试管婴儿胚胎分级ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程

2021年1月19日发(作者：试管移植411的胚胎)
ABO
及
RhD
血型鉴定试验标准操作规程





(
一
)
检验目的





检测红细胞表面
ABO
血型抗原、
RhD
抗原 及血清
(
或血
浆
)
中抗
A
、抗
B
抗体，确定受检者
ABO
及
RhD
血型。





(
二
)
检验原理





1.
手工试管法、玻片法或纸板法


利用标 准
IgM
抗
A
／
B
血清鉴定红细胞表面
ABO抗原即正定型，利用已知
ABO
血型反定型红细胞鉴定同一标本血清
(
或 血浆
)
中的抗
A
／
B
抗体即反定型，
综合正反定型 结果确定受检标本
ABO
血型；
利用标准
IgM
抗
D
直接鉴定
RhD
血型。







2.
微柱凝胶法


ABO
／
RhD< br>卡的微管中装填有葡聚糖凝
胶颗粒和抗
A
、抗
B
、抗
D
标准血清，如果红细胞表面存在
A
或
B
或
D
抗原 ，
就会与对应的抗体发生凝集反应，
凝胶颗
粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细 胞在离心力的作
用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细
胞则可以通过凝胶颗 粒到达微管底部。





3.
玻璃珠微柱法


ABO
／
RhD
卡 的微管中装填有玻璃微
珠和抗
A
、
抗
B
、
抗
D
标准血清，
如果红细胞表面存在
A
或
B
或
D< br>抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具
有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离 心力的作用下
通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红
细胞则可以通过玻璃微 珠之间的微小空隙到达微管底部。





(
三
)
适用范围




适用于手工、半自动、全自动
ABO
血型及
RhD
血型鉴
定试验 。





(
四
)
设备性能参数





各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说
明书。





(
五
)
器材与试剂





1.
器材
WADiana
全自动血型配血系统、
SWING- SAXO
血型配血系统、
Techno
全自动血型配血系统、
Othro AutoVue
Innova
全自动血型配血系统、
B600-A
型低速离 心机、
KA-2200
血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料
硬质试管(100m
m
×
12mm
和
75m
m
×
l2mm)
、
血型鉴定专用纸
板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。





2.
试剂
Diana DG Gel ABO-CDE
血型卡、
DiaMed ABO
／
RhD
血型卡、< br>OTHROBiovueABO
／
RhD
血型卡、
2
％氢氧化
钠溶液、
生理盐水、
抗
A
／
B
标准血清、
抗
D
标准血清、
3
％～
5
％反定型试剂红细胞、
1
％反定型试剂红细胞。





(
六
)
标本要求




EDTA-K
2
或
EDTA-K
3
抗凝静脉血≥
3ml
经
B600-A
型离
心机在
1760g
条件下离心
5
分钟，
离心后无溶血及明显乳糜。
紧急情况下可以使用抗凝动脉血。





(
七
)
校准步骤





各类血型配血系统的校准操作过程分别见
《
WADiana
全
自动血型配血系统标准操作规程》
《
SWING-SAX O
血型配血
系统标准操作规程》
《
Techno
全自动血型配血系统 标准操作
规程》
《
Othro AutoVue lnnova
全自动血型配血系统标准操作
规程》
。





(
八
)
操作步骤





1.
试管法




(1)ABO
血型正定型试验：①取两支洁净试管，做好标
记，按试管标记向试管中加入抗
A
、抗
B
血清各
1
滴；②向
每管中各加入
1
滴
3
％～
5
％被检红细胞盐水
(
血清或血浆)
悬
液；
③轻轻混合试管内容物，
经
KA-2200
离 心机在
1000g
条
件下离心
15
秒；④结果判断：将试管拿成锐角 ，缓慢倾斜，
使液体通过细胞扣，当细胞不再附着在试管上时，继续缓慢
地倾斜和振摇，直到形 成均匀的细胞悬液或凝集块；⑤记录
结果：记录观察到的凝集程度或溶血程度。用
ABO
反定型
试验进一步验证正定型结果。





(2)ABO
血型反定型试验：①取两支洁净试管，做好标
记，向每管中各加
2
滴被检血清
(
或血浆
)
。②按试管标记向
试管中加入
3< br>％～
5
％
A
型、
B
型试剂红细胞各
1
滴。③轻轻
混合试管内容物，经
KA-2200
离心机在
1000g
条件下离心
15
秒。④结果判断：将试管拿成锐角，缓慢倾斜，使液体通
过细胞扣， 当细胞不再附着在试管上时，继续缓慢地倾斜和