
(VW8500
型
)

天美科技

石英比色皿

PHS-3C
数字酸度计

杭州东量仪器设备厂

D101
大孔吸附树脂

上海树脂厂

二乙氨基乙基纤维素
(DEAE)
交换树脂

上海恒信化学试剂公司

层析柱：直径
1.6×
40cm

1.6×
60cm

上海厦美生化科技有限公司

R-201
旋转蒸发仪

上海申科机械研究所

水循环真空泵


3
方法

3.1
黄酒的制备

3.1.1
黄酒浓缩物的制备

取
200mL
黄酒装入圆底 烧瓶中，装好收集烧瓶，打开冷凝水，打开水循环真空
泵
(0.08Mpa),
水浴温 度为
65
℃至
70
℃，时间
1h~2h
，旋转蒸发至冷凝管 上没有液体滴
下为止，
得到黄酒浓缩物，
测收集的液体和黄酒浓缩物的体积，
并用酒精计测出收集
瓶的酒精度。

3.1.2
黄酒组分分离流程

黄酒经过减压蒸馏后除去
90%
的酒精，得到黄酒浓缩物。用
1.6×
40cm
的玻璃
层析柱装上用乙醇浸泡
24h
后的
D101
大孔吸附树脂，
分别用
95%
的乙醇和纯水洗柱，
洗至无乙醇味。将去除酒 精的黄酒浓缩物样品上柱
40mL
，待样品流出离柱床
5cm
时
小心 加入蒸馏水
100mL
洗涤，滤出液每
3mL
收集一管，依次编号，用分光光 度计
(280nm)
检测后分组合并，主要为去脂溶性物质。然后用
250mL 70 %
的乙醇洗脱，洗
脱液每
3mL
收集一管，依次编号，用分光光度计
(530nm)
检测后分组合并，主要为脂
类物质，包括多酚，萜类脂溶性物质
[11 ]
。

把
DEAE-
纤维素树脂先用
0.5mol/LNa OH
浸泡
1h
,
再用
0.5mol/LHCl
浸泡
1h
，
然后用
Tris-HCl(pH=8.6)
缓冲液平衡
1h< br>，将处理后的
DEAE-
纤维素树脂用
1.6×
60cm
的玻 璃层析柱装柱
,
并用
Tris-HCl
缓冲液平衡柱床
15
～
20min
。加入用
Tris-HCl
缓冲
液
平
衡
1h
的
上
述
滤
出
液
30mL
样
品
，
待
样
品
流
出
离
柱
床
5cm
时
小
心
加
入
Tris-HCl(pH=8. 6)
缓冲液
100mL
洗涤，
滤出液每
3mL
收集一管，< br>依次编号，
用分光光
度计
(280nm)
检测后分组合并，主要为多糖 类物质。然后用
200mL
Tris-HCl(pH=8.1)
缓冲液洗脱，洗脱液 每
3mL
收集一管，依次编号，用分光光度计
(280nm)
检测后分组合并，主要为多肽类物质
[12]
。

分离步骤见图
1
。



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7
黄酒降脂功效的研究


























多肽类物质

洗脱

洗涤

DEAE
纤维素
离子交换树脂

去脂类物质

洗涤

滤出液

减压蒸馏

黄酒

酒精

黄酒浓缩物

D101
大孔吸附树脂

洗脱

脂类物质

滤出液

多糖类物质


图
1


黄酒分离流程图

3.2
动物实验方法

动物采用如下所示流程：






黄酒浓缩物

黄酒

分组喂养兔子

测血脂

功效确定

配制饲料


3.2.1
动物分组

实验动物为雄 性健康新西兰大白兔
8
只，
5~6
月龄，
体重
1.5~2. 0kg
。
随机分为四
组
[14]
。其分组
(
表1)
如下：

(1)
正常对照组
2
只
(
基础组
)
，喂养基础颗粒饲料
100g/
只
/d
。分别于 饲养第
2
周、
第
4
周、第
6
周、第
8周时检测并处死观察。

(2)
高脂模型组
2
只
(高脂组
)
，
喂养高脂饲料
(
96%
基础颗粒饲料
+
3%
猪油
+
1%
胆固
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8
黄酒降脂功效的研究

醇
)
100g/
只
/d。分别于饲养第
2
周、第
4
周、第
6
周、第
8
周时检测并处死观察。

(3)
黄酒预防组
2
只
(
预防组
)
，高脂饲料
100g/
只
/d
+
黄酒
20mL/
只
/d
每日待兔饮完
黄酒后再自由饮水，
分 别于饲养第
2
周、
第
4
周、
第
6
周、第
8
周时检测并处死观察。

(4)
黄酒浓缩物组
2< br>只
(
浓缩组
)
，高脂饲料
100g/
只
/d
+
黄酒浓缩物
16mL/
只
/d
每日
待兔饮完黄酒 后再自由饮水，分别于饲养第
2
周、第
4
周、第
6
周、第< br>8
周时检测并
处死观察。

表
1
动物饲料配比

组分

基础饲料

基础组
(A)

高脂组
(B)

预防组
(C)

浓缩组
(D)

100
96
96
96
高脂饲料
(g/
只
/d)

猪油

—

3
3
3
胆固醇

—

1
1
1
黄酒
(mL/
只
/d)

—

—

20
—

黄酒浓缩物
(mL/
只
/d)

—

—

—

16
3.2.2
大白兔饲养方法

3.2.2.1
饲料配比


标准棒状基础饲料购自东西湖养殖厂
.
主要是由麦皮、玉米、黄豆粉、稻谷 、多
种维生素、添加剂混合而成。

4
种饲料配制方法如下
: 基础组
(A)
：基础饲料
100g/
只
/d+
水；
高脂组
(B)
：高脂饲料
100g/
只
/d(96%
基础饲料
+3%
猪油
+1%
胆固醇
)+
水；

预防组
(C)
：高脂饲料
100g/
只
/d(96%< br>基础饲料
+3%
猪油
+1%
胆固醇
)+
黄酒
20ml/
只
/d
浓缩组
(D)
：高脂饲料
100g/< br>只
/d(96%
基础饲料
+3%
猪油
+1%
胆固醇< br>)+
黄酒浓缩物
16ml/
只
/d

3.2.2.2
喂养方法


各组兔子分笼饲养，饲养温度为
28℃，湿度为
70%
~
80%
，自然光照，自由取
食、饮 水。每天对兔笼进行清扫，消毒。每天记录每只兔子的进食量、饮用液体量及
体重，每只兔子
1
日平均取食量为
100±10g。在进行实验前对其做记号，称体重，
并记录。饲养每 隔
2
周，耳缘静脉取血测定各项血脂指标，取血前空腹
12
小时。

上午
9
：
00
喂养对应饲料
30g/
只，预防组灌 喂黄酒
20ml/
只，浓缩组灌喂黄酒浓
缩物
16ml/
只，灌喂后 再自由饮水。

下午
3
：
00
喂养对应饲料
40g /
只，自由饮水。

晚上
8
：
00
喂养对应饲料< br>30g/
只，自由饮水。

3.2.3
实验方法

武汉工业学院





























9