早孕因子的生物学机制及其作用(精)

2021年1月22日发(作者：酆云鹤)
早孕因子的生物学机制及其作用









[ 10-04-21 14:23:00 ]



编辑：
studa20

























作者：修晓
娜

，史远刚，关伟军，马月辉

【关键词】


早孕因子





早孕因子（
early pregnancy factor,EPF
）是 存在于妊娠早期母体血清
中的一种免疫抑制因子，被认为是热休克蛋白家族成员伴侣蛋白
10< br>（
Cpn10
）
的同系物，在细胞外发挥效应，具有免疫抑制和生长因子的作用 ，嗣后发现它
还对损伤修复过程及一些恶性肿瘤的生长起到支持作用。可用玫瑰花环抑制试
验（
RIT
）做生物学鉴定。但由于其检测方法
RIT
的复杂性及检测效率低等问
题，
EPF
的应用受到了极大限制。近年随着单克隆抗体（
McAb
）技术的不断进
展，
EPF
的检验不仅可作为人类及家畜超早期妊娠诊断的指标，而且 对预测流
产和早期胚胎死亡，迅速鉴定胚胎移植效果以及尽早评价公畜的繁殖能力都有
重要意义 。并且
EPF
对于预测早期胚胎发育情况，帮助了解妊娠母体对胚胎的
识别、免疫耐受 和受精检测等机制提供了可能。我们希望能够制备出
EPF
特异
性
McAb< br>，用于超早孕诊断，以及流产和某些恶性肿瘤的早期诊断及预后判断。




1
早孕因子的来源



长期以来，人们对< br>EPF
的来源及结构做了多方面的研究，认为有一种卵因
子在受精后开始诱导产生
EPF
。
Lash
等［
1
］在不同体外条件如
:
胚胎培养基
（
ECM
）、血小板激活因子（
PAF
）及皮质颗粒释放 培养基（
CGRM
）下刺激动情
期小鼠的卵巢及输卵管以观察是否有
EPF< br>的产生，并用
RIT
检测，结果发现三
种情况均可检测到
EPF
活性，该作用可完全被
BN52021
（一种
PAF
拮抗剂）阻
断 ，认为
PAF
即系这种由受精卵释放的促使
EPF
合成起始的卵因子。他们还 发
现，卵巢对上述三种刺激均有反应，而输卵管则无，表明了卵巢是产生
EPF
的最初场所。
EPF
的产生具有两个阶段也是人们所共同支持的观点，第一阶段为
着 床前期，为了确定第二阶段是在着床时还是在囊胚期，
Lash
等［
2
］利用 红
鹿受精卵在输卵管内转运时间较长这一特性，通过监测其血清内
EPF
活性变
化，证实
EPF
的合成与囊胚形成密切相关。
Ito
等［
3
］对胎牛、小牛、动情期
牛及妊娠期牛血清与体外受精的牛卵细胞进行共培养，用
RIT检测
EPF
活性，
结果显示
EPF
活性来源于受精卵细胞。Aranha
等［
4
］以
35S-
蛋氨酸标记从孕
母体 内获取的淋巴细胞并培养使其增生，发现在妊娠期间淋巴细胞内蛋白合成
增加，经检测发现其中一种具有
EPF
活性的分子。实验组
35S-
蛋氨酸在淋巴细
胞中含量明显高 于对照组，且在妊娠前两个阶段呈逐渐增高的趋势，在妊娠晚
期降到接近对照组的水平。表明
E PF
有可能来源于孕妇外周血的淋巴细胞。有
学者利用类固醇激素诱导培养动情期小鼠卵巢及输 卵管检测是否有
EPF
合成，
以探知卵巢激素对
EPF
合成的重要意 义。发现在
17
β
-
雌二醇、孕激素及睾酮
存在条件下对动情期小鼠 卵巢及输卵管进行培养，无
EPF
合成，而在
ECM
及
PAF
条件下培养经
17
β
-
雌二醇、孕激素二者预处理的相同组织则可检测到< br>EPF
活性，证实
EPF
的合成起始主要依赖于一个合适的激素环境［
5
］。




2
早孕因子分泌机制和作用机制




2.1
分泌机制关于
EPF
的分泌机制已报道了几种假设，其中以
Lash
等
及
Orozco
等的研究最为权威。
Lash
等［
6
］在 不同体外条件如胚胎培养基
（
ECM
）、血小板激活因子（
PAF
） 及皮质颗粒释放培养基（
CGRM
）下刺激动情
期小鼠的卵巢及输卵管时，结果发现三 种情况均可检测到
EPF
活性，该作用可
完全被
BN52021
（一 种
PAF
拮抗剂）

阻断，认为
PAF
即是这种由受精卵 释放的
促使
EPF
合成起始的“卵因子”。他们还发现，卵巢对上述三种刺激均有反< br>应，而输卵管则无，表明了卵巢是产生
EPF
的最初场所。
Orozco
等［
7
］给成
年雌鼠注射合成的
PAF
，
1 h
内动物血清表现出
EPF
活性，推测源于胚胎的
PAF
可能就是触发着床前产 生血清
EPF
的动因。而在
ECM
及
PAF
条件下培养经< br>17
β
-
雌二醇、孕激素二者预处理的相同组织，可检测到
EPF活性，证实
EPF
的
合成起始主要依赖于一个合适的激素环境。妊娠时产生的EPF
的来源不同，早
期
EPF
（母体
EPF
）系在植 入（
pre-implantation
）

及围植入（
peri-
implantation
）时产生，而晚期（胎儿性
EPF
）则自围植入期 开始一直持续至
妊娠中期，但对附植前血清
EPF
的体内来源说法不一，而普遍认为< br>EPF
的产生
与卵巢、输卵管、受精卵、胎盘、垂体等有关。




2.2
作用机制在
EPF
作用机制的研究中，科学家 们也做出了许多成绩。
EPF
通过至少两种淋巴因子
EPF-S1
和
EPF-S2
的调节发挥作用，前者是受主要
组织相容性复合物（
MHC
）限 制的，后者不受
MHC
的限制，并且已经分离纯化出
EPF-S1
的类似物， 具有生物活性，
EPF-S1
可诱导产生
EPF-S2
。现在普遍认为
EPF
是热休克蛋白家族成员伴侣蛋白
10
（
Cpn10
）的同系 物，但
Somodevilla
Torres
等［
8
］证实
Cpn10
和
EPF
在作用机制上有区别。在
Lewis
鼠的皮肤 移
植实验中，在移植部位注射
rEPF
后，能延长皮肤的存活时间，表明
EP F
具有免
疫抑制的调节作用，抑制了机体的免疫排斥作用［
9
］。
Z hang
等用
rEPF
处理
患有脑脊髓炎（
exper imental autoimmune encephalomyelitis
，
EAE）的小
鼠，进行分析检测，发现
EPF
抑制了细胞调节的免疫反应，并可减少中枢 神经
系统的淋巴细胞和巨噬细胞，提出
EPF
可呈剂量依赖性地抑制混合淋巴细胞反< br>应（
MLR
）的识别相，
EPF
也可诱导非黏附性的
Thy1 2+
、
Lyt-
、
Lyt2+
调节细
胞（即抑制细胞） ，
EPF
的免疫效应不受
MHC
所限制，小鼠在胚胎植入前给予
抗< br>EPF
抗体，可减少植入数，提示
EPF
在生殖过程的这一阶段具有重要意义。
EPF
有调节
CD4+T
细胞依赖的免疫反应作用［
10
，
11
］，抗
CD4+
能抑制绵羊红
细胞和其在
T
细 胞上受体的相互作用，
EPF
是通过抗
CD4+
来发挥其抑制作用
的 。在小鼠实验中表明它具有抑制迟发型过敏反应，并发现它会对一些淋巴细
胞有约束作用，推测它通过约 束
CD4+T
细胞来发挥作用。经分离
T
细胞和单核
细胞，并用EPF
标记，发现
EPF
会约束
CD4+
、
CD8+< br>、
CD14+
和
CD56+NK
细胞，
但是
EPF< br>作用的细胞表面分子仍没有研究清楚。




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早孕因子的生物学作用