痔疮动物模型制作方法的研究

2021年2月6日发(作者：低周波治疗器)
痔疮动物模型制作方法的研究

<
文献综述
>


贺

鹏

程


（商丘师范学院

生命科学系
080911-2
班
080911011
）


摘要：痔疮是临床最常见的疾病之一，痔的发生 ，主要是由于静脉壁的薄弱，失去了正常
弹性，临床表现为局部炎症、肿痛、便血、脱出等症状。随着痔 疮药物的深入研究，动物
模型有很好发展和应用，本文分别从痔疮的疼痛、出血、肿胀、炎症等几个方面 综述了痔
疮动物模型制作方法研究进展，以供参考选用。


关键词：痔疮、模型、小鼠、肿胀、炎症、醋酸、感染



一、关于痔疮


痔疮是临床最常见的疾病之一，
痔的发生，< br>主要是由于静脉壁的薄弱，
失去了正常弹性，
兼因饮食不节，燥热内生，下迫大肠以及久 坐、负重、远行等，致使血行不畅，血流淤积，
结滞不散而成。临床表现为局部炎症、肿痛、便血、脱出 等症状
[1]
。

痔疮分为内痔、
外痔及混合痔三种类型。
目前，
肛垫滑动学说已被医学专家们接受。
即
痔的发生，主要是由于静脉壁的薄弱，失 去了正常弹性，兼因饮食不节，燥热内生，下迫大
肠以及久坐、负重、远行等，致使血行不畅，血流瘀积 ，结滞不散而成。

随着对
“痔是肛垫的病理性肥大和移位”
的新认识，越来越多的学者赞同痔的治疗原则

是解除症状，而不是消除痔体。因此，痔的现代概念给痔非手术疗法展现了新的运用前景。
< br>祖国医学认为，痔病的发生多由饮食不节、风湿热邪下迫大肠，热毒壅结，血热肠燥，结聚
不散而 成。

近来创建的一批实用性痔疮动物模型具有较多优点，
本文简要介绍制备原理和方 法，
以
供参考选用。



二、大鼠巴豆油肛门肿胀模型

巴豆油是一种常用的致炎剂，巴豆油混合液用
1
份蒸馏水、
4
份吡啶、
5
份乙醚和
1O
份
6
％

巴豆油乙醚溶液配制。制作模型时把浸吸
0
．
16
mL
巴豆油混合液的棉球插入用乙醚
浅麻醉的
6
周龄大鼠肛门内10 S
，
6 h
后放血处死，检测指标：①

直肠肛门湿重，切取从
肛门皮毛边缘起
13
—
15 mm
长的直肠肛门部称湿重，并置于
8O
℃

干热
16 h
后称取干重，
计算直肠肛门系数作为炎症程度指标；②血管通透性，动物处死前
30 min
静脉注射
1
％伊
文氏兰生理盐水
20 mg
／
kg
，测定直肠肛门组织中的伊文氏兰含量，计算占注入量的％

，
作为评价血管通透性指标。③

组织学观察
[2]
。

该模型对巴豆油混合液用量、
棉球插 入肛门留置时间、
大鼠周龄等致炎条件及致炎后不
同时间的指标测定进行动态观察，结果表明， 巴豆油涂敷后直线上升的炎症高峰在
8
h
，直
肠肛门湿重与干重呈直线增加，此后至
24 h
增加减缓。巴 豆油涂敷前
(
即无处理对照
)
的平
均湿重为
140 nag
，涂敷
6 h
、
24
h
后分别增加至
340 mg
、
476 mg
，
24
h
达最高值。涂敷
6
h
后的湿重为最高时的
6o
％

。探讨巴豆油
0
．
1
mL
或
0
．
16
mL
的最适起炎时间，用巴豆油
0
．
1 mL
时，随插入时间延长，直肠肛门干、湿重增加，插入
60
s
重量达最高；用
0
．
16
mL
时，插
入
10
s
引起的干湿重达最大值，延长时间反而下降。比较
0
．
1
mL
和
0
．
16
mL
两种用量时
得到的最高重量，与用
0
．
1 mL
与
60 s
相比，用
0
．
16 mL
与
10 s
的刺激条件可达到最高
值，故以
10 s
为最适刺激时间
[3]
。比较巴豆油
0
．
10 0
．
19 mL
的致炎效果，以
0
．
16 mL

1
最大，
0
．
10 mL
与
0
．
13mL
用量时虽有明显致炎效果，但由于巴豆油量小在棉球内不能均
匀分布而使炎症部位不 均。用
0
．
19 mL
时对直肠组织有明显损伤，出现肌层暴露血栓形成组织黑色变性，直肠肛门重量低于
0
．
16
mL
组。所以
0
．
16
mL
是适宜的致炎用量， 涂敷巴
豆油部位分布均匀，个体间差异较小。比较不同鼠龄的致炎效果，发现
4
、6
、
8
周龄大鼠的
直肠肛门明显肿胀，湿重分别为对照组的
1< br>．
9
倍、
2
．
5
倍、
2
．
5
倍，表明均有炎症，但
4
周龄鼠病变过于严重，
实验以
6
周龄鼠为宜。
用血管通透性试验观察该模型的药物反应，
表
明巴豆油所致血管通透性亢 进可由预先给苯海拉明或美西麦角而阻滞，以巴豆油致炎后
1
h
的作用明显，而
8
h
后的抑制效果则显著减弱。戊酸二氟可龙的 预防和治疗效果均强于己酸
氢化可的松和氢化可的松
[4]
。直肠组织学观察表明，巴 豆油
0
．
16
mL
处理
6
h
后直肠黏 膜
组织肿胀明显，黏膜下浆膜周围亦显著肿胀，正常黏膜皱壁消失，黏膜上皮细胞活性降低，
粘 模下血管扩张，
并有白细胞与纤维蛋白浸润。
作者认为巴豆油痔模型复制方法简易，
在 短
时间内可以复制大量动物，
病变重复性好，
程度适中，
作为病变观察指标的 直肠肛门重量变
化显著，病变能在短时间内形成且持续较长时间，组织学观察变化明显
[5]
。

另有角叉菜胶致大鼠肛门肿胀法，大鼠麻醉后肛门内直肠黏膜下浆肌层注入
1
％

角叉
菜胶
0
．
1 mL
，分别于
6
、
24
、
48
、
72
、
96< br>、
120 h
用圆规测量整个肛门周围组织肿胀的直
径，
取长短两直径 的均值。
作为所测量肿胀程度的指标。
可在致炎前或致炎后给药观察药物
效果。



三、醋酸致肛门溃疡模型


3
．
1
家兔法

新西兰兔在乙醚浅麻下向直肠距肛口内
0
．
5
cm
处4
或
8
点位黏膜下注射
36
％醋酸
20
腐< br>蚀直肠，造成溃疡面。用千分卡尺测量溃疡面最大直径，并计算为面积
mm2
，作为药前 值。
药后可每天或隔天测定
1
次，
以溃疡面直径和愈合天数作为对兔直肠黏膜 溃疡的治疗作用指
标，对照组的愈合期约为
12-16d
。



3
．
2
大鼠法

用内径为
6
inln
的打孔器制成大小相等的滤纸片，经
99
．
0
％

醋酸溶液充分浸泡后放
到肛门周围，使滤纸片紧密接触肛周皮肤及黏膜，每次用滤纸
1
片，每只鼠于
0
．
5
min
、
1
mi n
时换
1
次滤纸片。
第
2
天观察溃疡程度，
按体重 及溃疡程度随机分组给药。
于给药第
3
、
5
、
7
、
9
、
11
天观察溃疡愈合情况，评定溃疡程度
[6]
。评定 标准：见有溃疡渗液
1
分；见
少许溃疡渗液
2
分；
有焦痂，
基本愈合
3
分；
完全愈合
4
分
J
。
另有报告给大鼠肛门外周注
射冰醋酸
0
．
05
mL
／只，
24
h
后选取溃疡面
8
—
10
nllll
的大鼠，随机分组涂药约
0
．
1
g
，
3
次／
d
，
观察溃疡面红肿、
组织炎性渗出及溃疡面的愈合时间
(以伤口结痂脱落为痊愈
)[7]
。



3
．
3
小鼠法

向小鼠肛门内推入
20
％醋酸
0
．
05
mL
／只，保持
1
min
后用棉签沾出。此后随机分组肛
门内给药，给药
6
d
后取直肠制片。组织学检查结果表明：阴性对照组有大量单柱状上皮细
胞脱落，
黏膜可见脓灶 形成，
腺体杯状细胞减少，
腺体间大量嗜中性白细胞浸润及大量或成
片溃疡形成。马应龙痔疮膏组未见脓灶，
腺体问偶见嗜中性白细胞浸润，
细胞间质水肿，
杯状细胞减少，
溃疡少或未见。
中剂量及大剂量组，
黏膜可见糜烂、
脓灶形 成，
杯状细胞减少，
大量嗜中性白细胞浸润，细胞间质脱落，多见溃疡形成及单层柱状上皮细胞 脱落。



四、家兔肛门细菌性溃疡模型


2