细胞培养基中的添加剂及其作用

2021年1月25日发(作者：陈志朋)
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在
MEM
中培养的细胞，很可能在
D MEM
或
M199
中同样很容易生长。总之，首选
MEM
做粘附细胞 培养
;RPMI-1640
做悬浮细胞和人
白血病细胞单层培养是一个好的开始，它也 广泛应用于哺乳动物细胞和
杂交瘤细胞
的培养，
如人骨髓瘤细胞、鼠杂交瘤细胞、人白 细胞以及
B
细胞和
T
细胞
;
各种目的无血清培养最好
首选
AIM V(12005)
培养基
(SFM)
。选择细胞的培养基也可 以到
ATCC
上查询，
ATCC
(American Type Culture Collection)
收集了绝大多数细胞的详细资料。打开
ATCC
网页的
Cells and hybridomas
链接，输入细胞名称就可以搜索
ATCC
的细胞数据库。数据库 中有
每一种细胞的详细描述，包括细胞的来源，培养和冻存条件，以及相关文献等资料。
同一种培养基也会因其添加物的不同而应用于不同的
细胞培养
和不同的实验需求，下
面就详细介绍下培养基中各种添加剂的功能。

1. L-
谷氨酰胺
(L- Glutamine)
在
细胞
培养中重要吗
?
它在溶液中不稳定吗< br>?
是细胞生长的必须氨基酸，为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉氨基后，
L-< br>谷氨
酰胺可作为培养细胞的能量来源、
参与
蛋白质的合成
和核酸代谢。
L-
谷氨酰胺在溶液中经过
一段时间后会降解，
降解率随保存温度而变。L-
谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一
些细胞具有毒性。

2. GlutaMAX-I
是什么
?
培养
细胞如何利用
GlutaMAX -I?
这个二肽有多稳定
?
GlutaMAX-I
即谷丙氨酸二肽，是一 个
L-
谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的
alpha-
氨基
用
L-
丙氨酸来保护。一种肽
酶
逐渐裂解二肽，释放
L-
谷氨酰胺供利 用。
GlutaMAX-I
二肽非
常稳定，即使在
121
磅灭菌20
分钟，
GlutaMAX-I
二肽溶液有最小的降解，如果在相同条
件下，
L-
谷氨酰胺几乎完全降解。

3.
培养基
中丙酮酸钠的作用是什么
?
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源 ，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但
是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。

4. Hank′s
平衡盐溶液
(HBS)
和
Earle′s
平衡盐溶液
(EBS)
有什么本质的功能差别
?
HBS
和

EBS
的主要差别在于碳酸氢钠的水平
,
在
Eagle′s (2.2g/L)
中比在
Hanks′
(0.35g/L)
中高。碳酸氢 钠需用高水平的
CO2
平衡，以维持溶液的
PH
值。
Eagle′s
液在空
气水平的
CO2
中，
溶液会变碱，
Hanks′< br>液在
CO2
培养箱中会变酸。
如果希望在
CO2
培养
箱中保存组织，需要用
Eagle′s
液，。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织， 用
Hanks′
液就可以了。

5.
培养液
pH
对细胞生长的影响
?
由于大多数细胞适宜
pH
为
7.2-7.4
，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。
但各种细 胞对
pH
的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对
pH
变动耐受差，无限细 胞系