马钱子散胶原纤维染色

2021年2月6日发(作者：药物中毒)
天津天士力集团研究院药理所





































文件编号：

胶原纤维染色

胶原纤维是人体中的结缔组 织的主要成分，
分布在全身的各个部位，
组成胶原纤维的
主要成分是胶原蛋白。新鲜时 呈白色，故一般称为白色纤维。在
HE
染色中被染为淡红色。它的
性质是具有一定韧性 及紧固性，
因此它能够抵抗一定的牵拉力而不至于撕裂或拉断它们常聚集成
粗细不等的束，呈波浪状。
胶原纤维由许多根纤细的胶原纤维组成。
在电镜下胶原原纤维又由更
细 的原纤维构成。根据
Kramen
和
Little
所进行的电镜研究证实，胶 原纤维是特有的，具有横纹
的（重复期为
650
）原纤维。当有病变时这些纤维可发生 变形，常出现的就是胶原纤维的坏死，
胶原纤维在稀酸里可发生膨胀，
变成胶样物。
它 们能被酸性染料染成深浅不一的粉红色，
这些往
往跟淀粉样物难以区别。
由于它们的屈 光率较弱，
因而在光学显微镜下，很难与纤维区别。
胶原
纤维的分子长度约为
3000
，直径约为
14
，分子量为
300000
。

一、胶原纤维的组成：

1
、细胞内合成前胶原蛋白分子，成纤维细胞摄取合 成蛋白质所需的氨基酸，包括脯氨酸、赖氨
酸和甘氨酸。在粗面内质网的核糖体上按照特定的胶厚
mRNA
的碱基序列，合成前
α
-
多肽链。
后者边合成边进入粗面 内质网腔中，
并在羟化酶的作用下，
将肽链中的脯氨酸和赖氨酸羟化经羟
化后，三条前
α
-
多肽链互相缠绕成绳索状的前胶原蛋白分子。溶解状态的前胶原蛋白分子，两端未缠绕，
呈球状构形，
在粗面内质网腔风或转移到高尔基复合体内加入糖基后，
分泌到细胞外。

2
、厚胶原蛋白分子的细胞外聚合。细胞外的前胶原蛋白分子，在肽 内切酶的作用下，切去分子
两端球状构表部分，形成厚胶原蛋白分子，粗约
1.5nm
，长约
300nm
，厚胶原蛋白分子平行排列
聚合成胶原纤维。聚合时，相互平的相邻 分子错开
1/4
分子长度，同一排的分子，菌尾相对并保
持一定距离，聚合成束，于是 形成具有
64nm
周期横纹的胶原原纤维。聚合时，分子内，分子间
的化学基因进行缩 合，
交联，
增加厚纤维的稳固性。
若干胶原原纤维经糖蛋白粘合成粗细子等的
胶原纤维。中性自溶型胶原（
neutrla-soluble collagen
）
→
醛糖、缩醛类脂
/
肉豆蔻酸、类脂
→
不溶
型胶原（
insoluble collagen
）

二、胶原纤维的显示：
胶原纤维在
HE
染色法被染成粉红色，除此之外，它还可以用一些阴离子的染料来进行染色 ，如
用淡绿可把它们染为绿色，用甲苯胺蓝可将其染为蓝色，
在网状纤维染色中，如不加以处理 ，
它
又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有
Van
和
Malla ry
等方法。在免疫细胞化
学染色中，胶原纤维由于含的负电荷过多，常导致某些非特异性的染 色，应特别注意。

（一）
.Van Gieson
（
V.G
）染色法


1
天津天士力集团研究院药理所





































文件编号：

I.
试剂的配制：

weigert
氏苏木素

A
液：

苏木素

1g
（
haematoxylin
）


无水酒精

100ml
B
液：

30%
三氯化铁

4ml
（
ferric chloride
）


蒸馏水

95ml

盐酸

1ml
II
．
Van Gieson
氏液

A
液：

酸性品红

1g
（
acid fuchsin
）


蒸馏水

100ml
B
液：

苦味酸饱和水溶液，（
1.22%
）（
picric acid
）

注意事项：

1
、
Weigert< br>氏苏木素临用前取
A
液和
B
液等份混合，几个小时内用完，最长不得超 过一天。

2
、苏木素配后经二十多天才能成熟，必须提前配制。

3
、该液能抵抗弱酸性染液，对已着染的细胞核在酸性染液的作用，不易被脱去颜色，如果不特
别深染，则无须分化。

4
、
Van Gieson
氏液取
B
液
9ml
，加入
A
液
1ml
，即可使用。

操作方法：
（后面的各种方法，如没特别说明，都在室温下进行）

1
、切片脱蜡至水，

2
、用
Weigert
氏苏木素染
20min
，

3
、水洗，必要时可分化，

4
、流水冲洗
10min
，

5
、染
Van Gieson
氏液
1min
，

6
、用
95%
酒精快速分化，

7
、无水酒精脱水，二甲苯透明，封固。

结果：

胶原纤维：鲜红色，肌纤维：

黄色，红细胞：

黄色，细胞核：

蓝黑或灰色。

注意事项：

1
、该法染完的切片，较易褪色如需照相，应尽早完成。


2