郑州治疗脱发生物学常用染色液汇总

2021年1月27日发(作者：少儿脑瘫)


常用染料介绍

（一）天然染料


1
、苏木精


苏木精是从南美的苏木
（热带豆科植物）< br>干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，
是最常用的染
料之一。
苏木精不能直接染色 ，
必须暴露在通气的地方，
使他变成氧化苏木精
（又叫苏木素）
后才能使用， 这叫做“成熟”
。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力
愈强。
被 染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒
染剂。常用的 媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。





苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，
易溶于酒精，
微溶于水和甘油，
是染细胞核的 优良
材料，
他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因 处理的情
况而异，
用酸性溶液
（如盐酸—酒精）
分化后呈红色，
水洗 后仍恢复青蓝色，
用碱性溶液
（如
氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。

2
、洋红

洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后 ，磨成粉末，
提取出虫红，再用明
矾处理，除去其中杂质，
就制成洋红。单纯的洋红不 能染色，
要经酸性或碱性溶液溶解后才
能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有 氨水、硼砂等。

洋红使细胞核的优良染料，
染色的标本不易褪色。
用作切片 或组织块染都适宜，
尤其适宜于
小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持 几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后
再用。

（二）人工染料


人工染料，
即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，
应用极广。
它们 的缺点是经日光照射容易
褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日 光直射，也
能经几年不褪色。

1
、酸性品红


酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（
0.3%
）
。他是良好 的细胞制
染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。

组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，
可增 强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，
所
以染色过度，易在自来水中褪色。

2
、刚果红


刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水 喝酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作
指示剂。
他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染 料的衬垫剂。
他用来染细胞质时，
能把
胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制 片中用来染神经轴、弹性纤维、
胚胎材料等。刚果红
可以跟苏木静作二重染色，
也可用 作类淀粉染色，
由于他能溶于水和酒精，
所以洗涤和脱水
处理要迅速。

3
、甲基蓝


甲基蓝是弱酸性染料，
能溶于水和酒精。< br>甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
他跟伊
红合用能染神经细胞，
也是细 菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色
剂。甲基蓝极易氧化，因此用他染 色后不能长久保存。

4
、固绿

固绿是酸性染料，能溶于水（溶解 度为
4%
）和酒精（溶解度为
9%
）
。固绿是一种染含有浆
质的纤维素细胞组织的染色剂，
在染细胞和植物组织上应用极广。
他和苏木精、
番红并 列为
植物组织学上三中最常用的染料。



5
、苏丹Ⅲ


苏丹Ⅲ是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和 酒精（溶解度为
0.15%
）
。苏丹Ⅲ是脂
肪染色剂。

6
、伊红


这类染料种类很多。常用的伊红
Y
， 是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于
水（
15
摄氏度是溶解度达44%
）和酒精（溶于无水酒精的溶解度为
2%
）
。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。

7
、碱性品（复）红


碱性品红是碱性染料，
呈暗红色粉 末或结晶状，
能溶于水
（溶解度
1%
）
和酒精
（溶解度8%
）
。
碱性品红在生物学制片中用途很广，
可用来染色胶原纤维、弹性纤维、
嗜复红性颗粒和中枢
神经组织的核质。
在生物学制片中用来染维管束植 物的木质化壁，
又作为原球藻、
轮藻的整
体染色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆 菌。在

尔根氏反应中用作组织化学试剂，已
核查脱氧核糖核酸。

8
、结晶紫


结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度
9%
）和酒精（溶解度
8.75%
）
。结晶紫在细胞学、组
织学和细菌学 等方面应用极广，
是一种优良的染色剂。
他是细胞核染色常用的，
用来显示染
色体的中心体，
并可染淀粉、纤维蛋白、
神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时，
用它能得到良好的结果。
用番红和结晶紫作染色体的二重染色，
染色体染
成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。
用结晶紫染纤毛 ，效
果也很好。用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。

9
、龙胆紫


龙胆紫是混合的碱性染料，
主要是结晶紫和 甲基紫的混合物。
在必要是，
龙胆紫能跟结晶紫
互相替用。医药上用的紫药水，主要成 分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫。

10
、中性红

< br>中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度
4%
）和酒精（溶解度
1.8%
）
。它
的碱性溶液中呈现黄色，
在强碱性溶液中呈蓝色，
而 在弱酸性溶液中呈红色，
所以能用作指
示剂。
中性红无毒，
常做活体染色的染 料，
用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内
含物等。陈久的中性红水溶液，用作显示尼 尔体的常用染料。

11
、番红


番红是碱性染料，能溶于水和酒精。
番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料，
能染细胞
核、染色 体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织，还能染孢子囊。

12
、亚甲蓝或美蓝

亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水（ 溶解度
9.5%
）和酒精（溶解度
6%
）
。
亚甲蓝是动物学 和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。


13
、甲基绿

甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度8%
）和酒精（溶解度
3%
）
。甲基
绿是最有价值的细胞和染色 剂，
细胞学上常用来染染色质，
跟酸性品红一起可作植物木质部
的染色。

1.
碘－硫酸法

植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素，
纤维素被 硫酸水解后，
遇碘呈蓝色反应。
因此用碘－
硫酸法可鉴定细胞壁的成分。

试剂配制方法：

1%
碘液

将
1.5
克碘化钾溶于
100
毫升的蒸馏水中，待完全溶解后，加入
1
克碘，震荡溶
解。



66.5%
硫酸

7
份浓硫酸加入
3
份蒸馏水配制而成。
配制时要将浓硫酸慢慢地加入水中，
并
不断地用玻璃棒搅拌，否则会因急剧发热，而使容器炸裂 。

2.
苏丹Ⅲ反应

苏丹Ⅲ可将细胞中脂肪、
栓质、< br>角质染为桔红色，
因此可用此染料显示出上述物质在细胞中
的分布和位置。

配制方法：
将苏丹Ⅲ

（或苏丹Ⅳ）
染料
0.1
克，
溶于
10
毫升
95%
酒精中，
然后加入
10
毫
升甘油。

3.
间苯三酚反应法

间苯三酚反应是植物显微化学中确定木质化细胞壁的最常用和最简单 的方法。
这一反应的原
理是当间苯三酚在酸性环境下与细胞壁中的木质素相遇时，
发生 樱桃红色或紫红色反应。
其
方法是将要鉴定的切片先用一滴
1mol/L
盐 酸浸透（间苯三酚要在酸性环境下才能与木质素
起作用）
，
然后滴一滴
5-1 0%
间苯三酚的
85%
酒精溶液，
木质化的细胞壁即发生颜色反应。

4
．碘液测试淀粉法

淀粉遇碘呈蓝色反应，它是鉴定淀粉的最常用方法。

碘液配制方法：
将
2
克碘化钾放入
5
毫升蒸馏水中，< br>加热使其完全溶解；
然后加入
1
克碘，
完全溶解后用蒸馏水稀释至300
毫升，放入具有毛玻璃塞的棕色玻璃瓶中，置于暗处保存。

测定淀粉时，可将上述溶液稀释
2-10
倍，使染色不致过深，效果更好。

5.
压片法常用的染料

(1)
醋酸洋红

为压片法中最常用的染料。

配制方法是：先将
100
毫升
45%
醋酸水溶液放于烧瓶中煮沸，移去火焰，停止加热。然后
缓慢加入
1
克洋红粉末，全部加入后再煮沸
1-2
分钟。此时可将一枚生锈铁钉用棉线悬入
溶液中约
1
分钟后取出（铁为媒染剂）
。静置
12
小时后经过过滤，放入磨口玻璃塞棕色瓶
中保存备用。

(2)
石炭酸
---
品红

为近年创用的一种优良核染色剂，将细胞核和染 色体染为红紫色，细胞
质一般不着色，背景清晰。

其配制方法有二：

配方Ⅰ：

原液
A
：取
3
克碱性品红溶于
100
毫升的
70
％酒精中（此液体可长期保存）
。

原液
B
：取
10
毫升原液
A
，加入
90
毫升
5%
的石炭酸
(
酚
)
水溶液中
(< br>可保存两周
)
。

染色液：取
55
毫升原液
B
加
6
毫升冰醋酸和
6
毫升
37%
甲醛。

此染色液因含有较多的甲醛，
可使原 生质体硬化，
而能保持其固有的形态。
但也因此不易使
组织软化，
因而不太适 用于植物组织的染色体压片染色
（本染色液适于植物原生质体培养中
使用）
。
在此基础上加以改进的配方Ⅱ，
则可普遍地用于一般植物组织的染色体压片的染色。

配方Ⅱ：

取配方Ⅰ中的染色液
20
毫或加
80
毫升
45%
醋酸和
1.8
克山梨醇。

染色液配制后为淡品红色，如立即使用染色较浅。放置
2
周后，染色能力显著增强，而且
放置时间越久，染色效果越好。

6
．铬酸－硝酸离析法

为了观察一个细胞完整的立体形态结构，
可 以用一些化学药品把细壁中的中层物质
（果胶质）
溶解，使细胞分离散开，便于观察。

离析前先把材料洗净，
用刀切成
1-2
毫米宽的狭条
（如叶片）
或切成火柴棍粗细的长约
1
厘
米 的小条
(
如根或茎
)
。然后把切好的材料放进小玻璃瓶中，加入离析液（加入 量约为材料的
20
倍）
，塞紧瓶塞，放于
30-40
℃

温箱中。浸渍时间因材料性质而异，叶片和幼嫩的根茎
组织
3-4
小时即可，而有些次生结构（如木质部）则需要更长的时间。离析情况应随时检

< br>查，检查的方法是取少许离析材料，放在载玻片上，加一滴水，盖上盖玻片，然后用解剖针
尖端轻 轻敲打，如果材料分离则表明浸渍时间已够。浸渍时间超过一天以上时，应更换离

析液一次。离析时间已够的材料，用水洗净后放入
70%
酒精中保存。

离析液配方：

10%
铬酸

1
份

10%
硝酸

1
份

两种溶液应在使用时才混合，混合均匀后再使用。


二、常用染色液的
配制


1
、吕氏

(Loeffer )
碱性美蓝染液




A
液：


美蓝（
methylene blue
）


95%
乙醇



B
液：


KOH

蒸馏水




分别
配制
A
液和
B
液，配好后混合即可。



2
、齐氏（
Ziehl
）石炭酸复红染色液





A
液：


碱性复红（
basic fuchsin
）


95%
乙醇




B
液：


石炭酸


蒸馏水

5.0 g
95 mL
0.3 g
10mL
0.01g
100mL
0.06g
30mL


< br>配制
方法：将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入
95%
乙醇，继续研磨使其溶 解，配成
A
液。





将石炭酸溶于水中，配成
B
液。





混合
A
液及
B
液即成。通常可将此混合液稀释
5~10
倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。


3
、革兰氏（
Gram
）染色液



（
1
）．

草酸铵结晶紫染液



A
液：


结晶紫（
crystal violet
）

2g



95%
乙醇



B
液：


草酸铵（
ammonium oxlate
）


蒸馏水




混合
A
液及
B
液，静置
48h
后使用。





（
2
）．

卢戈氏（
Lugol
）碘液



碘片


碘化钾


蒸馏水

20mL
0.8g
80mL
1g
2g
300mL



配制
方法：先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶 液中，待碘全溶后，加足水分既成。




（
3
）．

95%
的乙醇溶液





（
4
）．

番红复染液



番红（
safranine O
）


95%
乙醇




取上述配好的番红乙醇溶液
10mL
与
80mL
蒸馏 水混匀既成。



4
、芽孢染色液



（
1
）．

孔雀绿染液



孔雀绿（
malachite green
）


蒸馏水




（
2
）．

番红水溶液



番红


蒸馏水




（
3
）．

苯酚品红溶液



碱性品红


无水乙醇

11g
100mL
0.5g
100mL
5g
100mL
2.5g
100mL



配制
方法：取上述溶液
10mL
与
100mL5%
的苯酚溶液混合，过滤备用。




（
4
）．

黑色素（
nigrosin
）溶液



水溶性黑色素


蒸馏水

10g
100mL





配制
方法：称取
10 g
黑色素溶于
100mL
蒸馏水中，置沸水浴中
30min
后，滤纸 过滤两次，补充水到
100mL
，
加
0.5g
甲醛，备用。



5
、荚膜染色液





（
1
）．

黑色素水溶液



黑色素


蒸馏水


福尔马林（
40%
甲醛）

5g
100mL
0.5mL



配制
方法：将黑色素在蒸馏 水中煮沸
5min
，然后加入福尔马林作防腐剂。




（
2
）．

番红染液





与革兰氏染液中番红复染液相同。



6
、鞭毛染色液





（
1
）．

硝酸银鞭毛染色液




A
液：


单宁酸


FeCl3

蒸馏水


福尔马林（
15%
）


NaOH
（
1%
）

5g
1.5g
100mL
2mL
1mL



冰 箱内可以保存
3~7
天，延长保存期会产生沉淀，但用滤纸除去沉淀后，仍能使用。




B
液：


AgNO3

蒸馏水

2g
100mL



配制
方法：待
AgNO3
溶解后，取出
10mL
备用，向其余的
90mL AgNO3
中滴入
NH4OH
，使之成为很浓厚
的悬浮液，再继续滴加
NH4OH
，直到新形成的沉淀又重新刚刚溶 解为止。再将备用的
10mL AgNO3
慢慢地滴入，则
出现薄雾，但轻轻摇动后， 薄雾状沉淀又消失，再滴入
AgNO3
，直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。冰< br>箱内保存通常
10
天内仍可使用。如雾

重，则银盐沉淀出，不宜使用。





（
2
）．

Leifson
氏鞭毛染色液





A
液：


碱性复红


95%
乙醇

1.2g
100mL





B
液：


单宁酸


蒸馏水




C
液：


NaCl

蒸馏水

1.5g
100mL
3g
100mL



临用前将
A
，
B
，
C
液等量混合均匀后使用。三种溶液分别于室温保存可保存几周，若分别置冰箱保存，可保存
数月。混合液装密封瓶内置冰箱几周仍可使用。


（六）染色剂

1
、细菌染色剂

配方一

齐氏（
Ziehl
）石炭酸品红染液

甲液

取石炭酸
5
克，溶解在
95
毫升蒸馏水中。

乙液

取
0.3
克碱性品红，放入研钵中研磨，逐渐加入
10
毫升
95%
酒精，继续淹没，使它
溶解。

将甲液和乙液混合后，摇匀，过滤，装瓶，备用。

配方二

罗氏（
Loeffler
’
s
）美蓝染液

甲液

取
5
克美蓝，溶于
100
毫升
95%
酒精中，制成美蓝—酒精饱和液。

乙液

取氢氧化钾
0.01
克（或
1%
氢氧化钾溶液
1
毫升）
，溶液也可用于放线菌染色，
0.1%
浓度可用于酵母菌染

色。

配方三

革兰氏（
Gram
’
s
）染液

用此液染色因先用 甲液染色，再加乙液固定，
用丙液处理，最后用丁液复染。四种液体的配
方如下：

甲液（结晶紫液）

（
1
）结晶紫

2
克

95%
酒精

20
毫升

（
2
）草酸铵

0.8
克

蒸馏水

80
毫升

使用钱江（
1
）、
（
2
）液相混，静置
48
小时后使用。

乙液
(
碘液
)
碘

1
克

碘化钾

2
克

蒸馏水

300
毫升

将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀释至
300
毫升。

丙液

95%
酒精溶液

丁液（番红花红液）

2.5%
番红花红酒精溶液

10
毫升

蒸馏水

100
毫升

2
、细菌特殊染色剂

配方一

芽孢染液

用此配方染色是用甲液染色后，用乙液复染。

甲液

取
5
克孔雀绿，加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到
100
毫升，即成孔雀绿染液。

乙液

取番红花红
0.5
克，加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到
100
毫升，集成
番红花红复染液。

配方二

荚膜染液

此配方先用甲液染色，后用乙液复染。



甲液

取结晶紫
0.1
克，溶于少量蒸馏水后，加水稀释到
100
毫升，再加入
0.25
毫升冰醋
酸一结晶紫染液。

乙液

取硫酸铜（

）
31.3
克，溶于少量蒸 馏水后，加水稀释到
100
毫升，即成
20%
硫酸铜
脱色剂。

配方三

鞭毛染液

甲液

饱和明矾溶液

2
毫升

5%
石炭酸溶液

5
毫升

20%
丹宁酸溶液

2
毫升

乙液

碱性品红

11
克

95%
酒精

100
毫升

使用前取甲液
9
毫升和乙液
1
毫升相混，过滤即可。

3
、植物细胞壁染色剂

配方一

纤维素细胞壁染液（Ⅰ）

取固绿
0.1
克，溶于
100
毫升
95%
酒精中，即成
0.1%
固绿—酒精溶液。

该液能染色纤维素细胞壁，还用于动植物中作浆质染色剂。

配方二

纤维素细胞壁染液（Ⅱ）

氯化锌

20
克

碘化钾

6.5
克

碘

1.5
克

蒸馏水加至
100
毫升

先把氯化锌溶于少 量蒸馏水中，
再加入
6.5
克碘化钾，
在碘完全溶解后，
用蒸馏水稀 释到
100
毫升，即成碘—

氯化锌溶液。

该染液能把细胞壁染成紫色，胞质染成淡黄色，胞核染成棕色。

配方一

纤维素细胞壁染液（Ⅲ）

甲液

取
1
克碘和1.5
克碘化钾，溶于
100
毫升蒸馏水中，即成
1%
碘液。< br>
乙液

取
7
份硫酸和
3
份蒸馏水相混，即 成
66.5%
硫酸溶液。

染色时，在材料上滴加甲液，再加一滴乙液，纤维素细胞壁就染成黄色。

配方四

木质化细胞壁染液（Ⅰ）

硫酸化苯胺（或盐酸话本安）

1
份

蒸馏水

70
份

95%
酒精

30
份

硫酸

30
份

将上述各组分相混，将细胞材料放入混合液里染色，可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。

配方五

木质化细胞壁染液（Ⅱ）

取间苯三酚
4
～
5
克，溶于
100
毫升
95%
酒精中，即成间苯三酚—酒 精液。

先在材料上滴上
1
滴浓盐酸，然后滴上间苯三酚—酒精液
1
滴，木质化的细胞壁就染上樱
红或紫红色。

配方六

木质化细胞壁染液（Ⅲ）

取
1
克番红，溶于
99
毫升蒸馏水中，即成
1%
番红溶液。

4
、细胞质染色剂

配方一

伊红染液

伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。

（
1
）
取
1
克伊红，
溶于
99
毫升蒸馏水中，
即成
1%
伊红水溶液
（市售红墨水内含伊红成分，
可 以用红墨水稀

释液来代替本溶液）
。

（
2
）取
1
克伊红，溶于
99
毫升
70%
酒精中，即成
1%
伊红—酒精溶液。