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宁夏医学院附属医院实验七1、精液品质检查(精子形态和

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-29 16:39

-银杏树的作用

2021年1月29日发(作者:激光雀斑多少钱)
实验六

精液品质检查(精子形态和畸形率的测定)

?

一、目的和要求

?

由于所需时间等原因,无需对每次采精进行精 子畸形率的测定。但应当每月对每一
头种公畜进行一次畸形率的测定,以绘出精子畸形率变化图。

?

畸形率突然增高,表明存在问题,应当查找和分析原因。畸形率在
2 5
%以内,受精
力一般不受影响。畸形精子一般不表现前进运动,因而随着畸形精子数增多,精 子
活率下降。如在检查精子运动力时,可观察到许多畸形精子,也需要进一步作形态
学检查。< br>
?

通过本实验,了解家畜精液中精子形态与精液品质的关系,掌握精子形态 的分类和
分析方法。

二、材料和仪器设备

?

精液、染色液、高倍显微镜、相差显微镜等。

三、方法和步骤

?

(一)威廉氏染色法:观察精子头部形态的染色方法。

?

1
.染色液

?

复红(又称品红)染色液:

?

复红原液(
10g
复红溶于
100ml 96
%的酒精)
1 0ml

5
%的石碳酸(苯酚)
100ml


?

取上述混合液
50ml
加饱和伊红酒精溶液
25ml< br>放置两周后即可使用。

?

美兰(又称甲基兰)染色液:

?

美兰溶液(
10g
美兰溶于
1000ml
96
%的酒精中)
30ml

0.01

KOH
100ml
过滤后再加入
3
倍量的蒸馏水,混合后即可使用。

?

2
.染色程序

?


1
)先制作精液抹片,要求薄而均匀。然后风干或用酒精灯火焰固定。

?


2
)浸入无水酒精中固定
2

3m in
,取出风干。

?


3
)浸入
0. 5
%氯胺
T

1

2min


?


4
)用清水洗
1

2min


?


5
)迅速通过
96
%的酒精、风干。

?


6
)放入石碳酸复红染色液中
10

15min
。清水中沾
2
次。

?


7
)迅速通过美兰染色液。

?


8
)水洗后风干

?

(二)苏木精—伊红染色:

?

用以观察精液中非精子有形成分的类型和比例。细胞核染成蓝色,细胞浆呈红色。

?

苏木精溶液:

?

2g
苏木精溶于
100ml
无水酒精中,加入
100ml
蒸馏水,
100ml
甘油,
3g

醋酸和
10g
铝酸钾混合,放置
14
天后使用,用前震荡。

?

伊红染液:

?

1g
伊红加入
100ml
95
%的酒精,染色时,取一定量的该液 加入等量
70
%的
酒精。


?

2
.染色程序

?




(< br>1
)制备间断式的精液抹片(即当推制抹片时,不要一推到底,而要断续前推,
使抹片厚 度有一个梯度变化,染色后易于观察不同类型的精子成分)
,风干。

?





2
)浸入无水酒精中固定
3
~< br>5min
,风干。

?





3
)分别浸入
95
%、
75
%的酒精和蒸馏水中各
1min

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