小儿高热惊厥-
一、光合细菌及其作用
l
、光合细菌概述
光合细菌
(Photo Synthetic Bacter ia
简称
PSB)
属细菌的一类,有紫硫菌、绿硫菌、紫色非硫细菌和绿色非硫细菌。
我们主要介绍紫色非硫细菌,
它们是兼性厌氧菌,
属原核生物 ,光能异
养型原核生物门,红色光合细菌纲,红螺菌目,红螺菌科,红假单胞菌属。它们以光和热为能源,主要利用有机物中的碳,同化其它营养元素进行生长繁殖,是高营养、高效能、多用
途的有益 微生物。
光合细菌又称光养细菌,
是能进行光合作用的一群原核生物。
广泛 分布于湖泊、海洋、
土壤
中,是地球上最古老的生物之一。人类对光合细菌的认识始于
19
世纪
30
年代,我国早在
20
世纪
50
年代就 对光合细菌进行了一些基础理论研究,
1987
年
11
月在上海召开的“第一
届光合细菌国际学术会议”
大大推动了我国光合细菌的基础性研究、
应用研究也取得很 大的
进展。
诸多研究结果表明,光合细菌在农业、
环保医药等方面均有较高的应用价值 。现已开
发的光合细菌包括
l
目、
2
亚目、
4
科、
19
属共约
49
种,
其中应用于水产养殖中较多的是红
色无 荡菌科,一般以紫色非硫细菌和紫硫细菌较为普遍。近
20
年来,以小林正泰
(198 1)
、
小川巅夫
(1985)
等人为代表的一批学者首先把它应用于高浓度有 机废水处理,并把它作为优
质钙料和饵料,开展了水产、畜牧养殖等多方面实验。取得了显著成效。此后 ,我国学者亦
于近年对光合细菌在水产上的应用进行了多方面的研究。
2
、光合细菌生物学特性
光合细菌广泛分布于自然界 的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处,主要分布于水生环境中
光线能透射到的缺氧区。光合细菌的适宜 水温为
15
℃—
40
℃,最适水温为
28
℃
-36
℃。它的
细胞干物质中蛋白质含量高达到
60%
以上,
其蛋白质氨基 酸组成比较齐全,
细胞中还含有多
种维生素,尤其是
B
族维生素极为丰富,< br>Vb2
、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高,同时还
含有大量的类胡萝卜素、辅酶
Q
等生理活性物质。因此,光合细菌具有很高的营养价值,
这正是它在水产养殖中作为培水饵 料及作为饲料添加成分物质基础。
3
、光合细菌作用原理
光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用,< br>利用光能进行光合作用,
利用光能同化二
氧化碳,
与绿色植物不同的是,
它们的光合作用是不产氧的。
光合细菌在自身的同化代谢过
程中,
又完成了产氢、固 氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。
这些
独特的生理特性使它们在生态 系统中的地位显得极为重要。
在水产养殖中运用的光合细菌主要是光能异养型红螺菌科
(Rhodospirillaceae)
中的一
些品种,
例如沼泽红假单胞菌
(Rhodop seudanonas palust ris).
在自然界淡、
海水中通常每毫升
含有近百个
PSB
菌,< br>光合细菌的菌体以有机酸、
氨基酸、
氨和醣类等有机物和硫化氢作为供
氧体,< br>通过光合磷酸化获得能量,
在水中光照条件下可直接利用降解有机质和硫化氢并使自
身得 以增殖,
同时净化了水体。
除此之外,
细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚
B
一羟基丁
酸、辅酶
Q
、抗病毒物质和生长促进因子,具有很高的饲料价值,在 养殖业上有广阔的应用
前景。
PSB
在厌氧光照条件下,能利用 低级脂肪酸、多种二羧酸、醇类、糖类、芳香族化
合物等低分子有机物作为光合作用的电子受体,
进行光能异养生长。
在黑暗条件下能利用育
机物作为呼吸基质进行好氧或异养生长。光合细菌 不仅能在厌氧光照下利用光能同化
CO
.
,
而且还能在某些条件下进行固氮作 用和在固氮酶作用下产氢。
另外,
有些菌种在黑暗厌氧条
件下经丙酮酸代谢系统作用也 可产氢。
光合细菌还能利用许多有机物质如有机酸。
醇、
糖类
转化某些有毒物 质如
H2S
和某些芳香族化合物等。
PSB
通过生物转化,可合成无毒、无副 作
用且富含各类营养物质的菌体蛋白,
不仅改善了生态环境,
还为养殖业提供了高质量 的饲料
原料。
PSB
菌体中对动物生长有促进作用的维生素
B12
、 生物素、泛酸、类胡萝卜素、叶绿
素以及与造血、
血红蛋白形成有关的叶酸的含量远高于一般微 生物,
尤其含有人工不能合成
的生物素
D-
异构体。这些物质在动物机体内都 具有显著生理活性在水产养殖中,养殖池按
水中溶解氧含量的大小由表层向底部可分为好氧区和厌氧区。
表层生物繁殖旺盛,
水质一般
较好,
底层则积累了鱼虾的排泄物和未消耗尽的 食物残料,
有机质丰富,
造成微生物的大量
繁殖,
消耗了水中大量的氧气,< br>导致地底层形成无氧环境,硫酸盐还原菌大量繁殖,产生对
鱼虾有毒害作用的硫化氢、
酸 性物质等。
养殖地底层的这种环境正好是适于光合细菌生存的
条件一是具有厌氧条件,
二是光线通过上面覆盖的有氧水层这个光线过滤器,
使光合细菌可
以吸收到适宜生长的
450-550
p
Ⅲ波长光。光合细菌利用池底的鱼虾排泄物、食物残料以及
有毒有 害的硫化氢、酸性物质作为基质大量繁殖,提高水体中溶解氧含量,调节
pH
,并使
氨 氮。
亚硝酸态氮、
硝酸态氮含量降低,
池底淤泥蓄积量减少,有益于藻类和微型生物数 量
的增加,使水体得以净化。
PSB
可进行光合成、有氧呼吸、固氮、固碳等生理机能 ,且富含
蛋白质、维生素、促生长因子、免疫因子等蕾养成分,在功能上可与抗生素相媲美,并且更具有安全性,
是生物工程具有前景的研究领域之一。
光合细菌制剂还具有独特的抗病、促生
长功能,大大提高了生产性能,
在应用方面显示了越来越巨大的潜力。
其它在 净化水质、鱼
虾养殖、畜禽饲养、有机肥料及新能源的开发方面有着广阔的应用前景。
二、光合细菌培养条件
1
、营养条件
光合细菌细胞体构成的元素主要有:碳、氢、氧、 氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和一些微量
元素等,它们也是所有生物细胞构成的主要物质.一般情况下, 细胞鲜重:水占
80%-90%
、
无机盐
1%-1.5%
、蛋白质< br>7%-10%
、脂肪
1%-2%
、糖类和其它有机物
I%-1.5%< br>。其中干细胞含
碳
45%-55%
,氢
5%-
10%
、氧
20-30%
、氮
5%-13%
、磷
3%-5%
、其 它矿物元素
3%-5%o
光合
细菌的细胞壁具有半透性,
能选择性地让一些营 养元素按一定比例进入,
在酶的作用下合成
自己的细胞组织和裂变的新个体。
营养元素的全面和搭配的合理,
是营养条件的关键。根据这一要求,选用多种无基原料,科
学 配方,
经特殊加工而成的。
光合细菌培养基一,
基本符合光合菌的生繁殖所需的营养要 求,
无毒副作用,使用安全;
固状结晶体便于包装和运输,而且有
2
年的保质 期。用其生产菌液
每毫升含有
30-50
亿个活体,质量明显优于市场出售的同类产品 。
光合细菌培养基,
是光合细菌生长繁殖所需各种营养元素的组合体。
每种 原料都能得以充分
利用,
最大限度地生产高浓度的菌液,
这无论是对于用户、
经销商还是厂家都有很大的益处,
对在工业和农业中的推广和普吸将产生深远的影响。
2
、环境条件
有了营养全面的 光合细菌培养基,只是给光合细菌提供了“食物”
,还需要有适宜光合细菌
生长的环境条件,才 能培养出优质的菌液,环境条件具体有以下几个方面:
< br>(l)
培养介质:
含菌量较低的清洁淡水、
海水或加食盐的淡水。
从经 济、
实用的角度考虑,
地下水含菌量低,
为最佳水源;
清洁的地表水也可使用 :
含氯量较高的自来水应敞口放置两
三天后使用;蒸馏水及纯净水固然很好,但是成本太高。< br>
(2)
酸碱度:
(
pH
)值:
7.5-8.5
最佳(适应范围
6-10
)
。
(3)
水硬度
:
PH
值中性时
10
度以下, 即调节
PH
值至
8
左右时,培养介质中的乳白色沉淀物
不宜过多。< br>
(4)
温度:
25
℃< br>-34
℃最佳
(
适应范围
15
℃
-40
℃
)
。
(5)
光照:
3000LX-4000LX
最佳,即每
25
千克菌液需要
60
瓦左右的电灯光照强度,当然
太阳光最好且无需成本。
(6)
透气性:密闭培养效果最好。
(7)
容器:透明的容器或透明塑料袋。大规模培养可用土池、水泥池等,菌液深度
30
厘米以
下为佳。
3
、培养工具的消毒方法
1
.加热消毒法:利用高温杀死微生物的方法。
(
1
)直 接灼烧:此法可直接把微生物烧死,灭菌彻底,但只适用于小型金属或玻璃工具的
消毒。
(
2
)煮沸消毒:一般煮沸
5
~
10
分钟,适用于小型容器、工具的消毒。
(
3
)烘干箱消毒:亦称为恒温干燥箱消毒法。
2
.化学药品消毒法:适用在批量培养中,大型容器、工具、玻璃钢水槽和水泥池中。
(
1
)酒精:浓度为
70
%的酒精常用于中、 小型容器的消毒。用纱布蘸酒精在容器、工
具的表面涂抹,
10
分钟后,用消毒水冲洗 两次即可。
(
2
)高锰酸钾:按
300ppm
配成高锰酸 钾溶液,把洗刷洁净的容器、工具放在溶液中浸泡
5
分钟,取出,再用消毒水冲洗
2< br>次~
3
次即可。
三、光合细菌的培育方法
采取直接购进光合细菌培养基,
按照培育方法加入菌种和水,
即可在
3-5< br>天时间培养出大量
的合格光合细菌菌液,产品符合国家相关标准(每毫升含光合细菌
30
亿以上)
。
自行培育光合细菌的方法非常简单,
因而适合用户在普 通家庭条件下进行生产培育。
培育光
合细菌主要注意应满足适宜的温度和光照,
一般采 取室外培育或室内培育。
由于冬季温度较
低,出太阳的时候较少,
使用光合细菌也相对 较少,而且室内培育需要保温和补光,增加了
培育成本,
所以温度低的季节一般不进行培育,< br>若低温季节确需使用光合细菌,
可以在温度
较好的季节增加培育量,
保存光合细 菌以各使用。
所以培育光合细菌普遍采用室外光培育方
法。
l
、室外阳光培育光合细菌
首次培育光合细菌的量,
主要看我们的菌种有多少,
若我们有足够的菌种,
则首次培育即可
进行大批量 培育,
但如果我们的菌种数量较少或我们的使用量本身不大,
则可以使用塑料瓶
等小型 容器进行小批量的培育。
(
1)
少量培育光合细菌方法
首次培育由于光合细菌菌种数量不多,
或是使用光合细菌的量不大,
可以先少量培育生产或先行扩种,
以后再大批量生产。
一袋光合细菌培养基可生产
100
公斤光 合细菌,
生产时光合
菌菌种加入量不低于培养量的
20%
、食盐加入量为培养 量的
1.8%
。
以下以培育生产
100
公斤光合细菌为例介绍整个培育方法。
培育
100
公斤光合细菌所需原料:
“鳝宝”
光合细菌培养基一袋
(440
克)
、
光合细菌菌种
20
公斤、食盐
1.8公斤、清洁水
80
公斤。这里需要注意的是水为不含消毒剂、杀菌剂的清洁
水源, 一般采用地下水提前一天曝气即可。如果没有地下水而采用自来水,需提前
2-3
天盛
入容器进行曝气。
培育容器:
可用
20
个容积为
5
公斤的透明塑料桶
(一般装食用油的油桶,
每桶可装
5
公斤,
清洗 干净即可)
,或者采用
7-8
条鱼苗袋。也可采用透明的装纯净水的水桶或矿泉水瓶子 。
培育生产时将一袋光合菌基、
20
公斤菌种、
1.8
公 斤食盐及
80
公斤水充分混合均匀,然后
分装到塑料桶或鱼苗袋中密封,
置于 室外阳光下培育即可。
具体做法为:
先取少量水将光合
菌基一袋溶化后倒入一能盛装< br>100
公斤的容器,再取少量水将
1.8
公斤食盐溶化倒入其中,
然后 加入
20
公斤光合细菌菌种,最后加入清洁水直至整个培养液达
1 00
公斤 ,加入过释不
断搅拌,让原料充分混合均匀,配好后将培养液分装到塑料桶或鱼苗袋密封培育。
将塑料桶或鱼苗袋放到室外阳光下培育,如果阳光过于强烈以致室外温度超过
35
℃时 ,应
适当遮阳以降温,培育过程中每天摇动培育容器
1-2
次,晚上不作任何处理。经 光照培育,
菌液颜色会变成粉红色,
随着培育时间的加长,
其颜色会逐步转变成紫红色 ,
这个过程一般
需
7
天左右。
产品检测:培育完成的光合 细菌是否合格从颜色、气味、
PH
值三个方面检测。合格的产品
颜色应该是紫红色,开 盖能闻到一股特殊的臭味,用
PH
试纸测试其
PH
值应在
8
以上。
光亨细菌的培育时间与培育时的天气状况相关,
如果天气较好阳光充足,一般
7
天左右即可
培育完成,
如果遇阴天或气温偏低培育时间会延长。< br>培育合格的光合细菌即可使用,
也可作
菌种继续扩大培育。
(2)
批量光合细菌培育方法
通过陆续培育获得了一定量的菌种后,即可根据自己的使用量进行批量生产培育。以下
以生产
1000
公斤光合细菌为例介绍整个培育方法。
培育
1000
公斤光合细菌所需原料:
“鳝宝”光合细菌培养基
10
袋(
4400
克)
、光合细菌菌
种
200
公斤、食盐
18公斤、清洁水
800
会斤。这里需要注意的是水为不含消毒剂、杀菌剂
的清洁水源 ,一般采用地下水提前一天曝气即可。如果没有地下水而采用自来水,需提前
2-3
天曝气。< br>
培育容器:
批量培育光合细菌一般采用塑料袋
(青贮饲料的筒状塑料袋)较为 经济实用,剪
取一段
6
米左右长度的塑料袋备用。
批量培育应选择地势平坦,
阳光充足的地方。
地面最好
是平整光滑的水泥地面,
一定要光滑以防弄破塑料 袋,
如果地面粗糙,
应先用尼龙袋等垫好
再放培育塑料袋。
培育生 产时将塑料袋一端用绳子捆牢,用一塑料桶盛装清洁水
30-50
公斤,往桶中加入
1 0
袋光合菌基和
18
公斤食盐充分搅拌溶化,然后将桶中溶液倒入塑料袋,倒入溶液的 时候同
时加入清洁水和光合菌种,
光合菌种量为
200
公斤,
加入水 的量为
800
公斤,
完成后将袋口
捆牢,
然后将培育袋两端分别提几 下,让培养液混合均匀,操作时注意掌握分寸,
不要弄破
塑料袋为宜。
培育 袋在室外阳光下培育,如果阳光过于强烈以致室外温度超过
35
℃时,应适当遮阳以降
温,培育过程中每天摇动培育容器
1-2
次,晚上不作任何处理。经光照培育,菌液颜色会变< br>成粉红色,
随着培育时间的加长,
其颜色会逐步转变成紫红色,
这个过程一般需 要
7
天左右。
(3)
培育过程中的注意事项
a:
培育时间:光合细菌的培育时间一般为
7
天左右,但如果遇到光照少或 温度偏低,
培育时间会延长。
很多用户反应首次培育时温度和光照都较好,
但培育7
天左右都还不合格,
这主要是光合细菌还没有适应当地的水质,
建议首次培育时 可加大光合细菌菌种比例就可解
决,培育合格后的菌液再生产时就正常了。
b:
培育的菌液颜色偏淡:这主要是由于菌神加入量过少、 菌种老化、杂菌过多、光照
不足、温度过高或过低、水的硬度过高,将其调节正常即可解决。
c:
培育的菌液颜色变黑:
主要是气温 较高的季节,
刚培育好的菌液因长时间失去光照。
应及时将其移到阳光下补光,基本可以变红。
d
:
培育的菌液颜 色变绿:
可能是菌液中绿硫菌大量繁殖所致,
建议培育时容器一定要
清洗干净,更换水 源采用新的菌种再行培育。
2
、室内灯光培育光合细菌
光合细菌 主要采用自然光照培育,操作简便,
生产成本低,较容易大批量生产,所以建议大
家根据自己的 用量,
在温度较好、光照较好的季节大量生产,
以供满足生产需要。
尽量不在
温度较低、
光照较差的季节生产,
如早春、
晚秋和冬季,
因在这些时候生产需 要增温和补光,
增加培育设施成本和能源成本,
从而使培育光合细菌成本增加,
进行大 批量生产操作较为困
难。
若在早春、
晚秋和冬季温度较低时确需培育光合细 菌,
就应采取增温补光方式进行培育,
与
自然培育不同的是需要准备增温补光装置和保 温设施。
增温补光装置:一般使用白炽灯泡,灯泡功率根据生产量及当时气温而定,一般使用
40w-200w
不等,保证生产时温度达
20
℃以上
40
℃以下为宜。
保温设施:培育保温装置一般采用大纸箱或自制木箱等,箱的大小据生产量而定。
培 育容器:一般采用容积
5
公斤的透明塑料瓶(清洗衣干净的色拉油瓶即可)
,便于放入 纸
箱或木箱中进行培育。
先按生产比例在一塑料桶中加入清洁水、
光合细菌 培养基、
食盐和光合菌种,
原料要求及配
制方法参考室外阳光培育光合细菌。
加入原料后充分搅拌配制成培养液,
然后将培养液装入
塑料瓶,再将塑料瓶放入纸箱,
在纸箱顶部吊一个白炽灯泡,
然后盖好纸箱进行培育。
培育
中注意观察箱内情况,若箱内温度过高或过低应及时更换灯泡,
适当调节灯泡高度,
以防止
灯泡过低烫坏 光合细菌,
每天开箱将塑料瓶提出摇晃后再放入,
并调换塑料瓶位置
(即将中
间部分调到边上)
,以保证菌液受光均匀。
经常检查灯泡情况,不要靠箱
l
太近,以防止火灾发生。—般
7
天左右检查培育光合菌的颜
色、
PH
值及臭味,培育合格即可使用,若指标未达到应继续培育。
四、培养管理
光合细菌的培养日常管理包括测试、观察和分析处理等三个方面。
1.
测试
(
1
)搅拌:光合细菌培养过程中必须搅拌或充 气,其作用是帮助沉淀的光合细菌上浮获得
光照,保持菌细胞的良好生长,每天至少摇动
3次,定时进行。
(
2
)调节光照度:培养光合细菌需要连续进行照明, 白天可利用太阳光源培养,晚间则需
人工光源照明,
或完全利用人工光源培养。
人工光 源一般使用碘钨灯或白炽灯泡。
一般培养
光照强度控制在
2000lx
~5000lx
之间。
(
3
)调节温度:在光合细菌的培养过程 中,一般在
23
℃~
39
℃均能正常生长繁殖,但如果
温度过低,< br>可以把培养容器放在箱子里,
利用白炽灯炮散发的热提高箱内温度,
并根据需要
调整箱子的密封程度达到调节温度的目的。
(
4
)酸碱度的测定和调整:为 了延长光合细菌的指数生长期,提高培养基的利用率和单位
水体的产量,测定和调整
pH
值是一项重要措施。一般采用加酸的办法降低菌液的酸碱度,
醋酸、乳酸均可使用,而最常用的是醋酸 。在日常的管理工作中,必须每天测定菌液的
pH
值,当
pH
值上升超出最适 范围,即加酸调整。
(
5
)测定光密度(
O.D.
)值: 光密度值和细胞干重之间是近似线性关系,这种相关关系常
用来测定培养物的浓度。
首先根据测 定的数据画出相关的标准曲线图,
然后测定菌液的光密
度值,
即可根据标准曲线大致估 算出菌细胞的浓度。
光密度值常用分光光度计测定。
在日常
管理工作中,通过测定菌液 的光密度,可以了解光合细菌的生长繁殖情况。
2.
生长情况 的观察和检查:在培养过程中,可以通过观察菌液的颜色及其变化来了解光
合细菌生长繁殖的大致情况。
菌液的颜色是否正常,
接种后颜色是否由浅迅速变深,
均反映
光合细菌生长是 否正常以及繁殖速度的快慢。
此外,
通过测定菌液的光密度值及其变化情况,
能更准确 地了解菌体的生长繁殖情况。接种后,光密度值迅速加大,表示生长正常、繁殖迅
速。如果光密度值不增 加以及菌液颜色不正常、出现菌体附壁等现象,说明培养效果不良。
必要时还可以通过显微镜检查,了解 细菌生长情况。
3.
问题的分析和处理:通过日常管理、检测 、观察和检查,了解光合细菌的生长情况,
就可以结合当时环境条件的变化进行分析,
找出影响 光合细菌正常生长的原因,
采取相应的
对策。
影响光合细菌生长的原因很多,
从内因看菌种本身是否优良,
即接种的母种的质量是
小儿高热惊厥-
小儿高热惊厥-
小儿高热惊厥-
小儿高热惊厥-
小儿高热惊厥-
小儿高热惊厥-
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