乙型肝炎病毒抗体诊断胶体金法SOP标准操作程序

2021年1月12日发(作者：孕妇5个月左右吃的菜谱有什么)
乙型肝炎病毒抗体诊断（胶体金法SOP）
测定标准操作程序
编写者：宿金涛
日期：2012年3月1日

一. 原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗 原、e抗体、核心抗体检测试
剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试 剂通过一个
包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况
下，便于客户的储存和使用。
HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。
测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体
反应。然 后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中
先于标本中的HBsAg结 合，随后家何物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结合，在测
试区内（T）会出现一条紫红色带。这条 带是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒
子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则 测试区内（T）将没有紫红色带。无论
HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（ C）。质控区内（C）所
显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作 为试剂
的内控标准。
HBsAb检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表
面抗体。
测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。
然后，混合 物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标
本中的HBsAg结合，随后 结合物会被固定在膜上的HBsAg抗体结合，在测试区内(T)
会出现一条紫红色条带。这条带是HB sAg-HBsAb-HBsAg金标粒子的复合物在膜上结
合形成的。如果阴性，则测试区内(T)将 没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本
中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控 区内(C)所显现的紫红色条带是判定
是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内 控标准。
HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙
肝e抗体。
测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBeAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先
于标本中的H BeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBeAg抗体结合，在测试区
内(T)会出现一条紫红色 条带。这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复
合物在膜上结合形成的。如 果阴性，则测试区内(T)将没有紫红色条带。无论HBeAg抗
体是否存在于标本中，一条紫红色条带 都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的
紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否 正常的标准，同时也作为试剂的内控
标准。
HBeAb,HBcAb检测试剂才有竞争抑制法 ，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的
抗体。
测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处 ，随之标本在毛细效应下向上层析。如标
本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(T)的抗体竞争与预包 被在金标粒子的相应抗体
反应。如果标本中没有相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜 上测试
区(T)的抗体全部结合。阳性标本，测试区内(T)将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内(T)将会出现明显的紫红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条
带都会出现 在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，
层析过程是否正常的标 准，同时也作为试剂的内控标准。
二. 试剂：英科新创乙肝五项检测卡（胶体金法）。规格为25人 份盒。产品标准编
号：YZB国0378-2009。
三.操作步骤：
1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（18－25℃）并编号。
2、将胶体金测试 卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。编号（与
样品相对应）；
3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。
4、等待紫红色条带 的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。30分钟后
判断无效。
四. 参考范围：正常人为阴性。
五、结果判定

HBsAg HBsAb HBeAg
阳性：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控 区（C）。
阳性结果表明：标本中含有待测物质。
阴性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带 ，在测试区（T）内无紫红色条带出现。
阴性结果表明：标本中检测不出待测物质
无效：质控 区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说 明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应
立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。
注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观
察时间内，不 论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。
HBeAb HBcAb
阳性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。
阳性结果表明：标 本中含有待测物质。
阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C） 。
阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。
无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不 正确的操作过程或试剂已变质损坏。在
此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果 问题仍然存在，应立
即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

六．临床意义：

乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传播途径。尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。
乙肝五项检测卡（ 胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、
e抗体、核心抗体、用于乙型肝炎病毒 感染的辅助诊断。
七. 病人及样本要求：
1、本品适用于血清、血浆样本，血浆 样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸椽
酸钠）无要求；样本的采集须遵循常规的医疗样本的采集 方法并遵守相关的医学规定。
2、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。
3、如果血清和血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2-8℃保存；大于7天须
－20℃ 以下冷冻保存。
4、溶血、粘稠及高脂标本不适于本试剂。含特珠物质（如强氧化剂）的标本可能< br>会导致检测结果不稳定，在检测前须清除。
八. 注意事项：
1、检测必须符合实验 室管理规范和物物安全守则的规定，操作时必须戴手套、穿工
作服、严格健全和执行消毒隔离制度。 < br>2、乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶
体金法）适用 于测试血清或血浆标本，其他标本或溶液进行检测可能出现异常结
果。
3、由于在技术上和操 作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物质，检测
结果有可能错误。
4、请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果的偏差。
5、测试结果应在测定开始后20分钟读取，30分钟后判定无效。
6、本产品为目视读取结果，为保证判定结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行
判读。
7、试剂可在室温下保存，谨防受潮。低温下保存的试剂应平衡到室温方可使用。
8、试卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，置于空气中时间过长，卡内的纸条会
受潮失效。
9、实验环境应保持一定温度，避风。避免在过高温度下进行实验。
10、 检测线颜色的深浅程度与样品中被测物的浓度没有必然联系。
11、 所用样品、废弃物等都应按传染物处理。

九、英科新创乙肝五项检测卡说明书