2018年试管婴儿多少钱实验十六、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用

2021年1月19日发(作者：去除粘在离心试管底部的沉淀)
实验十六
:
丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用

【实验名称】
：
丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用

09
救援一班


第三大组


李岚宇


2009222336










































室温：
25
℃

（一）实验目的：
1
、学习和掌握竞争性抑制作用的特点。

















2
、观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。

（二）
实验原 理：
化学结构与酶作用的底物结构相似的物质，
可与底物竞争结合酶的活性中
心，使酶的活性降低甚至丧失，
这种抑制作用称为竞争性抑制作用。
琥珀酸脱氢酶是机体内参与三羧酸循环的一种重要的脱氢酶，其辅基为
FAD
，如心肌中的琥珀酸脱氢酶在缺氧的
情况下，可使琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下之氢可将蓝色的甲烯蓝还原成无色的甲烯白。
这样 ，便可以显示琥珀酸脱氢酶的作用。


丙二酸的化学结构与琥珀酸相似，
它 能与琥珀酸竞争而和琥珀酸脱氢酶结合。
若琥珀酸脱氢
酶已与丙二酸结合，
则不能再催 化琥珀酸脱氢，
这种现象称为竞争性抑制。
如相对地增加琥
珀酸的浓度，则可减轻丙二 酸的抑制作用。


（三）实验材料与仪器
：

1
器材


大白鼠、手术剪、镊子、磁盘、匀浆器、量筒、烧杯、纱 布、滤纸、试管及试管
架、恒温水箱、电热水浴锅

2
试剂


0.2mol/L
琥珀酸溶液、
0.02mol/L
琥珀酸溶液、
0.2mol/L
丙二酸溶液、
0.02mol/L
丙二酸溶液、
1 /15mol/L
磷酸缓冲液、
0.02
％甲烯蓝、液体石蜡。





（四）实验步骤
:

1
、酶提取 液的制备：去大白鼠的肝脏、心脏、肾脏，用冷水洗
3
次，加入
1/15mol/L< br>磷酸
缓冲液
pH
在
7.4
。
在匀浆器中进行匀浆，
然后用纱布过滤，
用干净的烧杯收集过滤的备用。

2
、取试管
6
支，编号，在按图步骤操作，


酶提

取液
（
ml
）

试管
1
试管
2
试管
3
试管
4
试管
5
试管
6
2
2
2
2
-
2
磷酸
缓冲
液
（
ml
）

-
-
-
-
2
-
0.2mol/L
琥珀酸
（滴）

8
8
8
-
8
8
0.02mol/
L
琥珀酸
（滴）

-
-
-
8
-
-
0.2mol/L
丙二酸溶
液（滴）

-
-
8
8
-
-
0.02mol/L
丙二酸溶液
（滴）

-
8
-
-
-
-
蒸馏
水
（滴）

8
-
-
-
8
8
甲烯
蓝
（滴
）

3
3
3
3
3
3
3
分
33
秒

5
分
30
秒

6
分
04
秒

7
分
28
秒

无限大

无限大

褪色时间
（分钟）

试管
6
，在酶提取液先在
10 0
℃的水浴加热煮沸
5min
。

各管溶液立即混均匀，
沿 试管壁加入液体石蜡，
约
0.5cm
，
各管置于
37
℃的水 浴中保温，
切勿摇动试管，随时观察比较各试管颜色的变化，记录褪色时间。


（五）实验结果记录：