合肥105做试管婴儿畜禽繁殖与改良教案

2021年2月2日发(作者：试管婴儿针忘了放冰箱)



2014
学年

秋季

学期

第
16
周

总课时：
2
课程名称

任课教师

班

级

畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

2014
年
12
月
1
日

中学一级

2
星期

节次

教具安排

星期一

第
5-6
节

多煤体

授课时数

教学题目

第
9
章

动物繁殖新技术

第一节

胚胎移植技术

提问法、讲
教学方法

授法、练习
法

教学内容目标要求

教学内容：
⑴掌握胚胎移植的生理基础和处理程序

⑵掌握胚胎移植的基本原则

⑶了解现代动物繁殖新技术

重点难点：⑴掌握胚胎移植的生理基础和处理程序

⑵
了解现代动物繁殖新技术


情感目标

能力点：培养学生热爱生命、关爱生活的情趣

专业素质渗透点：通过讲解
“ 胚胎移植技术
”让学生了解生物界基本结构的统一性，
使学生初步建立唯物主义进化论意识。< br>
【教学过程组织】

清点人数
（
1
—
2
分钟）

复习导入：卵 巢囊肿有哪几种情况？
（
1
—
3
分钟）

?

进入新课

一、胚胎移植的意义
（
20
分钟）

1
．充分发挥优良母畜的繁殖潜力

缩短优了良母畜的繁殖周期同时可产生更多的后代。

2.
缩短世代间隔，及早进行后裔测定能

通过重复超数排卵，不断移植， 使后代总数大大地增
加，可及早地对后代进行后裔测定，
MOET
育种已成为现代育种 工作的有力手段。

3.
增加双胎率

在肉牛业和肉羊业中通过胚 胎移植增加双胎率。不但提高了供体母畜的繁殖
率，同时也提高了受体母畜的繁殖率，从而大大提高了生 产效率。

4.
保存品种资源

胚胎长期保存是保存动物品种资源 的理想方法。
冷冻胚胎和冷冻精液共同构
成动物优良性状的基因库。

5.
防止疾病传播

在养猪业中，采用胚胎移植技术代替剖腹取仔的方法可 培育无特异病原体
（
SPE
）猪群。

6.
使不孕母畜获得生育能力

对于不能妊娠的母畜，可以根据具体情况专门作为供体或受体，
继续发挥其繁殖作用。

7.
促进基础理论研究

胚胎移植技术为动物繁殖生理学、
生物化 学、
遗传学、
细胞学、
胚胎学、
免疫学、动物育种学和进化等学科开辟了新的 试验研究途径。

8.
满足畜牧业现代化的需要

胚胎移植可以使 优良母畜的繁殖效率接近或达到生物学最高限
度，并且能够迅速改进家畜的品质。

二、胚胎移植的基本原则
（
20
分钟）

（一）胚胎移植前后供体和受体所处环境的同一性

1.
在分类学上的同属性

在分类学上属于同一个种。

2.
生理上的一致性

一般供、受体发情同步差要求在±
24h
以内。

3.
解剖部位的一致性

胚胎采自供体的输卵管就移到受体的输卵管，采自供体的子宫角就移至
受体的子宫角。

（二）胚胎发育的期限

胚胎采集和移植的期限（胚胎日龄）不能超过发情周期黄体的寿命，

（三）胚胎的质量

在胚胎移植全部操作过程中，胚胎不应受任何不良因素的影响。

（四）供、受体的状况

1.
生产性能和经济价值

供体的生产性能要高于受体，经济价值要大于受体，这样才能体现胚
胎移植的优越性。

2.
全身及生殖器官的生理状况

供、受体应健康、营养良好、体质健壮， 特别是生殖器官应具
有正常生理机能，否则会影响胚胎移植效果。

三、胚胎移植技术
（
28
分钟）

胚胎移植的过程，在各种 家畜基本相同，都是要经过供体、受体的选择，供体超排处理，受体
同期发情处理，配种（输精）
，收集胚胎（采卵）和移植胚胎（移卵）等步骤。

（一）供体和受体的选择

1.
供体的选择

（
1
）生产性能高，经济价值大，具备遗传优势，在育种上有价值。

（
2
）既往繁殖史正常，无遗传缺陷，具有良好的繁殖能力，且分娩顺利。

（
3
）体质健壮，膘情适度。

2.
受体的选择

受体母畜可选用非优良品种个体，但应具有良好的繁殖性能和健康体况，可选
择与供体发情周期 同步的母畜为受体。

（二）药品和器械的准备

1.
药品
FSH
、
HCG
、
PGF
2
?
；麻醉剂；生盐理水 、
75%
酒精、
2%
碘酒、青霉素。

2.
器械
10ml
和
1ml
注射器、手术刀、剪子、镊 子、止血钳、创布、缝合针、线及手术台；冲
胚管、移胚管、显微镜、表面皿、凹玻片、拔胚针等。
（三）供体的超数排卵

超排技术通常用于单胎家畜，其目的是让优良母畜排 出大量卵子，充分发挥其繁殖潜力，是胚
胎移植中的一个重要环节。

1.
超排方法

（
1
）
PMSG
或
FSH
超排

给供体母畜注射
PMSG
或
FSH
，发情开始后
12
～< br>16h
和
20
～
24h
各配种
（输精）一次，并于第 一次配种后静脉注射
HCG
或
LH
，以便排出更多卵子。激素的应用时间和剂 量
因家畜种类不同而有差异。

（
2
）配合应用前列腺素（
PG
）
PG
的用法 通常是在应用
PMSG
以后大约
48h
进行肌注。牛的用
量因
PG
种类而异，
PGF
2
?
为
30mg
，
15
甲基
PGF
2
?
为
2mg,
氯前列烯醇为
500
?
g
；绵羊和山羊的用量为
牛的一半。

（
3
）
PMSG
与抗
PMSG
配合使用

抗
PMSG
可以消除
PMSG
的残留作用，
明显增加可用胚 胎数，
提
高超排效果。

2.
超排效果的评判标准
超排是胚胎移植中最难控制的一个环节，
在实践中只要能使一半以上
处理母畜达到满意结果 ，则认为超排是成功的。

随堂练习

（
3
—
5
分钟）

通过对当堂课内容的总结来了解学生的掌握情况，并对学生有困惑的地方进行再一次的讲解。

1
．超数排卵的方法有

、

、

2.
胚胎移植的意义有

、

、

、

、


、

、

、

3
．胚胎移植的基本原则有

、

、


、
小结：
采用学生互相提问方式
（
3
—
10
分钟）

如：
A
学生问：“超数排卵的方法有？由
B
学生回答等

课后作业：
（
1
—
2
分钟）

1.
胚胎移植的基本程序是什么？

2.
在胚胎移植时如何选择供体和受体？

3.
如何对供供进行超数排卵？

板书设计：

第一节

胚胎移植技术

一、胚胎移植的意义

二、胚胎移植的基本原则

（一）胚胎移植前后供体和受体所处环境的同一性

（二）胚胎发育的期限

（三）胚胎的质量

（四）供、受体的状况

三、胚胎移植技术

（一）供体和受体的选择

（二）药品和器械的准备

（三）供体的超数排卵


教后感：
利用多媒体辅助展示教学过程中 遇到的抽象问题，多媒体设计直观性，这充分调动了学生
的积极性、主动性和创造性，从而更容易地达到 了教学目的，使学生在愉快、轻松的环境中获得知
识，培养了技能

。









2014
学年

秋季

学期

第
16
周

总课时：
4
课程名称

任课教师

班

级

教学题目

畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

授课时数

第九章动物繁殖新技术

第一节

胚胎移植技术

2014
年
12
月
5
中学一级

2
星期

节

次

教具安排

教学方式

星期
5
第
4-5
节

多煤体

演示法、
讲授
法、练习法

教学内容目标要求

教学内容：⑴
.
掌握受体的同期发情处理方法。

⑵
.
掌握采胚方法和移胚方法。

重点难点：⑴受体的同期发情处理


⑵胚胎的采集和移胚


能力点：掌握胚胎的采集和移植

情感目标：

专业素质渗透点：通过讲解“胚胎的移植”的基本知识，让学生了解畜 禽体生长的一
般规律，使学生建立科学的认识观

教学过程组织：

清点人数
（
1
—
2
分钟）

复习导入：卵 巢囊肿有哪几种情况？
（
3
—
5
分钟）

?

进入新课

（四）
、受体的同期发情
（
20
分钟）

当前比 较理想的同期发情药物是前列腺素及其类似物，
其剂量因
PG
种类和用法不同而异。< br>15-
甲基
PGF2
?
2mg
肌注，氯前列烯醇
500
?
g
肌注。各种家畜实施超排处理的具体方法见本书
第
5章家畜繁殖技术中的发情控制技术部分。

（五）供体的发情鉴定和配种

超排处理结束后，要密切观察供体的发情征状，为确保卵子受精，一般在发情
8
～
1 2h
输精一
次，以后间隔
8
～
12h
再输精一次，并且要加 大输精量。

（六）胚胎采集

在配种或输精后适当时间，从超排供体回收胚 胎，准备给受体移植，称胚胎采集或胚胎回收，
简称采胚。

1.
冲胚液和培养液的配制

现在多采用杜氏磷酸盐缓冲液
（PBS
）
，
不但可用于冲洗、
采集胚胎，
还用于体外培养、冷冻 保存和解冻胚胎。

冲胚液犊牛血清含量一般为
3%
（
1%
～
5%
）
，培养液血清含量为
20%
（
1%
～50%
）
。犊牛血清需加
热（
56
℃水浴
30min< br>）灭活。

2.
采胚时间

根据配种时间、排卵的大致时间 、胚胎的运行速度、胚胎的发育阶段、畜种、胚
胎所处部位及采胚方法等因素来确定是适宜的采胚时间。

3.
采胚方法

采胚方法分为手术法和非手术法两种。手术法适 用于各种动物，尤其是绵羊、山
羊、猪及实验动物；非手术法仅适用于牛、马等大家畜，且只能在胚胎进 入子宫后进行。

（
1
）手术法采胚

A
母畜保定

一种方法是用全身或后躯麻醉，母畜进行仰卧保定。另一种方法是用局部 麻醉，
使母畜站立于六柱栏中保定。两者的保定姿势均为前低后高的方式。

B
麻醉

全身麻醉可用普鲁卡因、酒精等；局部后躯麻醉用普鲁卡因、利多卡因进行腰 荐或尾
椎硬膜外腔注射，手术部位再以利多卡因作皮肤浸润麻醉。

C
手术部位

母牛可在乳房至脐孔之间的白线上剖腹，切口长约
10cm；羊在乳房左侧切口，
切口长度
4
～
6cm
。

D
采胚

主要包括有输卵管冲胚法、子宫角冲胚法和输卵管—子宫角冲胚法三种。

配教材图图
9-2
、图
9-3
ES
防止手术部粘连的方法

①不要用金属器械挟持生殖器官。

②所用手套、棉花、纱布等术前要用生理盐水浸湿，以防粘附于生殖器官上。

③在生殖器官表面撒涂低浓度肝素液、樟脑油等，以防止其表面附着血或血凝块。

④缝合要牢固、紧密，防止术后发生疝症。

（
2
）非手术法采胚

由于手术法采胚在生产应用中受到限制，目 前在马、牛等大家畜都用采
胚管进行非手术法采胚，一般在配种后
7
（
6～
8
）天进行。

供体牛的保定和麻醉同手术法采胚，
采胚时先 用扩张棒对子宫颈进行扩张
（青年牛尤为必要）
。
采胚管消毒后，将无菌不锈钢导杆插 入采胚管内。将采胚管经子宫颈缓慢导入一侧子宫角基部，由
助手抽出部分不锈导杆，操作者继续向前推 进采胚管，当达到子宫角大弯附近时，助手从进气口注
入
12
～
25ml气体。当气囊位臵和充气量合适时，抽出全部不锈钢导杆。助手用注射器吸取事先加
温至
3 7
℃的冲胚液，从采胚管的进水口推进，进入子宫角内，再将冲胚液连同胚抽回注射器内，
如此 反复冲洗和回收
5
～
6
次，将每次回收的冲胚液收入集胚器内，并臵于
37
℃的恒温箱或无菌检
胚室内等待检胚。一侧子宫角冲胚结束后，按上边方法再冲洗另一侧 子宫角。

配教材图
9-4
4.
检胚

检胚应 在
20
～
25
℃的无菌操作室内进行。在立体显微镜下，检查收集到的胚胎数 ，
并用一细检胚吸管将胚胎移至新鲜培养液内，
在放大
40
～
200
倍的复式显微镜下，
进行形态学观察，
选出适合于移植的正常胚胎。

配教材图
9-5
、图
9-6
（七）胚胎保存

1.
常温保存

指在常温（
15
～
25
℃）下保存胚胎。通常采用含
20%
犊牛血清的
PBS
保存液，可
保 存胚胎
4
～
8h
。

2.
低温保存
< br>指在
0
～
10
℃的较低温度下保存胚胎的方法。在此温度下，胚胎细胞 分裂暂停，
新陈代谢速度显著减慢，所以较常温保存的存活时间要长。

3.
冷冻保存

指在干冰（
-79
℃）和液氮（
-196
℃）中保存胚胎。其最大优点是胚胎可以长期
保存，而对其活力无影响。胚胎冷冻方法 有以下几种：

（
1
）逐步降温法

这是一种传统方法，本法的优点是解冻后胚胎存活率较高，但操作程序比
较复杂。

（
2
）一步细管法

即在细管内用非渗透性蔗糖溶液一步脱除抗冻 剂（甘油）的方法。其特点
是从解冻到移植的全过程简单易行，利于在生产中推广应用。

（
3
）玻璃化法

用这种方法冷冻时，胚胎内外液体能同时玻璃化，不会形成冰晶，能较好地
保护胚胎。

（八）胚胎移植

胚胎移植就是将采取的可用胚胎移给受体母畜，亦称卵的移植，简称移卵。

1.
移胚部位

早期胚胎少于
8
细胞时，一般应移植于输 卵管，多于
8
细胞应移植于子宫角。

2.
移胚方法
< br>与采胚方法相似，
也分为手术法与非手术法两种，
前者适用于不能进行直肠操作
的中小家畜，后者适用于大家畜。

（
1
）手术法移植

与采胚方法相似，对母畜进行保定、麻醉。以山羊为例，先在其乳房一侧
作一平行于腹中线的切口，暴露 输卵管和子宫角，再将胚胎注入输卵管或子宫角。

无论是子宫内移植还是输卵管移植，
都要避免把空气注入。
移植完毕后将输卵管及子宫角送回
腹腔，按回收手术中的要求缝合腹壁 创口，术后做好移植记录。

（
2
）非手术法移胚

非手术法移胚只适用于牛、马等大家畜。与采胚相似，先将母畜保定麻
醉后，再移胚。

3.
影响胚胎移植妊娠率的因素

（
1
）胚胎因素

包括胚胎质量、日龄、移植胚胎的数量、提供胚胎的供体、胚胎在体外培养
的时间、鲜胚和冻胚 等。

（
2
）母体因素

包括供、受体发情同期化程度， 受体的孕酮水平，受体的营养，子宫、卵巢
的生理状况等。

（
3
）其他因素

包括自然发情与人工诱导发情，移植器污染程度以及操作者熟练程度等。

（
3
—
5
分钟）

1
．

检胚的方法为

2
．

胚胎保存的方法有

、

、

3
．

胚胎移植的部位有

4
．

手术法移植胚胎的方法有

、
,
非手术法移胚的方法有

、

5
．

影响胚胎移植妊娠率的因素有

小结：
采用学生互相提问方式
（
3
—
10
分钟）< br>
如：
A
学生问：“胚胎的保存方法有？由
B
学生回答
……

课后作业：
(1
—
2
分钟
)
1
、复习本节所讲内容；

2
、简述胚胎移植的基本过程

板书设计
:
第一节

胚胎移植技术

（四）受体的同期发情

（五）供体的发情鉴定和配种

（六）胚胎采集

1.
冲胚液和培养液的配制

2.
采胚时间

3.
采胚方法

（
1
）手术法采胚

（
2
）非手术法采胚

4.
检胚

（七）胚胎保存

1.
常温保存

2.
低温保存

3.
冷冻保存

（八）胚胎移植

1.
移胚部位

2.
移胚方法

3.
影响胚胎移植妊娠率的因素

（
1
）胚胎因素

（
2
）母体因素

（
3
）其他因素
教后感
：
本节课采用多媒体辅助教学，
完成了本节课的教学目标，
课堂中 学生合作精神得到了发扬，

不足：学生知识点的掌握有待加强









2014
学年

秋季

学期

第
17
周

总课时：
6
课程名称

任课教师

班

级

教学题目

畜禽繁殖与改良

白绪珍

三年级养殖班

时间

职称

授课时数

第九章动物繁殖新技术

第二节

胚胎生物工程技术

2014
年
12
月
8
中学一级

2
星期

节

次

教具安排

教学方式

星期一

第
5-6
节

多煤体

演示法、
讲授
法、练习法

教学内容目标要求

教学内容：⑴
.
了解体外受精及性别控制技术

⑵
.
关于卵核移植与动物克隆技术

(3).
动物转基因技术

重点难点：⑴体外受精技术


⑵胚胎分割与嵌合技术


能力点：培养学生用发展有眼光看待万物思想意识

情感目标：

专 业素质渗透点：通过讲解“胚胎生物工程技术”的基本知识，让学生了解畜禽养殖
前沿技术，使学生建立 科学的世界观

教学过程组织：

清点人数
（
1
—
2
分钟）

复习导入：
（
3
—
5
分钟）

胚胎保存的方法？


胚胎移植的方法

进入新课

一、体外受精技术（
20
分钟）

（一）
、体外受精的意义

1
、充分发挥优良母畜的繁殖力

2
、评价公畜的繁殖性能

3
、作为其他相关研究的手段

（二）体外受精技术

1
、精子采集与获能处理

（
1
）精子采集：可采用射出精子或附睾尾精子

（
2
）精子获能：精子可在体内子宫中获能，也可在体外获能

2
、卵母细胞采集与成熟培养

（
1
）卵母细胞采集

将动物物的卵巢取出，用生理盐水冲洗后，放 入盛有生理盐水的保温瓶内运回实验室待用，用
注射针头抽出卵母细胞

（
2
）卵母细胞成熟培养：将卵母细胞放在培养液中，在温度
39
℃和
5%

CO
2
气相条件下培养
24
小时
左右，当卵母细胞达到 成熟时，卵黄周隙排出第一极体。

3
、精卵体外受精

将成熟培 养的卵母细胞先用精液洗涤
3
次，然后放入卵母细胞，再加入获能精子，
臵于
CO
2
培养箱孵育。

4
、受精的判定

出现下列 现象为受精：精子穿入卵内、精子头部膨大、精子头部和尾部在卵细胞质内存在、第二极
体的排出、原核 的形成和正常的卵裂等现象即确定为受精

5
、体外受精（早期胚胎）的培养发育

二、性别控制技术

（一）胚胎性别控制技术

1
、
X
、
Y
精子的分离

（
1
）理论依据

（
2
）分离方法

2
、改变受精环境

3
、卵子的无性繁殖

（二）
、胚胎性别鉴定技术

1
、细胞学方法

（
1
）胚胎分割

（
2
）羊胚预培养及有丝分裂阻滞

（
3
）制作染色体标本

（
4
）染色及镜检

2
、生物化学微量分析法

3
、免疫学方法

（
1
）
、细胞毒性分析法

（
2
）
、间接免疫荧光法

4
、分子生物学方法

三、卵核称植与动物克隆技术

（一）核移植与克隆的意义

1
、研究细胞核与细胞质的遗传作用

2
、研究配子发生过程中核的印迹作用

3
确定动物早期胚胎发育期间核的分化程度

4
、生产大量克隆动物

5
、克隆动物技术可为生物药物开发和珍稀动物保护做出重大南献

（二）
、核移植和动物克隆的原理

（三）操作技术

1
、核移植技术

（
1
）获取胚胎和卵母细胞

（
2
）显微操作

（
3
）电融合

（
4
）培养

（
5
）移植

以产生克隆绵羊为例，克隆技术步骤大致如下：

（
1
）

将胚盘细胞培养在饲养层上，建立长久的细胞系

（
2
）

除去受体卵母细胞的核及含有中期板的少量细胞质

（
3
）

从全能细胞系取出
1
个细胞与去核卵母细胞融合

（
4
）

将重建的胚胎移植给临时受体羊，并在
7
天后鉴定其发育情况

（
5
）

将发育成的桑椹胚和囊胚移植给其他绵羊，使其发育到产出羔羊

四、胚胎分割技术

（一）胚胎分割技术

1
、胚胎分割的方法

（
1
）对
2-16
细胞期胚胎，用显微镜操作仪上的玻璃针或刀片，将每个卵裂或两个卵裂球为一组或
4
个卵裂球 为一组进行分割，分别放入一个空透明带内，然后进行移植

（
2
）与上述方 法相同，将桑椹胚或早期囊胚一分为二或一分四，将每块细胞团移入一登上空透明
带内，然后进行移植< br>
2
、胚胎分割的程序

（
1
）用促性腺激素促使牛、羊超数排卵

（
2
） 通过外科手述取出
2
、
4
、
8
等分裂球的胚胎

（
3
）将秀明带中的卵裂球分离，用吸管吸出

（
4
）将分离的分裂球放入其他动物预先掏空的秀明带中，在每个透明带中放入
1
—
2< br>个卵裂球

（
5
）将分割后的胚胎埋藏于琼脂中，放入羊或其他动物输 卵管中培养
3-4
天

（
6
）将胚胎冲洗出来经鉴定后，再作移植用

（二）胚胎嵌合技术

1
、嵌合体的制作方法

（
1
）早期胚胎聚合法

①采集胚胎

②除去透明带

③胚胎的聚合

④聚合胚胎的培养

⑤嵌合体的移植

⑥嵌合体的鉴定

（
2
）分裂球聚合法

（
3
）囊胚注入法

2
、嵌合体的标记及鉴定方法

五、动物转基因技术

（一）外源基因导入的主要方法

1
、原核显微注射法

2
、反转录病毒感染胚胎法

3
、胚胎干细胞法子、精子载体法

（二）基因导入的应用前景

1
、动物育种

2
、生产动物蛋白

六、胚胎干细胞技术

（一）
、形态与功能特点

1
、形态学特征

2
、功能特征

（二）胚胎干细胞建系技术要点

1
、饲养层的制备及分化抑制物的选择

2
、早期胚胎及
PGC
的选择和分离

3
、早期胚胎及
PGC
的培养和
ESC
的分离传代

4
、
ESC
的鉴定及保存

（
3
—
5
分钟）

1
体外受精的意义为

2
胚胎性别鉴定技术

、

、

、

3
核移植技术

4
核移植及动物克隆的意义是

。

5
嵌合体的制作方法

论