泌乳素高可以做试管吗蛋白质含量测定——双缩脲试剂法-实验申报

2021年1月19日发(作者：深圳和三亚三代试管)




生物化学实验报告





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名：




学

号：


专业年级：


组

别：




生物化学与分子生物学实验教学中心

实验名称

蛋白质含量测定——双缩脲试剂法


实验日期


合作者

评分



教师签名


实验地点

指导老师



批改日期


一、实验目的

1.1.
掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；

1.2.
掌握双缩脲试剂的配制；

1.3.
熟悉血清总蛋白的临床意义；

1.4.
了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。

二、实验原理

2.1.
两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（
H2N-OC-NH-CO-NH2< br>），因分子内含有两
个邻接的肽键，在碱性溶液中可与
Cu2+
发生双缩脲反应 ，生成紫红色络合物。

2.2.
蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键
（
-CO-NH-
）< br>，
同样能在碱性条件下与
Cu2+
发生双缩脲反应，
生成的紫红色络合 物，
且在
540nm
处的吸光度与蛋白质的含量在
10
～
1 20g/L
范围内有良好的线性关系。

三、材料与方法：

3.1.
实验材料：

3.1.1.
实验试剂：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH
溶液；③双缩脲试剂
:
硫酸酮、酒
石酸钾钠、 碘化钾；④蛋白质标准液（
70g/L
）；⑤
0.9%NaCl
；⑥蒸馏水。

3.1.2.
实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管；⑥玻 璃棒

；⑥
1100
分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。


3.2.
实验步骤