女性荷尔蒙是什么各 种 转 染 方 法 比 较

2021年1月28日发(作者：额头痘痘)
各

种

转

染

方

法

比

较

原理


的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细
胞内吞


内吞


主要应用


特点

主要的厂家及产品

瞬时转染

相对简便、重复比磷酸钙好
,
但对细胞有一
Sigma- Aldrich
(DEAE-Dextran
定的毒副作用
,
转染时需除血清且一般只用
Transfection Kit)
于
BSC-1,CV-1,COS
细胞系

染瞬转染

操作简便但重复性差
,
有些细胞不适用

细胞建议用
CSCL
梯度离心，转染是拷贝
数较多

转染方法


E
－葡聚糖法

带正电的
DEAE-
葡聚糖与核酸带负电
磷酸钙法

磷酸钙
DNA
复合物吸附细胞膜被细胞
稳定转染
,
不适用于原代 细胞
（所需的
DNA
浓度较高）
,
GIBCO BRL

，
Promega

离子脂质体法

带正电的脂质体与核酸 带负电的磷酸基
稳定转染
,
使用方法简单，可携带大片段
DNA
，通 用
Invitrogen
（
Lipofectamine 2000
，
核与细胞膜上的唾液酸残基的负电核结
所有细胞

种类型的细胞，
没有免疫原性。
虽在体外基
Plus
，
Cell fectin
）

合；另一种解释是通过细胞是内吞作用
而被进入细胞。(
若
DNA
浓度过高，中
和脂质体表面电核，而降低了与细胞的
结合能力
)

团形成复合物，然后脂质体上剩余的电
瞬时转染
,于各种类型的裸露
DNA
或
RNA
，
能转染各
Lipo fectamine
，
Lipofectin
，
Lipofect
因 转染中有很高的效率，
但在体内，
能被血
Roche
（
Dosper
，
DOTAP
，
FuGEN
炎反应，
导致高水平的毒性，< br>这在很大程度
GeneLimo Super
）

上限制了其应用

清清除，
并在肺组织内累积，
诱发强烈的抗
CPG

Biotech Co
（
GeneLimo Plus
Promega
（
Transfast
，
Tfx
，
Transfe
离子聚 合物

带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基
稳定转染
,
除了具有阳 离子脂质体的转染效率高，
操作
Sunma
(
梭华－
Sofast)
团形成带正电的复合物后与细胞表面带
瞬时转染
,
简单，适用范围广，
重复性好等特点外，还
Qbiogene
（
jetPEI?
）

负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞
所有细胞


具有在体内，< br>转染效率高，
细胞毒性低等特
Qiagen
(SuperFect
，< br>Polyfect
）

作用进入细胞。

(RNA)

点，是新一代的转染试剂。

毒
逆转录病毒
通过病毒中膜糖蛋白和宿 主细胞表面的
稳定转染
,
可用于难转染的细胞、
原代细胞，
体内细胞
中国科学院典型培养物保藏委员会

受体相互作用而进入宿主细胞，之后反
特 定宿主
等
,
但携带基因不能太大（
<8kb
）
,
细 胞需处
转入酶启动合成
DNA
并随机整合到宿
细胞

主基因组中

腺病毒
(
双链
先和细胞表面的受体结合，继而 在
α
v
瞬时转染
,
可用于难转染的细胞
,
需考虑安 全因素

DNA)

整合素介导下被细胞内吞

特定宿主
细胞

染，
稳定转
细胞系以及原代细胞

染

瞬时转染

动物的胚胎细胞

高脉冲电压破坏 细胞膜电位，
DNA
通过
稳定转染
,
适用性广，
除了质粒外 ，
还可转染大的基因


膜上形成的小孔导入


瞬时转染
,
组
（
>65kb
）
但细胞致死率高，
D NA
和细胞
所有细胞


用量大，

需根据不同细胞类型优化电穿孔
实验条件，拷贝数较少
1-20

分裂期
,
需考虑安全因素

导

stic
颗粒传递
将
DNA
用显微重金属颗粒沉淀，
再将包
瞬时性转
可用于：
人的表皮细胞，纤维原细胞，
淋巴


击法）

DNA
在胞内逐步释放，表达


（基因枪粒子轰
被好的颗粒用弹道装置投射入细胞，
显微注射法


用显微操作将
DNA
直接注入靶细胞核


稳定转染
,
转染细胞数有限
,
多用于工程改造或转基因


电穿孔法