长春最好的妇科医院25二羟基维生素D3(1

2021年2月23日发(作者：如何治疗尿失禁)
人
1,25
二羟基维生素
D3(1,25-(OH)
2
D3 /DVD/DHVD 3)
酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用

产品编号：
CSB-E05120h
检测范围：
1.56 pg/ml - 100 pg/ml
最低检测限：
0.39 pg/ml
特异性：
本试剂盒可同时检测天然或重 组的人
1,25-(OH)
2
D3
，
且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：
6
个月

预期应用：
ELISA
法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中
1,25-(OH)
2
D3
含量。

说明


1
．试剂盒保存：
-20
℃（较长时间不用时）
；
2-8
℃（频繁使用时）
。

2
．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。


3
．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4
．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造
成任何影响。
概述

1966
年狄路卡等证明维生素
D
是一个前体 激素，其活性型为
1,25-
二羟基维生素
D3(1,25-(OH)2D3)
。
1,25-(OH)
2
D3
的作用原理与经典类固醇激素一样，
涉及遗传信息的表达。
关于存在
1,25-(OH)
2
D3
受体/
结合蛋白的靶组织除传统的小肠、骨和肾脏外，还有胰、脑垂
体、甲状旁腺、乳腺、胎盘 ，甚至还可存在于性腺、子宫、结肠、皮肤成纤维细胞、胸腺和
腮腺等多种组织。近来，发现
1 ,25-(OH)
2
D3
可抑制增生并降低白血病细胞分化，它可将白
血病细 胞分化为单核细胞
/
巨嗜细胞。另外，它还可抑制一系列其它恶性细胞增生，包括胸
腺 、
前列腺和结肠癌细胞。
1,25-(OH)
2
D3
还影响激素分泌 。
除了影响甲状旁腺和垂体腺激素
分泌，还报道有增加胰岛素分泌。此外，它还影响免疫系统， 抑制
T-
细胞增生和细胞分裂
表达。

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗
1,25-(OH)
2
D3
抗体的微孔中依次
加入标本或标准品、生物素化的抗
1,25-(OH)
2
D3
抗体、
HRP
标记的亲和素，经过彻底洗涤
后用底物
TMB显色。
TMB
在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最
终的黄 色。颜色的深浅和样品中的
1,25-(OH)
2
D3
呈正相关。用酶标仪在
450nm
波长下测定
吸光度（
OD
值）
，计算样品浓度。


试剂盒组成及试剂配制


1.

酶联板
(Assay plate )
：一块（
96
孔）
。


2.

标准品
（
Standard
）
：
2
瓶
(
冻干品
)
。

3.

样品稀释液
(Sample Diluent
)
：
1×
20ml/
瓶。

4.

生物素标记抗体稀释液（
Biotin-antibody Diluent
）
：
1×
10ml/
瓶。

5.

辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液

（
HRP- avidin Diluent
）
：
1×
10ml/
瓶。

6.

生物素标记抗体（
Biotin-antibody
）
：
1×
120
μl
/
瓶（
1
：
100< br>）

7.

辣根过氧化物酶标记亲和素（
HRP-avidi n
）
：
1×
120
μl
/
瓶（
1
：
100
）

8.

底物溶液（
TMB Substrate
）
：
1×
10ml/
瓶。


9.

浓洗涤液（
Wash Buffer
）
：
1 ×
20ml/
瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释
25
倍。


10.

终止液（
Stop Solution
）
：
1×
10ml/
瓶（
2N H
2
SO4
）
。