香蕉忌什么食物相克精液分析规范

2021年1月18日发(作者：王诤)



精液常规分析的质量保证

1


《临床检验杂志》
徐建
平
精液分析必须有质量
控制

男科实验室必须为正确诊断和卫生保健决策提供可靠的

结果。由于精液分析高度复杂 ，操作难以标准化，因此必须进行质
量控制（
QC
）以发现并纠正形态误差和结果的高 度变异性。

2


比他实验室之间在纠正浓度、活力和系统性评价 上的巨大差异，使
强化质控和标准化的需求更加迫切。

质量控制的目的
< br>常规精液分析中质控的目的是检测并尽可能降低随机误差和系
统误差的程度。必须是这些误差最小 化，从而使实验结果尽可能的
接近真值，是结果可信并被临床医生和研究人员使用。

3


执行质量保证项目的重要性

每个实验室无论规模大小，都应该在标准化方法和操

作的基础上执行质量标准（QA
）项目，一保证结果的准确性和精
确性。无论如何，纠正浓度、系统性和活力等基本参 数应该始终
有内部质量控制的监控，可能的情况下还应该参加外部质量控制。

4


精液分析相关的质量保证

从男科医师写精液分析申 请单起，到男科实验室发出精液检查
报告止，为了控制此间可能出现的各种误差，男科实验室所采取的< br>行政和技术上的各种有效措施，包括质量控制的措施，称作精液常
规分析的质量保证，是整个男科 实验室质量保证的主要部分。

5


质量标准计划的核心

精液常规分析欲得到可接受的结果，需要知道并实施一个

连续性的质量标准项目，对 实验室提供的数据定期进行检测和评价，
预防、检查、修正出现的问题。

质量标准项目必须在质量手册（
QM
）中描述，内容包括标

准操作 程序（
SOP
）和一套关于实验室操作程序和方法的详细指南。
指南包括一系列表格和 文件。

6


使用
CASA
也要制定
SOP
有关精液常规分析的
SOP
内容很多，涉及许多细节，每个实验室需

分别对浓度、活力、形态学制作
SOP
。为叙述的方便，把三者共同的部分
合在一起 讨论。一些操作细节
WHO
第
5
版已详细描述，这里只突出重点
作为 提醒。各实验室应根据自身的质量控制目标，制定相应的
SOP
。

由于我国多数实验室使用精子分析仪（
CASA
）进行精液分析，下

面所陈述的
SOP
主要针对仪器而言。

7


浓度与活力、形态学
SOP
：精液采集

禁欲的时间：

待做精液常规检查者的禁欲天数规定为
2-7
天。

实验室人员应对准备采集精液标本者细心交代相关注意事项。

采集室：

尽量靠近实验室，最好是在实验室隔壁，通过有私密性保障的传递窗传递标
本。

精液的收集：

采用一次性广口容器为采精器皿，保证精液没有丢失。
采精器皿最好呈漏斗形，与带盖的离心管相连，防止污染，有利于热的传递。
操作人员应对标本做好 标记，核对送检者的信息。

8


浓度与活力、形态学
SOP
：
精液体积的测量

准确测量精液体积是获得一次射精的精子总数准确性的关

键步骤。操作人员收到精液 标本后应立即连带容器一起称重，然后
将容器置于
37
℃
恒温条件下等待精液 液化。

采用
WHO
第
5
版推荐的天平称重法计算精液体积 。天平应具有
自动去皮功能，以减少去皮的人为误差。天平的精度要达

0.01g< br>，保证精液体积的精确度达
0.1ml
的标准。
天平每年必须校验
一次 ，并做好校验记录。
。

9


浓度与活力、形态学
SOP
：
液化、外观、
PH

1
）精液如果再
39
分钟内不液化，不要开始进行精液分析，而是在
等
30
分钟。如果
60
分钟后仍为液化，应采用机械处理

或应用菠萝蛋白酶消化。

2
）
PH
值应在液化后的同一时间测量。

3
）在精液液化的同时观察其外观并做好记录。

10


浓度与活力
SOP
：
显微镜

使用
5
版推荐的相差显微镜，相差显微镜这种能够将精液

中的大部 分杂质与精子区分的高级光学系统，使精子头部发光，杂质
却与普通生物显微镜一样显示为灰色，这样可 以过滤掉大部分的杂质。

显微镜要每天擦拭干净，结束油镜观察后要及时清洁镜头。
每年至少用对中望远镜对相位环校验一次，并做好校验记录
。

11


浓度与活力
SOP
：
精子计数板

必须使用生产过程有质控措施和品质管理的精子计数板

，需要有计数
池深度检测报告。

建议使用的计数板的深度应符合以下标准：

10μm±0.5μm
间隙平行度标准：

多点检测的最大值和最小值误差小于
0.5μm

计数板使用前要清洗干净
(
可使用洗涤剂和超声波清洗机
)
，确保没有
灰尘或水痕影响计数板的深度及背景。

计数板的深度每
6-12
个月必须校准一次，并做好校验记录
。

12


浓度与活力
SOP
：
37
℃
恒温条件

1
）精液采集后应迅速送抵实验室，并立即置于
37
℃
水浴箱或金属浴
多孔保温块内。

2
）精子计数板在使用前至少放在
37
℃
恒温预热台上预热
10
分钟以
上。

3
）最好使用专门适合相差显微镜使用的精子计数板专用恒温载

物台。

13


浓度与活力、形态学
SOP
：
精液的混匀和抽样

1
）精液在取样用于检测前，应充分混匀标本。可使用二维摇动器

而不能使用漩涡震荡器。

2
）每份标本要重复抽样，在每次取样前都要再次混匀标本。

3
）只有在重复取样的结果一致时才认可此测定值。

检查足够多的精子减少抽样误差

每个实验室都要权衡专家精液分析精确度与世界花费几检测人

14


员疲劳导致准确性下降之间的利弊。检测精子浓度与活力，每次至少
检测
2 00
条精子，抽样误差是
7%
，若抽样在查
200
条精子，则合并< br>抽样误差小于
5%
，可以达到
WHO
第
5
版的要求。 形态学检查比较
耗时复杂，最少每次检查
100
条精子（误差为
10%
）
，重复检查的合
并抽样误差可以更小些。

因为要减少抽样误差而增加数倍的工作量，在人员无法增加

时，唯一的出路是使用合符要求的
CASA
。

取样和加样时注意的
SOP
细节

许多操作细节必须在
SOP
中予以规定，如：

●
稀释精液时抽取的样本量要大于
0.5ml
，使样本具有代表性。

●
做浓度与活力检测时加样的量要严格控制在
5μl
，太少会产生气泡。
15


太多会增加精液浮力而影响计数池间隙的准确性。

●
样本滴加到计数池后要将计数板继续放在预热台上静置
30
～
60
秒，减
少液体流动的影响。

●
精子有趋热和趋光的特性，采用发热 的卤素灯做显微镜的光源时，整
个检查时间最好在
1
～
2
分钟内结束 ，同时可避免液体蒸发对精子浓
度的影响。

计数时注意的
SOP
细节

●
若使用
CASA做浓度检测，每份标本在正式检查前应该先在显微镜下
6
使用网格计数板初略评估一下大致 浓度，对于浓度超过
50×
10
/ml
的
标本一定要稀释，最好用同标本的精浆稀释或用培养液稀释。

16


●CASA
可能会把一些面积与精子头类似的杂质误判成不 动精子；由于精
子浓度过高且活力较强时发生的精子碰撞现象增加，被撞的不动精子
易判成活动 精子，而主动碰撞的精子会在碰撞前后易被判成
2
条精子。

●
最 好利用计数板盖板上的网格预先规定检查视野，减少人为选择视野
造成的随机误差。

●
对于边框压线的精子数下不数上，数右不数左。

精子特别稀少甚至没有时的
SOP
●
当精子浓度＜
5×
1 0
6
/ml
时，应检查
3mm×
3mm
网格范围甚至整个< br>
计数池。

●
对疑似无精子的标本，应该将
1ml
标本离心（
3000g15
分钟）后

17


检 查沉淀物，在任一重复样本中观察到精子，提示隐匿精子症；如
果两个样本都未观察到精子则提示无精子 症。

形态学
SOP
：
染色剂与温度的稳定性

●
每个实验室做精子形态学分析时必须固定一种染色方法，分析结果

才有可比性。

●
染色液的质量有有保障，来源一定要稳定。染色剂盒应按要 求妥善保
管、储存和正规使用。记录每批次的批号。每次启用新的瓶装染色液
时，应实验室保留 的标准染色片进行比较，以期发现和分析可能存在
的问题。

●
染色温度对染 色效果的影响很大，往往不能通过延长染色时间来弥补，
所以一年中的染液温度（使用时）应该恒定，且 最佳温度是

18


25-30
℃
，使用恒温染 缸可以达到保温的效果，但应提前
2-4
小时开启
电源，以保证染液温度的均衡性。< br>
形态学
SOP
：
染色方法和时间

●
为保 证染色效果的一致性，两次取样分别制作的
2
张涂片，要背靠背
地同时染色。

●
认真记录每瓶染液的染色玻片数，到规定的上限时要及时更换整瓶染
液，不可新旧染 液同时使用。

●
要使用秒表等计时工具，不能凭经验数数。

●
尽量快速沥干玻片上的残留染液，减少上一种染色剂对后道程序的影
响。

19


●
绝不能把已经染好的涂片放在水龙头下冲洗，水流过大会 导致整体染
色背景变浅，尤其是精子尾部成像模糊或变细。要用均匀的方式
（如尖嘴塑料瓶）对 称轻柔地冲洗
2
张涂片。

检测数据要经过
95%
可信区间检验

●
可以通过
WHO
第
5
版推荐的统计学计算公式进行计算（先进的
CASA
能够自动计算）
，进行两个样本均数差别的检验。

●
将两次检查结 果直接查表（
WHO
第
5
版表
2-5
，表
2-1< br>）
，判断差异是
否可以接受。

●
如果实验室的技术人员都经 过严格的
SOP
培训，或使用能自动检验
95%
可信区间的
CASA
，在每天工作的始末，对第
1
份标本和最后

20


1
份标本进行检验，是工作量太大的单位的一种简约式选择。

精液分析的
IQC
精子浓度、活力和形态学等基本参数应该始终有内部质量控制

（
IQC）的监控。执行
IQC
的实用方法是购买独立机构的商品化质控品。
这些质控品不 应该来自本身有临床任务的单位，以保证公正和确保产品
有专门的企业标准、品质管理和质量控制的保障 。这些质控品的靶值和
已知变异范围应附报告，详细说明靶值的获得方式，每批次的数量、各
自 的编号、生产日期、有效期等信息。

男科实验室可用质控品标称的范围来评价自己工作的准确性。

21


浓度质控品：微球悬浮液

●
微球悬浮液也称质控珠。可以配合计数板上的网格进行人工计数的培
训。

●
使用质控珠可以校验
CASA
对精子的捕捉功能，
CASA
的捕捉率应达

99%
以上。质控珠不能判断
CASA
对杂质的误 捕情况（对此应选用背
景相对差的冷藏精液质控标本）
。

●
质控珠 的标称浓度以
25×
10
6
/ml
左右为宜。过高浓度的质控珠容易 产
生微球聚集的现象而影响浓度的准确性。

●
定期（如一周一次）用质控珠 对
CASA
的捕捉率进行校验，可同时调
整使用相差显微镜时的习惯亮度、聚光镜的位 置等，把达到最高捕捉
率时的条件固定下来。

22


活力质控措施：视频录像

●
人工分析精子活力可以采用
WHO推荐的用摄像机拍摄视频录像，通
过重复播放视频录像来重新评估精子的活力。

●
越来越多的
CASA
采用了＞
50
帧的高速率步进式
CC D
，改变了拍摄多

幅照片再描绘精子运动轨迹的旧设计思路，软件的升级使新型

CASA
具备 了视频录像功能，可以实时记录精子的运动轨迹，永久储
存，随时重复回放，创造了人工校验
C ASA
活力分析质量的基本条件。

23


视频录像的分析

●
在分析视频录像时，
WHO
推荐的方法 是：将一个醋酯膜栅格覆盖在视
频监视器上，模拟用显微镜分析时目镜中的栅格。

●
实际上可以利用计数板上的精确的网格（
1
小格边长为
0.1mm
）
，

测量出显示屏上相应的长度，再按此比例制作网格胶片，覆盖在显示
屏上 ，用彩色笔先确定不动精子，再确定前向运动精子，最后确定非
前向运动精子。人工评估可以重复，也可 以和
CASA
的分析结果进行
比较。

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