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BOD5检测方法
一、 测定方法
碘量法
二、 方法依据
《生活饮用水卫生规范》(2001)
三、 测定范围
适用于测定饮用水源水中的生化需氧量(BOD
5
)。
水样呈酸 性或含苛性碱,余氯、亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物及某些有毒物质对测定有干扰,应分
别处理后测定。
四、 测定原理
生化需氧量(BOD
5
)是 指在有氧条件下,微生物分解水中有机物的生物化学过程所需溶解氧的量。
取原水或经过稀 释的水样,使其中含足够的溶解氧,将该样品同时分为两份,一份测定当日溶解
氧的质量浓度,而将另一 份放入20℃培养箱内培养五天后再测其溶解氧的质量浓度,两者之差
即为五日生化需氧量。
五、 试剂
1、氯化钙溶液(27.5gL):称取27.5g无水氯化 钙(CaCl
2
)溶于纯水中,稀释至1000mL。
2、氯化铁溶液( 0.25gL):称取0.25g氯化铁(FeCl
3
·6H
2
O),溶于纯 水中,稀释至1000mL。
3、硫酸镁溶液(22.5gL):称取22.5g硫酸镁( MgSO
4
.
7H
2
O),溶于纯水中,稀释至1000mL。
4、磷酸盐缓冲溶液(pH7.2):称取8.5g磷酸二氢钾(KH
2
P O
4
),21.75g磷酸氢二钾(K
2
HPO
4
),33.4g磷酸氢二钠(Na
2
HPO
4
)和1.7g氯化铵(NH4
Cl)溶于纯水中,稀释至1000mL。
5、稀释水:在20L玻璃瓶内 装入一定量的蒸馏水(含铜量小于0.01mgL),在20℃条件下用水
泵或无油空气压缩机连续通入 经活性炭过滤的空气8h,予以曝气,静置5~7天,使溶解氧稳定,
其溶解氧质量浓度应为8~9mg L。
6、接种稀释水
6.1接种液:将生活污水在20℃条件下放置24~36h,取上清液,备用。
6.2接种稀释水:于每升稀释水中加入接种液10~100mL。
7、葡萄糖一 谷氨酸溶液:称取于103℃烘烤1h的葡萄糖和谷氨酸各150mg于纯水中,稀释至
1000mL, 临用时配制。
8、硫酸溶液[c(H
2
SO
4
)=0.5molL]。
9、氢氧化钠溶液[c(NaOH)=1molL]。
10、氟化钾溶液(40gL)。
11、叠氮化钠溶液(2gL)。
12、硫酸(ρ。
20
=1.84gmL)
13、硫酸锰溶液( 480gL):称取480g硫酸锰(MnSO
4
·4H
2
O或400gMn SO
4
·2H
2
O或
380gMnCl
2
·2H< br>2
O)溶于纯水中,过滤后,稀释至1000mL。
14、碱性碘化钾溶液 (500gNaOH+150gKIL)称取:500g氢氧化钠,溶于300~400mL纯水中,
取 称150g碘化钾(或碘化钠)溶于250mL纯水中。将以上两液合并,加纯水至1000mL,静置
24h使碳酸钠沉出,倾出上清液备用。
15、硫代硫酸钠标准溶液[c(Na
2
S
2
O
3
)=0.025molL]:吸取0.05molL硫代硫 酸钠标准溶液,用新
煮沸放冷的纯水准确稀释为0.025molL。
16、淀粉溶液(5gL)。
六、 仪器设备
1、恒温培养箱(20±1℃)。
2、细口玻璃瓶:2000mL。
3、量筒:1000mL。
4、玻璃搅拌:玻璃棒底端套上一块比量筒口径略小于 1mm厚的硬橡胶圆块,棒的长度以可伸
至量筒底部为宜。
5、培养瓶:250mL。
七、 分析步骤
1、样品预处理
1.1水样pH应为6.5~7.5之间,饮用水源水受到废水污 染时,可用硫酸溶液或氢氧化钠溶液予以
调整。
1.2含有少量余氯水样,放置1 ~2h后即可消失。余氯大于0.1mgL,可加入硫代硫酸钠除去,其
加入量可用碘量法测定。
1.3受工业废水污染的水样,由于其中可能含有其它有害物质,如金属离子等,应根据具体 情况
予以处理。
1.4当水样中含有0.1mgL以上的亚硝酸盐时,可于每升稀 释水中加入2mg亚甲蓝或3mL叠氮
化钠溶液处理。
1.5当水样中含1mgL以下的亚铁盐时,可于每升水中加入2mL氟化钾溶液。
2、直接培养法:适用于较清洁的水样。用虹吸法吸出两份水样于溶解氧瓶中,一瓶立即测定溶
解氧, 另一瓶,立即放入20±1℃的恒温培养箱中,培养五昼夜后取出,再测定溶解氧。二者之
差即为水样的 生化需氧量。
3、稀释培养法
3.1确定水样稀释倍数:根据酸性高锰酸钾法测得耗氧量(mgL) ,以1~3除之,商即为水样所需
稀释的倍数。
3.2稀释方法
A连续稀释法,先从稀释倍数小的配起,继用第一个稀释倍数的剩余水,再注入适量稀释用水配
成第 二个稀释倍数,以此类推。
B稀释操作方法
a将水样小心混匀(注意 勿产生气泡),根据3.1确定的稀释比例,取出所需体积的水样,沿筒壁
移入量筒中,然后细心地用虹 吸管将配好的稀释水或接种稀释水加至刻度,用特制的搅拌在水面
以下缓缓上下搅动4~5次,立即将筒 中稀释水样用虹吸法注入两个预先编号的培养瓶,注入时
使水沿瓶口缓缓流下,以防产生气泡。水样满后 ,塞紧瓶塞,并于瓶口凹处注满稀释水,此为第
一稀释度。
b在B.a分析步骤中 ,量筒内尚剩有水样,根据第二个稀释度需要再用虹吸法向筒中注入稀释水
或接种稀释水以下分析步骤重 复3.2.B.a操作,即为第二稀释度,按同法可做第三个稀释度。
c另取两个编号的溶解氧瓶,用虹吸法注入稀释水或接种稀释水,塞紧后用稀释水封口作为空白。
d检查各瓶编号,从空白及每一个稀释度水样瓶中各取1瓶放入20±1℃的培养箱中培养中 培养
5日,剩余各一瓶测定培养前溶解氧。
(a) 溶解氧固定
立即将分度吸管插入培养瓶液面以下,加1mL硫酸锰溶液,再按同方法加入1mL碱性碘化钾溶
液 。盖紧瓶塞(瓶内勿留气泡),将水样颠倒混匀一次,静置数分钟,使沉淀重新下降至瓶中部。
(b)释出碘
用分度吸管沿瓶口加入1mL硫酸溶液盖紧瓶塞,颠倒混匀,静置5min。
(c)滴定
将上述溶液倒入250mL碘量瓶中,并用纯水洗涤溶解氧瓶2—3次 ,用硫代硫酸钠标准溶液
(110.1.3.15)滴定至溶液呈淡黄色,加入1mL淀粉溶液,继续至 蓝色刚好褪去为止。记录用量
(V
1
)。
(d)计算
V
1
×c×8×1000
ρ(O
2
)=——————————
V-3
式中:ρ(O
2
)—水中溶解氧的质量浓度(以O
2
计), mgL;
c—硫代硫酸钠标准溶液的浓度,molL;
V1—硫代硫酸钠标准溶液用量,mL;
8—与1.00mL硫代硫酸钠标准溶液 [c(Na
2
S
2
O
3
)=1.000molL]相当以m g表示的溶解氧的质量;
V—水样体积,mL。
e每天检查瓶口是否保持水封,经常添加封口水及控制培养箱温度。
f培养五天后取出培养瓶,倒尽封口水,立即测定培养后的溶解氧。
g溶解氧测定方法同上。
4、标准溶液校核
将葡萄糖—谷氨 酸标准溶液,以2%稀释比测其BOD
5
,其结果应为200±37mgL。如不在此范
围内,说明实验有误,应找其原因。
八、 计算
1、直接培养法 ρ
1
(BOD
5
)=ρ
1
-ρ
2、稀释培养法
ρ
1
(BOD
5
)=(ρ
1
-ρ
2
)-(ρ
3
-ρ
4
)f
1
f
2
式中:ρ
1
(BOD
5
)—水样的五日生化需氧量( BOD
5
)的质量浓度,mgL;
ρ
1
——水样培养液在培养前的溶解氧的质量浓度,mgL
ρ
2
——水样培养液在培养五日后的溶液氧的质量浓度,mgL
ρ
3
——稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧的质量浓度,mgL
ρ
4
——稀释水(或接种稀释水)在培养五日后溶解氧的质量浓度,mgL
f
1
——稀释水(或接种水)在培养液中所占比例
f
2
——水样在稀释培养液中所占的比例
稀释水(mL)
f
1
=————————————
2
水样(mL)+稀释水(mL)
水样(mL)
f
2
=————————————
水样(mL)+稀释水(mL)
3、结果确定
测定2个或2个以上稀释度的溶解氧降低量应为40%~70%之间,即可取平均值计算。
(ρ
1
-ρ
2
)×100
ρ
5
=——————————
ρ
1
式中:ρ
5
——水样稀释后溶液氧降低率,%;
ρ
1
,ρ
2
——同上
4、精密度
有资料说明,在一系列实验室内的考察中,每系列包括86
~
106个实验室(接种同样多的河水和
废水),对300mgL的混合原始标准,五天BOD< br>5
平均值199.4mgL,标准偏差为37.0mgL。
在58个实验室 里86位分析工作者分析了天然水样,其中准确加入可生物降解的有机化合物。
BOD
5
平均值为2.1—175mgL,标准偏差分别为±0.7和±26mgL。
九、 附《BOD
5
检验记录》
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