杨文杰提取方法

2021年2月13日发(作者：治疗乙肝)
鼠李素
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β
-D-
芸香糖的提取分离方法

技术领域

本发明涉及天然资源深加工领域，更具体的涉及一种从金雀花花蕾中提取分
离鼠李素
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β
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芸香糖的方法。

背景技术

金雀花（
Caraganasinica
）为豆科锦鸡儿 属（
Caragana
）落叶灌木，别名锦鸡
儿、黄雀花、阳雀花、生血草。金雀花分 布于我国长江流域及华北地区的丘陵、
山区的向阳坡地，我国产
40
余种，资源较为丰 富。在云南，冬尽春来，金雀花遍
开山野。其貌不出众，香气独具。人们将它与鸡蛋、腊肉、火腿和鲜肉 等爆炒，
或者与肉片和豆腐一起煮成三鲜汤，香甜可口。民谚曰：
“吃了金雀花，眼睛不
眨巴”。张小玲等人（
2004
）和樊建等人（
2006
）报道金雀花花蕾 具有丰富的营
养价值，
它的蛋白质、
脂肪和碳水化合物含量高于几种豆科植物的蔬菜< br>（如黄豆
芽、绿豆芽、扁豆、刚豆、菜豆），其微量元素如
Fe
、
Zn
、
Se
和
Vc
的含量高于
人们常见的蔬菜，另外它含有17
种人体必须的氨基酸。

金雀花一身都是宝，其根部具有较好的功效，《植物 各实图考》和《上海常
用中草药》记载金雀花根滋补强壮，活血调经，祛风利湿。用于高血压病，头昏< br>头晕，耳鸣眼花，体弱乏力，月经不调，白带，乳汁不足，风湿关节痛，跌打损
伤。胡昌奇等人从 根部分离得到甾醇类、黄酮类、聚苯二烯类和苷类等化合物，
报道了一系列新颖的聚苯二烯类化合物及它 们抗炎和提高免疫力活性，
同时他们
还研究了金雀花根部提取物的相关活性，
发现它可 降低实验家兔的全血粘度、
全
血还原粘度、血浆粘度，降低纤维蛋白原含量，缩短血小板电泳时 间，抑制血小
板粘附，改善血液的浓、粘、凝和聚状态，抑制蛋白激酶
C
活性及癌细胞 生长活
性，还具有较强刺激成骨细胞增殖的活性。

《上海常用中草药》记载金雀花花 蕾具有活血祛风，止咳，强壮的功效，能
用来治疗头晕头痛、耳鸣眼花、肺虚久咳、小儿疳积等疾病。在 云南，金雀花花
蕾的资源开发情况不容乐观，
仅有少量花蕾在其花期被采摘作为菜肴食用或被作
为中药原料，
而大量花或落地后无人处理，
或枯萎后自然失去效用，
导致这种 天
然花卉资源白白浪费。
太等人
（
2010
）
对云南大理产 的金雀花花蕾化学成分和相
关活性进行了研究，从中分离得到
23
个化合物，包括10
个黄酮类化合物，
8
个三
萜类化合物，
2
个甾体类 化合物及
3
个酚酸类化合物，
并发现金雀花具有较强的抗
氧化活性，通过金雀 花
HPLC
含量测定，发现异鼠李素
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芸 香糖在金雀花
中的含量高达
3.94 mg/g
。
1999
年
Hideyuki
等人报道了异鼠李素
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芸香糖 具
有抗氧化、抗肿瘤、抑制
EB
病毒早期抗原活性等多种生物活性。
200 9
年阿吉艾
克拜尔
·
艾萨通过“骆驼刺质量标准”的起草工作，发现异鼠李素
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芸香
糖苷是骆驼刺的主要化学成分和标志性成分 ，初步的药理实验研究表明鼠李素
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芸香糖苷是骆驼刺的主 要有效成分之一，
其自身可通过抑制
α
-
淀粉酶降
低血糖，并能抑制 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。

基于以上，
提取异鼠李素
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芸香糖具有较为实际意义。
然而迄今为止，
对异鼠李素
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芸香糖提取方法的报道较少，至今仅有李坤平等人（
201 1
）
采用大孔吸附树脂富集布渣叶中的总黄酮，用
Sephadex
LH-20
凝胶柱从总黄酮
中分离制备纯度大于
98%
的异鼠李素
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芸香糖苷对照品，方法简便有效，
但该方法关键 步骤中利用凝胶材料进行纯化，
而凝胶存在着市场价格较高，
处理
量较小的问题，从而 导致异鼠李素
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芸香糖的产量低，不易扩大化生产。

发明内容

为了开发云南金雀花资源，
旨在克服之前提取方法中存在的技 术问题，
本发
明提供了一种提取率高，设备要求低，适合产业化的金雀花花蕾中异鼠李
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芸香糖的提取分离方法。

本发明的目的是通过以下具体技术方案实现的：

1
、粉碎和提取

取干燥的金雀花花蕾，
粉碎至粒径为
1.0~2.0mm
，
加入金雀 花花蕾质量
10~15
倍的乙醇溶液，回流提取两次，每次
1~1.5
小时， 提取液趁热抽提浓缩，得提取
物粗样；

2
、萃取、分离和纯化
< br>在提取物粗样中添加提取物粗样质量
3~5
倍的热水溶解，
溶解液先用石油醚萃
取
2~3
次，弃石油醚萃取相，
然后用乙酸乙酯萃取
2~3
次，弃乙酸乙酯萃取相，最
后用正丁醇萃取
2~3
次，合并正丁醇萃取相浓缩至干，浓 缩物用浓缩物质量
1~2
倍的热水溶解后采用聚酰胺酚树脂柱
（
CXSZ-6 0
）
吸附，
富集异鼠李素
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芸香 糖，
用质量百分比浓度为
0%
、
25%
的乙醇水溶液依次梯度洗脱，
取
25%
乙醇
洗脱部分浓缩至无醇味，调节浓缩液
pH
为< br>2~3
，冷却静置
10~12
小时，过滤，滤
渣即为纯度
>8 0%
的异鼠李素
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芸香糖。

其中所述提取用的乙醇溶液为质量百分比浓度为
70~80%
的水溶液。

所述聚酰胺酚树脂与正丁醇浓缩物的质量比为
10~15:1
。

所述热水温度为
40~5
0
℃。

采用质量百分比浓度为< br>10%
的
HCl
溶液调
pH
值。

将所得滤 渣置于硅胶柱进行分离，洗脱溶剂为氯仿：甲醇（此二元溶剂的体
积比由
6:1
逐渐变 动为
3:1
），最终分离并鉴定沉淀物中的其他两个化合物，分别
是化合物
2
：芦丁；化合物
3
：异槲皮苷；化合物
1
、
2
、< br>3
的结构式如下：

化合物
1
结构式如下：

OCH
3
OH
HO
O
O
O
OH
O
O
OH
OH
OH
O
OH
OH
OH


化合物
2
结构式如下：

OH
OH
HO
O
O
O
OH
O
O
OH
OH
OH< br>O
OH
OH
OH


化合物
3
结构式如下：

OH
OH
HO
O
OH
O
OH
O
O
OH
OH
OH
。

本发明具有以下优点和技术效果：

1
、金雀花花蕾提取物经过萃 取后，异鼠李素
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β
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芸香糖富集在正丁醇部
分，通过 聚酰胺酚树脂选择性吸附黄酮类等化合物，通过
25%
乙醇溶液洗脱，