黄芪的最佳搭配-不孕不育专家门诊
豆芽中蛋白质含量的测定
——考马斯亮蓝
G-250
染色法
生科
2012
级
3
班
童雪晨
2012506068
一、前言
蛋白质在细胞和生物体的生命 活动过程中,起着十分重要的作
用。
生物的结构和性状都与蛋白质有关。
蛋白质还参与 基因表达的调
节,以及细胞中氧化还原、
电子传递、神经传递乃至学习和记忆等多
种生 命活动过程。
在细胞和生物体内各种生物化学反应中起催化作用
的酶主要也是蛋白质。
许多重要的激素,
如胰岛素和胸腺激素等也都
是蛋白质。因此,测定蛋白质含量具有重要意义。
二、材料与方法
1
、材料
绿豆芽、黄豆芽
2
、方法
1)
采用考马斯亮蓝
G-250
染色法测定蛋白质含量,
按下表
(
一
)
所示取
7
支试管,依次加入各溶液,反应后立即摇匀,置室 温下放置
5
分钟,然后测各管的
OD
值,以
OD
值为纵坐标 ,浓度值为横坐标
绘制标准曲线。
2)
称取绿豆芽、
黄豆芽下胚轴各
1g
,
放入研钵中,< br>加少量石英
砂和
2ml
水,研成匀浆,转入离心管,再用水分三次冲洗研钵(每 次
4ml
)
,
均转入同一离心管。等重后
3500r/min,离心
15min,
取上清液转
入
25ml
容量瓶,用水定容(样 品提取液)
。
3
) 取
0.5ml
样品提取液于试管中,加入考马斯亮蓝
G-250
染色
液
5ml
,充分混匀,放置
5
分钟,测
OD
值,记录结果, 查曲线,得
蛋白质浓度(
μ
g/ml
)
。
三、结果分析
表(一)制作标准曲线加样表
编号
1
2
3
4
5
6
黄豆芽
绿豆芽
0.5
0.5
0.5
0
0.25
5
X
5
X
5
标准蛋白(
ml
)
0.0
0.1
0.4
0.05
5
0.2
0.3
0.1
5
0.3
0.2
0.15
5
0.4
0.1
0.2
5
水(
ml
)
0.5
O.0
5
浓度(
mg/ml)
染色液(
ml
)
OD
值
0.000
0.066
0.297
0.562
0.825
0.967
0.265
0.187
表(二)标准曲线
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