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合肥105做试管婴儿畜禽繁殖与改良教案

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-02-02 07:35

如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐

2021年2月2日发(作者:试管婴儿针忘了放冰箱)



2014
学年

秋季

学期


16


总课时:
2
课程名称

任课教师





畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

2014

12

1


中学一级

2
星期

节次

教具安排

星期一


5-6


多煤体

授课时数

教学题目


9


动物繁殖新技术

第一节

胚胎移植技术

提问法、讲
教学方法

授法、练习


教学内容目标要求

教学内容:
⑴掌握胚胎移植的生理基础和处理程序

⑵掌握胚胎移植的基本原则

⑶了解现代动物繁殖新技术

重点难点:⑴掌握胚胎移植的生理基础和处理程序


了解现代动物繁殖新技术


情感目标

能力点:培养学生热爱生命、关爱生活的情趣

专业素质渗透点:通过讲解
“ 胚胎移植技术
”让学生了解生物界基本结构的统一性,
使学生初步建立唯物主义进化论意识。< br>
【教学过程组织】

清点人数

1

2
分钟)

复习导入:卵 巢囊肿有哪几种情况?

1

3
分钟)

?

进入新课

一、胚胎移植的意义

20
分钟)

1
.充分发挥优良母畜的繁殖潜力

缩短优了良母畜的繁殖周期同时可产生更多的后代。

2.
缩短世代间隔,及早进行后裔测定能

通过重复超数排卵,不断移植, 使后代总数大大地增
加,可及早地对后代进行后裔测定,
MOET
育种已成为现代育种 工作的有力手段。

3.
增加双胎率

在肉牛业和肉羊业中通过胚 胎移植增加双胎率。不但提高了供体母畜的繁殖
率,同时也提高了受体母畜的繁殖率,从而大大提高了生 产效率。

4.
保存品种资源

胚胎长期保存是保存动物品种资源 的理想方法。
冷冻胚胎和冷冻精液共同构
成动物优良性状的基因库。

5.
防止疾病传播

在养猪业中,采用胚胎移植技术代替剖腹取仔的方法可 培育无特异病原体

SPE
)猪群。

6.
使不孕母畜获得生育能力

对于不能妊娠的母畜,可以根据具体情况专门作为供体或受体,
继续发挥其繁殖作用。

7.
促进基础理论研究

胚胎移植技术为动物繁殖生理学、
生物化 学、
遗传学、
细胞学、
胚胎学、
免疫学、动物育种学和进化等学科开辟了新的 试验研究途径。

8.
满足畜牧业现代化的需要

胚胎移植可以使 优良母畜的繁殖效率接近或达到生物学最高限
度,并且能够迅速改进家畜的品质。

二、胚胎移植的基本原则

20
分钟)

(一)胚胎移植前后供体和受体所处环境的同一性

1.
在分类学上的同属性

在分类学上属于同一个种。

2.
生理上的一致性

一般供、受体发情同步差要求在±
24h
以内。

3.
解剖部位的一致性

胚胎采自供体的输卵管就移到受体的输卵管,采自供体的子宫角就移至
受体的子宫角。

(二)胚胎发育的期限

胚胎采集和移植的期限(胚胎日龄)不能超过发情周期黄体的寿命,

(三)胚胎的质量

在胚胎移植全部操作过程中,胚胎不应受任何不良因素的影响。

(四)供、受体的状况

1.
生产性能和经济价值

供体的生产性能要高于受体,经济价值要大于受体,这样才能体现胚
胎移植的优越性。

2.
全身及生殖器官的生理状况

供、受体应健康、营养良好、体质健壮, 特别是生殖器官应具
有正常生理机能,否则会影响胚胎移植效果。

三、胚胎移植技术

28
分钟)

胚胎移植的过程,在各种 家畜基本相同,都是要经过供体、受体的选择,供体超排处理,受体
同期发情处理,配种(输精)
,收集胚胎(采卵)和移植胚胎(移卵)等步骤。

(一)供体和受体的选择

1.
供体的选择


1
)生产性能高,经济价值大,具备遗传优势,在育种上有价值。


2
)既往繁殖史正常,无遗传缺陷,具有良好的繁殖能力,且分娩顺利。


3
)体质健壮,膘情适度。

2.
受体的选择

受体母畜可选用非优良品种个体,但应具有良好的繁殖性能和健康体况,可选
择与供体发情周期 同步的母畜为受体。

(二)药品和器械的准备

1.
药品
FSH

HCG

PGF
2
?
;麻醉剂;生盐理水 、
75%
酒精、
2%
碘酒、青霉素。

2.
器械
10ml

1ml
注射器、手术刀、剪子、镊 子、止血钳、创布、缝合针、线及手术台;冲
胚管、移胚管、显微镜、表面皿、凹玻片、拔胚针等。
(三)供体的超数排卵

超排技术通常用于单胎家畜,其目的是让优良母畜排 出大量卵子,充分发挥其繁殖潜力,是胚
胎移植中的一个重要环节。

1.
超排方法


1

PMSG

FSH
超排

给供体母畜注射
PMSG

FSH
,发情开始后
12
~< br>16h

20

24h
各配种
(输精)一次,并于第 一次配种后静脉注射
HCG

LH
,以便排出更多卵子。激素的应用时间和剂 量
因家畜种类不同而有差异。


2
)配合应用前列腺素(
PG

PG
的用法 通常是在应用
PMSG
以后大约
48h
进行肌注。牛的用
量因
PG
种类而异,
PGF
2
?

30mg

15
甲基
PGF
2
?

2mg,
氯前列烯醇为
500
?
g
;绵羊和山羊的用量为
牛的一半。


3

PMSG
与抗
PMSG
配合使用


PMSG
可以消除
PMSG
的残留作用,
明显增加可用胚 胎数,

高超排效果。

2.
超排效果的评判标准
超排是胚胎移植中最难控制的一个环节,
在实践中只要能使一半以上
处理母畜达到满意结果 ,则认为超排是成功的。

随堂练习


3

5
分钟)

通过对当堂课内容的总结来了解学生的掌握情况,并对学生有困惑的地方进行再一次的讲解。

1
.超数排卵的方法有





2.
胚胎移植的意义有
















3
.胚胎移植的基本原则有







小结:
采用学生互相提问方式

3

10
分钟)

如:
A
学生问:“超数排卵的方法有?由
B
学生回答等

课后作业:

1

2
分钟)

1.
胚胎移植的基本程序是什么?

2.
在胚胎移植时如何选择供体和受体?

3.
如何对供供进行超数排卵?

板书设计:

第一节

胚胎移植技术

一、胚胎移植的意义

二、胚胎移植的基本原则

(一)胚胎移植前后供体和受体所处环境的同一性

(二)胚胎发育的期限

(三)胚胎的质量

(四)供、受体的状况

三、胚胎移植技术

(一)供体和受体的选择

(二)药品和器械的准备

(三)供体的超数排卵


教后感:
利用多媒体辅助展示教学过程中 遇到的抽象问题,多媒体设计直观性,这充分调动了学生
的积极性、主动性和创造性,从而更容易地达到 了教学目的,使学生在愉快、轻松的环境中获得知
识,培养了技能











2014
学年

秋季

学期


16


总课时:
4
课程名称

任课教师





教学题目

畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

授课时数

第九章动物繁殖新技术

第一节

胚胎移植技术

2014

12

5
中学一级

2
星期





教具安排

教学方式

星期
5

4-5


多煤体

演示法、
讲授
法、练习法

教学内容目标要求

教学内容:⑴
.
掌握受体的同期发情处理方法。


.
掌握采胚方法和移胚方法。

重点难点:⑴受体的同期发情处理


⑵胚胎的采集和移胚


能力点:掌握胚胎的采集和移植

情感目标:

专业素质渗透点:通过讲解“胚胎的移植”的基本知识,让学生了解畜 禽体生长的一
般规律,使学生建立科学的认识观

教学过程组织:

清点人数

1

2
分钟)

复习导入:卵 巢囊肿有哪几种情况?

3

5
分钟)

?

进入新课

(四)
、受体的同期发情

20
分钟)

当前比 较理想的同期发情药物是前列腺素及其类似物,
其剂量因
PG
种类和用法不同而异。< br>15-
甲基
PGF2
?
2mg
肌注,氯前列烯醇
500
?
g
肌注。各种家畜实施超排处理的具体方法见本书

5章家畜繁殖技术中的发情控制技术部分。

(五)供体的发情鉴定和配种

超排处理结束后,要密切观察供体的发情征状,为确保卵子受精,一般在发情
8

1 2h
输精一
次,以后间隔
8

12h
再输精一次,并且要加 大输精量。

(六)胚胎采集

在配种或输精后适当时间,从超排供体回收胚 胎,准备给受体移植,称胚胎采集或胚胎回收,
简称采胚。

1.
冲胚液和培养液的配制

现在多采用杜氏磷酸盐缓冲液
PBS


不但可用于冲洗、
采集胚胎,
还用于体外培养、冷冻 保存和解冻胚胎。

冲胚液犊牛血清含量一般为
3%

1%

5%

,培养液血清含量为
20%

1%
50%

。犊牛血清需加
热(
56
℃水浴
30min< br>)灭活。

2.
采胚时间

根据配种时间、排卵的大致时间 、胚胎的运行速度、胚胎的发育阶段、畜种、胚
胎所处部位及采胚方法等因素来确定是适宜的采胚时间。

3.
采胚方法

采胚方法分为手术法和非手术法两种。手术法适 用于各种动物,尤其是绵羊、山
羊、猪及实验动物;非手术法仅适用于牛、马等大家畜,且只能在胚胎进 入子宫后进行。


1
)手术法采胚

A
母畜保定

一种方法是用全身或后躯麻醉,母畜进行仰卧保定。另一种方法是用局部 麻醉,
使母畜站立于六柱栏中保定。两者的保定姿势均为前低后高的方式。

B
麻醉

全身麻醉可用普鲁卡因、酒精等;局部后躯麻醉用普鲁卡因、利多卡因进行腰 荐或尾
椎硬膜外腔注射,手术部位再以利多卡因作皮肤浸润麻醉。

C
手术部位

母牛可在乳房至脐孔之间的白线上剖腹,切口长约
10cm;羊在乳房左侧切口,
切口长度
4

6cm


D
采胚

主要包括有输卵管冲胚法、子宫角冲胚法和输卵管—子宫角冲胚法三种。

配教材图图
9-2
、图
9-3
ES
防止手术部粘连的方法

①不要用金属器械挟持生殖器官。

②所用手套、棉花、纱布等术前要用生理盐水浸湿,以防粘附于生殖器官上。

③在生殖器官表面撒涂低浓度肝素液、樟脑油等,以防止其表面附着血或血凝块。

④缝合要牢固、紧密,防止术后发生疝症。


2
)非手术法采胚

由于手术法采胚在生产应用中受到限制,目 前在马、牛等大家畜都用采
胚管进行非手术法采胚,一般在配种后
7

6
8
)天进行。

供体牛的保定和麻醉同手术法采胚,
采胚时先 用扩张棒对子宫颈进行扩张
(青年牛尤为必要)

采胚管消毒后,将无菌不锈钢导杆插 入采胚管内。将采胚管经子宫颈缓慢导入一侧子宫角基部,由
助手抽出部分不锈导杆,操作者继续向前推 进采胚管,当达到子宫角大弯附近时,助手从进气口注

12

25ml气体。当气囊位臵和充气量合适时,抽出全部不锈钢导杆。助手用注射器吸取事先加
温至
3 7
℃的冲胚液,从采胚管的进水口推进,进入子宫角内,再将冲胚液连同胚抽回注射器内,
如此 反复冲洗和回收
5

6
次,将每次回收的冲胚液收入集胚器内,并臵于
37
℃的恒温箱或无菌检
胚室内等待检胚。一侧子宫角冲胚结束后,按上边方法再冲洗另一侧 子宫角。

配教材图
9-4
4.
检胚

检胚应 在
20

25
℃的无菌操作室内进行。在立体显微镜下,检查收集到的胚胎数 ,
并用一细检胚吸管将胚胎移至新鲜培养液内,
在放大
40

200
倍的复式显微镜下,
进行形态学观察,
选出适合于移植的正常胚胎。

配教材图
9-5
、图
9-6
(七)胚胎保存

1.
常温保存

指在常温(
15

25
℃)下保存胚胎。通常采用含
20%
犊牛血清的
PBS
保存液,可
保 存胚胎
4

8h


2.
低温保存
< br>指在
0

10
℃的较低温度下保存胚胎的方法。在此温度下,胚胎细胞 分裂暂停,
新陈代谢速度显著减慢,所以较常温保存的存活时间要长。

3.
冷冻保存

指在干冰(
-79
℃)和液氮(
-196
℃)中保存胚胎。其最大优点是胚胎可以长期
保存,而对其活力无影响。胚胎冷冻方法 有以下几种:


1
)逐步降温法

这是一种传统方法,本法的优点是解冻后胚胎存活率较高,但操作程序比
较复杂。


2
)一步细管法

即在细管内用非渗透性蔗糖溶液一步脱除抗冻 剂(甘油)的方法。其特点
是从解冻到移植的全过程简单易行,利于在生产中推广应用。


3
)玻璃化法

用这种方法冷冻时,胚胎内外液体能同时玻璃化,不会形成冰晶,能较好地
保护胚胎。

(八)胚胎移植

胚胎移植就是将采取的可用胚胎移给受体母畜,亦称卵的移植,简称移卵。

1.
移胚部位

早期胚胎少于
8
细胞时,一般应移植于输 卵管,多于
8
细胞应移植于子宫角。

2.
移胚方法
< br>与采胚方法相似,
也分为手术法与非手术法两种,
前者适用于不能进行直肠操作
的中小家畜,后者适用于大家畜。


1
)手术法移植

与采胚方法相似,对母畜进行保定、麻醉。以山羊为例,先在其乳房一侧
作一平行于腹中线的切口,暴露 输卵管和子宫角,再将胚胎注入输卵管或子宫角。

无论是子宫内移植还是输卵管移植,
都要避免把空气注入。
移植完毕后将输卵管及子宫角送回
腹腔,按回收手术中的要求缝合腹壁 创口,术后做好移植记录。


2
)非手术法移胚

非手术法移胚只适用于牛、马等大家畜。与采胚相似,先将母畜保定麻
醉后,再移胚。

3.
影响胚胎移植妊娠率的因素


1
)胚胎因素

包括胚胎质量、日龄、移植胚胎的数量、提供胚胎的供体、胚胎在体外培养
的时间、鲜胚和冻胚 等。


2
)母体因素

包括供、受体发情同期化程度, 受体的孕酮水平,受体的营养,子宫、卵巢
的生理状况等。


3
)其他因素

包括自然发情与人工诱导发情,移植器污染程度以及操作者熟练程度等。


3

5
分钟)

1


检胚的方法为

2


胚胎保存的方法有





3


胚胎移植的部位有

4


手术法移植胚胎的方法有


,
非手术法移胚的方法有



5


影响胚胎移植妊娠率的因素有

小结:
采用学生互相提问方式

3

10
分钟)< br>
如:
A
学生问:“胚胎的保存方法有?由
B
学生回答
……

课后作业:
(1

2
分钟
)
1
、复习本节所讲内容;

2
、简述胚胎移植的基本过程

板书设计
:
第一节

胚胎移植技术

(四)受体的同期发情

(五)供体的发情鉴定和配种

(六)胚胎采集

1.
冲胚液和培养液的配制

2.
采胚时间

3.
采胚方法


1
)手术法采胚


2
)非手术法采胚

4.
检胚

(七)胚胎保存

1.
常温保存

2.
低温保存

3.
冷冻保存

(八)胚胎移植

1.
移胚部位

2.
移胚方法

3.
影响胚胎移植妊娠率的因素


1
)胚胎因素


2
)母体因素


3
)其他因素
教后感

本节课采用多媒体辅助教学,
完成了本节课的教学目标,
课堂中 学生合作精神得到了发扬,

不足:学生知识点的掌握有待加强









2014
学年

秋季

学期


17


总课时:
6
课程名称

任课教师





教学题目

畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

授课时数

第九章动物繁殖新技术

第二节

胚胎生物工程技术

2014

12

8
中学一级

2
星期





教具安排

教学方式

星期一


5-6


多煤体

演示法、
讲授
法、练习法

教学内容目标要求

教学内容:⑴
.
了解体外受精及性别控制技术


.
关于卵核移植与动物克隆技术

(3).
动物转基因技术

重点难点:⑴体外受精技术


⑵胚胎分割与嵌合技术


能力点:培养学生用发展有眼光看待万物思想意识

情感目标:

专 业素质渗透点:通过讲解“胚胎生物工程技术”的基本知识,让学生了解畜禽养殖
前沿技术,使学生建立 科学的世界观

教学过程组织:

清点人数

1

2
分钟)

复习导入:

3

5
分钟)

胚胎保存的方法?


胚胎移植的方法

进入新课

一、体外受精技术(
20
分钟)

(一)
、体外受精的意义

1
、充分发挥优良母畜的繁殖力

2
、评价公畜的繁殖性能

3
、作为其他相关研究的手段

(二)体外受精技术

1
、精子采集与获能处理


1
)精子采集:可采用射出精子或附睾尾精子


2
)精子获能:精子可在体内子宫中获能,也可在体外获能

2
、卵母细胞采集与成熟培养


1
)卵母细胞采集

将动物物的卵巢取出,用生理盐水冲洗后,放 入盛有生理盐水的保温瓶内运回实验室待用,用
注射针头抽出卵母细胞


2
)卵母细胞成熟培养:将卵母细胞放在培养液中,在温度
39
℃和
5%

CO
2
气相条件下培养
24
小时
左右,当卵母细胞达到 成熟时,卵黄周隙排出第一极体。

3
、精卵体外受精

将成熟培 养的卵母细胞先用精液洗涤
3
次,然后放入卵母细胞,再加入获能精子,
臵于
CO
2
培养箱孵育。

4
、受精的判定

出现下列 现象为受精:精子穿入卵内、精子头部膨大、精子头部和尾部在卵细胞质内存在、第二极
体的排出、原核 的形成和正常的卵裂等现象即确定为受精

5
、体外受精(早期胚胎)的培养发育

二、性别控制技术

(一)胚胎性别控制技术

1

X

Y
精子的分离


1
)理论依据


2
)分离方法

2
、改变受精环境

3
、卵子的无性繁殖

(二)
、胚胎性别鉴定技术

1
、细胞学方法


1
)胚胎分割


2
)羊胚预培养及有丝分裂阻滞


3
)制作染色体标本


4
)染色及镜检

2
、生物化学微量分析法

3
、免疫学方法


1

、细胞毒性分析法


2

、间接免疫荧光法

4
、分子生物学方法

三、卵核称植与动物克隆技术

(一)核移植与克隆的意义

1
、研究细胞核与细胞质的遗传作用

2
、研究配子发生过程中核的印迹作用

3
确定动物早期胚胎发育期间核的分化程度

4
、生产大量克隆动物

5
、克隆动物技术可为生物药物开发和珍稀动物保护做出重大南献

(二)
、核移植和动物克隆的原理

(三)操作技术

1
、核移植技术


1
)获取胚胎和卵母细胞


2
)显微操作


3
)电融合


4
)培养


5
)移植

以产生克隆绵羊为例,克隆技术步骤大致如下:


1


将胚盘细胞培养在饲养层上,建立长久的细胞系


2


除去受体卵母细胞的核及含有中期板的少量细胞质


3


从全能细胞系取出
1
个细胞与去核卵母细胞融合


4


将重建的胚胎移植给临时受体羊,并在
7
天后鉴定其发育情况


5


将发育成的桑椹胚和囊胚移植给其他绵羊,使其发育到产出羔羊

四、胚胎分割技术

(一)胚胎分割技术

1
、胚胎分割的方法


1
)对
2-16
细胞期胚胎,用显微镜操作仪上的玻璃针或刀片,将每个卵裂或两个卵裂球为一组或
4
个卵裂球 为一组进行分割,分别放入一个空透明带内,然后进行移植


2
)与上述方 法相同,将桑椹胚或早期囊胚一分为二或一分四,将每块细胞团移入一登上空透明
带内,然后进行移植< br>
2
、胚胎分割的程序


1
)用促性腺激素促使牛、羊超数排卵


2
) 通过外科手述取出
2

4

8
等分裂球的胚胎


3
)将秀明带中的卵裂球分离,用吸管吸出


4
)将分离的分裂球放入其他动物预先掏空的秀明带中,在每个透明带中放入
1

2< br>个卵裂球


5
)将分割后的胚胎埋藏于琼脂中,放入羊或其他动物输 卵管中培养
3-4



6
)将胚胎冲洗出来经鉴定后,再作移植用

(二)胚胎嵌合技术

1
、嵌合体的制作方法


1
)早期胚胎聚合法

①采集胚胎

②除去透明带

③胚胎的聚合

④聚合胚胎的培养

⑤嵌合体的移植

⑥嵌合体的鉴定


2
)分裂球聚合法


3
)囊胚注入法

2
、嵌合体的标记及鉴定方法

五、动物转基因技术

(一)外源基因导入的主要方法

1
、原核显微注射法

2
、反转录病毒感染胚胎法

3
、胚胎干细胞法子、精子载体法

(二)基因导入的应用前景

1
、动物育种

2
、生产动物蛋白

六、胚胎干细胞技术

(一)
、形态与功能特点

1
、形态学特征

2
、功能特征

(二)胚胎干细胞建系技术要点

1
、饲养层的制备及分化抑制物的选择

2
、早期胚胎及
PGC
的选择和分离

3
、早期胚胎及
PGC
的培养和
ESC
的分离传代

4

ESC
的鉴定及保存


3

5
分钟)

1
体外受精的意义为

2
胚胎性别鉴定技术







3
核移植技术

4
核移植及动物克隆的意义是



5
嵌合体的制作方法


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐


如图所示的实验试管口-试管移植后想呕吐



本文更新与2021-02-02 07:35,由作者提供,不代表本网站立场,转载请注明出处:http://www.xapfxb.com/yuer/441697.html

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