快速丰胸的方法蛋白质含量的测定(Folin—酚法)

2021年2月23日发(作者：如何消除黑眼圈眼袋)
实验报告

实验名称：
蛋白质含量的测定（
Folin-
酚法）



实验日期：


班级：






















学生姓名
：


研究背景与目的：
蛋白质是生物最重要的基本组成成份之一
,
蛋白质的定量 分析方法的研究
在国际上一直十分活跃，
Folin-
酚法是一种灵敏度极高，可快速 测定蛋白质含量的方法，广
泛地应用于蛋白质含量的测定。

本实验培养掌握使用Folin-
酚法测定蛋白质含量的原理和操作方法，同时
熟练
722
分 光光度计的使用和比色法。

实验原理：
Folin-
试剂是由两部分组成， 甲试剂相当于双缩脲试剂，在碱性条件下，蛋白质
中的肽键与铜离子结合生成络合物。
试剂乙是 磷钨酸和磷钼酸的混合液，
在碱性条件下极不
稳定，易被蛋白质和试剂甲生成的络合物还原，生 成钼蓝和钨蓝混合物而呈蓝色反应。

根据此试剂与蛋白质的反应以及一定条件下，
兰 色深度与蛋白的量成正比，
可用
比色法，
使用分光光度计，
通过对呈现蓝色的 混合物进行浓度测定，
再依据比例计算出蛋白
质含量。

仪器与试剂：
722
分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）













架盘天平













具塞刻度试管
8
支




15ml












移液器














100ul-1000ul
和
1ml-5ml












容量瓶














50ml*1












小烧杯


漏斗



研钵


Folin
酚试剂：试剂甲


试剂乙



250ug/ml
牛血清白蛋白标准原液



材料：
绿豆芽下胚轴

实验步骤：

1
．

标准曲线的绘制

取
6
支
15ml
具塞刻度试管， 编号。如下表所列加入相应试剂。

1
2
3
4
5
6
管号

蛋白质含
量
（
ug/ml
）

加原液量
（
ml
）

加
dH
2
O
量
（
ml
）

步骤一

步骤二

步骤三

0
0
1.0
50
0.2
0.8
100
0.4
0.6
150
0.6
0.4
200
0.8
0.2
250
1.0
0
各加入试剂甲
5ml
，混合后在室温下放置
10
分钟

各加入试剂乙
0.5ml
立即混合均匀（速度要快）
，放置半小时

以不含蛋白质的
1
号试管为对照，与其他
5
支试管内的溶液依次用< br>722
分
光光度计于
650nm
波长下比色，记录各试管内溶液的消光 值。

以消光值为纵坐标，以牛血清白蛋白含量（
ug/ml
）为横坐标，绘 制标准曲线。

2
．

样品测定

（
1
）

称取绿豆芽下胚轴
1g
于研钵中，
匀浆。
转入
50ml
容量瓶中，
定容。
然后过滤，
滤液即 为样品液。