琥珀猴枣散酶工程的发展状况及其应用前景

2021年1月28日发(作者：拉屎肛门出血)
酶工程的发展状况及其应用前景

摘要：
酶在现代生物生产中扮演着重要角色 ，
酶作为一种生物催化剂，
因其催化作用具
有高度专一性、
催化条件温和、< br>无污染等特点，以及酶工程不断的技术性突破，使得酶在工
业、农业、医药卫生、能源开发及环境 工程等方面的应用越来越广泛。

关键词：
酶工程


生物催化剂


酶的固定

正文：

随着 酶生产的不断发展，酶的应用越来越广泛。现在，酶工程已在医药、食品工业、农
业、饲料、环保、能源 、科研等领域广泛应用。成为基因工程、细胞工程、蛋白质工程等新
技术领域的科学研究和技术开发中不 可取代的工具。

一、酶工程的发展及应用现状

（一）国内外酶制剂的发展现状

BCC
最新研究报告显示，
未来

4
年全球工业酶制剂市 场价值将以
9.1
％的复合年增长率
继续增长，由
2011
年的39
亿美元增加至

2016
年的约
61
亿美元。该 报告将工业酶市场细
分成
3
个部分：
生物酶、
食品和饮料酶以及其他 酶制剂。
2011
年生物酶的市场价值达
12
亿
美元，预计还将 以
8.2
％的复合年增长率继续增长，
2016
年达
17
亿 美元。
2011
年食品和饮
料活性酶的市场价值接近
13
亿美元，< br>未来

4
年还将以
10.4
％的年均复合增长率增长，预计
2016
年达
21
亿美元。

2011
年其他酶制剂的市场价值为

15
亿美元，
预计 还将以
8.7
％的复
合年增长率增长，到
2016
年市场价值将达到
22
亿美元①。

我国酶制剂工业面经过近几十年的发展，
初步具有 一定的规模，
取得了很大的进步。
但
是，国外酶制剂公司仍然处于绝对的领先地位，特 别是一些比较出色的公司，例如，诺和诺
德公司（
Novo Nordisk
）
、丹尼斯克公司（
Danisco
）等②。

（二）酶工程的应用现状

一、酶工程技术在医药工业中的应用

1
、酶的固定化技术


酶的固定化
(enzyme& nbspimmobilization)
是指采用有机或无机固体材料作为载体
(carri er or support)
，
将酶包埋起来或束缚、
限制于载体的表面和微孔中，
使其仍具有催
化活性，
并可回收及重复使用的酶化学方法与技术。
不使用固体 材料作为载体，
通过酶分子
之间的相互交联形成聚集体，
也可将酶固定化，
称 为无载体酶固定化。
由于酶的蛋白质属性，
进人人体后产生免疫反应，
因稀释效应，< br>而无法集中于靶器官组织，
常不能保持最适合的治
疗浓度，
而固定化酶则很好的 克服了游离酶的这些缺点，
应用于治疗镁缺乏症、
代谢异常症
及制造人工内脏方面，如 固定化
L-
天冬酰胺酶用于治疗白血病。葡萄糖氧化酶被固定化在
纳米微带金电极上可 用于活体检测的微生物传感器③。

固定化酶技术可用于治疗一些代谢障碍疾病。已知人类关于 新陈代谢的疾病已过
120
余种，
很多病因归结为人体缺乏某种酶的活性，
一 种可能的治疗方法就是通过某种方式给病
人提供他所缺乏的酶。
其提供的方式主要有：
①将固定化酶用于体内作为治疗药物；
②将固
定化酶组装成体外生物反应器，
通过体外 循环作为临床治疗剂。
将固定化酶用于临床诊断的
例子很多，如各种酶测试盒层出不穷，采用固 定化酶柱反应器的
FIA(
流动注射法
)
可用于临
床诊断检测尿酸、 葡萄糖、氨、尿素、胆甾醇、谷氨酸、乳酸、无机磷等。

2
、酶催化技术


主要介绍非水相介质中的酶催化，传统的酶催化反应主要在水相中进行，但自
198 7
年
Kilibanov
等。
用脂肪酶粉或固定化酶在几乎无水的有机溶剂中 成功地催化合成了肽以及手
性的醇、
脂和酰胺以来，
对酶在非水相介质的催化反应技术 的开发及研究报道迅速增加，
特
别在手性药物的不对称合成及手性药物拆分的生物技术开发中得 到了很多应用。
目前非水相
中的酶催化技术已衍生出以下几类体系：
①水与有机溶剂的 互溶均相体系；
②水与有机溶剂
形成的两相或多相体系；
③单相有机溶剂体系；④反胶 束体系；⑤超临界液体；⑥低温体系
等。
不同的介质体系都有各自的适用范围，
研究在 不同介质中的酶催化反应动力学及热力学
平衡以及酶催化机制将对某一特定催化反应所需介质的筛选和使 用起到十分重要的指导意
义，樊可可和欧阳平凯在两相体系酶催化反应介质的选取方面做了很多的实验及 理化研究，
已初步归纳出经实验验证行之有效的两相体系中酶促肽键合成反应介质的筛选原则。

前酶催化技术主要应用于制药领域，应用酶催化技术可以生产许多成品药及医药中间
体。
它是通过以制造初级代谢产物、
中间代谢产物、
次级代谢产物及催化转化和拆分等形式
来进行的。
这已成为当今新药开发和改造传统制药工艺的重要手段，
特别在手性药物及中间< br>体的生产中更有广泛的应用前景。
以下重点介绍几个制药领域中酶催化技术的应用：
生产 医
药用的氨基酸（如
L-
丙氨酸）
、有机酸（柠檬酸、
L
一 苹果酸、
L-
酒石酸）
、抗生素（如
6
一氨基青霉烷酸、氨苄青霉素 和羟氨青霉素）
、肽类药物（如胰岛素、环孢菌素
A
）以及广
泛应用于多种维 生素
(VB2
、
VB12)
、甾体药物
(
氢化可的松、脱氢 泼尼松、睾丸激素等
)
及核
苷酸类药物
(5
’
-
核 苷酸，
3
’
-
核苷酸
)
等的生产④。

3
、酶的化学修饰


酶的化学修饰是指利用化学手段将某些化学 物质或基团结合到酶分子上，
或将酶分子的
某部分删除或置换，改变酶的理化性质，最终达到改 变酶的催化性质的目的。


在生物医药领域中化学修饰可以提高医用酶的稳定性，< br>延长它在体内的半衰期，
抑制免
疫球蛋白的产生，降低或消除酶分子的免疫原性，确保其 生物活性的发挥。


修饰剂作为一种屏障，
将蛋白质表面的抗原决定簇掩盖 起来，
使得蛋白质分子不能与各
种细胞表面受体结合，
不被机体的免疫系统识别，避免了相应抗体的产生，
这是化学修饰降
低药用蛋白免疫原性的基本原理。
同时．
由于修饰剂的屏障效应，
使蛋白质不易受到各种蛋
白酶的攻击，降解速率明显降低。有 利于药用蛋白活性的发挥。目前研究表明。
PEC
、人血
清蛋白、聚丙氨酸在消除或降 低酶抗原性上效果明显。另外，
PEC
修饰超氧化物歧化酶活力
保持
51％，在血液中停滞时间延长，抗炎活性提高⑤。

二、酶工程技术在农业中的应用

由于酶制剂主要作为催化剂与添加剂使用，
从而带动了许多产业的发展。
应用酶工程对
农产品进行深加工，是人们努力的一个方向。乳制品加工则需要用凝乳酶和乳糖酶。此外，
酶工 程在饲料加工领域也有重大应用。

1
、酶工程应用于农产品的深加工
利用
α
-
淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡萄糖异构酶的催化功能，以玉米淀粉等为原料 生产
高果糖浆等。
乳制品加工则需要用凝乳酶和乳糖酶。
农副产品的加工和综合利用需 要用纤维
素酶、果胶酶和木质素酶。此外，从木瓜中提取的木瓜蛋白酶，提高活性和固定化以后，可以被用来酿制啤酒和制造果汁。

2
、酶工程在用农产品开发生物活性肽方面的应用

以前，
人们认为 氨基酸是人体吸收蛋白质的主要途径，
随着研究发现，
蛋白质经消化道
中的酶水解后，
主要以小肽的形式吸收，
比完全游离的氨基酸更易吸收利用。这一发现，启
发了科研工 作者采用酶工程技术用蛋白质生产生物活性肽的新思路。
⑥生物活性肽是蛋白质
中
2
0
种天然氨基酸以不同排列组合方式构成的从二肽到复杂的线性或环形结构的不同肽类
的总称，
是源于蛋白质的多功能化合物。
活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，
易 消化
吸收，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用，且食用安全性高。
生物活性肽主要是通过酶法降解蛋白质而制得。目前已从大豆蛋白、玉米蛋白、牛奶蛋白、
水产蛋白的酶 解物中制得一系列功能各异的生物活性肽。

3
、酶工程在饲料工业中的应用

动物体由于不能分泌分解纤维素、半纤维素、木质素、果胶等植物细胞壁物质的酶系，
因此动物 自身不能消化利用这些物质，
只能通过瘤胃和大肠微生物利用上述部分物质。
植物
细胞 壁非淀粉多糖降解酶可降解畜禽消化道内的非淀粉多糖，
降低肠道内容物的粘性，
促进
营养物质的消化吸收，减少畜禽下痢，从而促进畜禽生长和提高饲料利用率。据报道，
利用
纤维 素复合酶作为半干贮添加剂可提高半干贮饲料的营养成分。
蛋白质含量提高，
粗纤维含
量下降，半干贮品质得到改善，获得了色、味、嗅、质地及完好率均为上乘的优质半干贮饲
料，
并可抑制霉菌生长、
防止腐败和延缓二次发酵，
提高了半干贮饲料的完好率和利用率⑦。

三、酶工程技术在食品工业中的应用

酶工程技术广泛应用于食品添加剂生产，< br>不断开发新酶源，
研制新产品，
固定化酶反应
器使生产连续，设备小型化，生产 成本降低，产品易纯化，收率提高。酶工程技术在这个生
产领域显示了很大的使用价值和应用潜力。
1
、食品加工中的应用


现代酶工程属于高新技术，其技术 先进，厂房设备投资少，工艺简单、能耗低、产品收
率高、
效率高、
经济效益大。利用微生物发酵和基因工程技术可以获得能在极酸性和极碱性
的环境中工作的酶，
用于食品 生产可取得许多意想不到的结果。
其在食品加工中可应用于乳
品加工、蛋白质加工和酿酒工业等 。

2
、乳品加工中的应用


固定化技术是用物理或化学 方法限制或定位在某一特定空间范围内，
保留酶固有的催化
活性和存活力。
由于其可被 重复连续使用，
此项技术已在乳品工业中得到广泛应用，
如乳糖
水解。
因为乳 糖中含有葡萄糖和半乳糖，
在世界许多人群中，
特别是亚洲人群存在对乳糖有
不适应现 象，用固定化的
β
半乳糖苷酶对乳糖进行水解，则可消除乳糖不耐症的现象。
[5]< br>此外还可应用于牛乳过敏症防治、
综合利用乳清制造乳酸、
乙酸工艺等。
杨君等 应用海藻酸
钠—壳聚糖固定化乳酸菌进行发酵乳清饮料研究。
结果表明，
固定化乳酸菌 产酸和耐酸能力
强，菌种活力持久并可多次重复利用。

SPR
生物传感器技 术与传统的相互作用分析技术相比较
,
具有高灵敏度、免标记、实时
检测、耗样量极少 、非破坏性及高选择性等优点
,
现已发展成为一门非常有用的传感检测技
术。
其可用来检测食品中营养成分和有豁成分的含量、
食品新鲜与成熟度等，
食品中毒素的
检测，
食品添加剂分析等。乳品工业中的质量控制、浓度分析、污染物检测等方面成为乳品
集团 和广大人民高度关注的问题
,
也成为生物传感器飞速扩大的应用领域之一。


抗生素在养牛业的广泛应用
,
不可避免地造成牛乳中抗生素残留。
其中具有< br>β
-
内酰胺环
的抗生素如青霉素
G
、阿莫西林、氨苄西林等在 乳牛养殖业中常用于治疗乳牛乳房炎
,
尤其
是青霉素
G
由于其廉价和 广谱抗菌性而被频繁地超剂量使用
,
因此导致了牛乳中高浓度的青
霉素
G残留。抗生素残留不仅影响乳品加工业
,
更对人的健康造成影响。因此，科学家们运
用
SPR
技术对牛乳中的抗生素进行了检测，
Ferguson
等利用SPR
传感器准确的检测牛奶中
链霉素和二双氢链霉素的残留
[7];Giuse ppe
等采用
SPR
生物传感器检测牛奶中残留抗生素
β
-
乳胺
,
检出限为
2
μ
g/L,
每次检样也仅需
10 min
。

3
、蛋白质加工中的应用


蛋白酶能 将蛋白质水解为肽和氨基酸，提高和改善蛋白质的溶解性，乳化性，起泡性，
粘度、
风味等。< br>利用蛋白酶制剂可以避免酸水解，
碱水解对氨基酸的破坏作用，保证蛋白质
营养价值不受 影响。
在豆乳的生产中，传统工艺中存在着原材料利用率低、
稳定性差、
复溶
性不好等缺点。
利用蛋白酶的作用，
豆乳中的蛋白质和碳水化合物被降解，
这样就可以 提高
原材料利用率，增加产品稳定性，改进产品的营养价值。


伴肌动蛋白
(Nebulin)
是存在于肌原纤维肌小节中的一种大分子量蛋白。作为高分子量
肌 原纤维结构蛋白，
伴肌动蛋白在鱼体肌肉弹性的形成及品质变化过程中的作用具有较高的
研究价 值。
近年，
杜雪莉等采用
Sephacryl S-400
凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法，
首