百变五侠ABO、RhD血型抗原检测卡(柱凝集法)

2021年1月9日发(作者：孕妇吃迪巧好还是钙尔奇好呀?我怀孕五个月了想买点钙片补)
ABO、RhD血型抗原检测卡（柱凝集法）
注册技术审查指导原则
（征求意见稿）


本指导原则旨在指导注册申请人对ABO、RhD血型抗 原
检测卡（柱凝集法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为
技术审评部门对注册申报资料的技 术审评提供参考。
本指导原则是对ABO、RhD血型抗原检测卡（柱凝集法）
的一般要求， 申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是
否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并
依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细
化。如申请人认为有必要增加本指导原 则不包含的研究内
容，可自行补充。
本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不< br>包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，
如果有能够满足相关法规要求的其它方 法，也可以采用，但
需要提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相
关法规的前提下 使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水
平下制定的，随着法规 和标准的不断完善，以及科学技术的
不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、范围
ABO、RhD血型抗原检测卡（柱凝集法）是指使用凝胶、
玻璃微珠等材 料进行填充微柱，以免疫血液学、颗粒过筛和
离心技术结合原理，进行人ABO血型的正定型鉴定及Rh D抗
原的检测。
1 13

本指导原则适用于ABO、RhD血型抗 原检测卡(柱凝集法)
以及包含ABO、RhD血型抗原检测用途的柱凝集法的血型检
测卡，但 不适用于血源筛查用血型正定型试剂。
本指导原则仅包括对ABO、RhD血型抗原检测卡(柱凝集< br>法)注册申报资料中部分项目的要求，适用于进行产品注册
和相关许可事项变更的产品。其他未尽 事宜，应当符合《体
外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令
第5号）（以下 简称《办法》）等相关法规要求。
二、注册申报资料要求
（一）综述资料
综述资 料的撰写应符合《关于公布体外诊断试剂注册申报资
料要求和批准证明文件格式的公告》（总局2014 年第44号公告）
（以下简称“44号公告”）的相关要求。
内容主要包括产品预
期用 途、产品描述、有关生物安全性的说明、有关产品主要
研究结果的总结和评价以及同类产品在国内外批准 上市的
情况介绍等内容，其中同类产品上市情况介绍部分应着重从
抗体生物学来源、抗体效价、 特异性、灵敏度、有效期等方
面写明拟申报产品与目前市场上已获批准的同类产品之间
的异同。
（二）主要原材料研究资料
主要原材料研究资料应包括主要组成成分（抗体、凝胶
或 其他填充物、缓冲液等）的选择、制备及其质量标准的研
究资料。
1.抗体的选择及质量标准 。应明确写明抗体的供应来源、
生物学来源或克隆号，抗D抗体应明确抗体属性，是IgM型
或 IgG型或两者均含有。
2 13

1.1提供抗体纯度。
1.2抗体效价：
将抗A、抗B抗体进行倍比稀释，应用试管法分别与A
1
型、A
2
型红细胞试剂和B型红细胞试剂反应，与国家标准品
比对，抗体效价不得低于 国家标准品。
将抗D抗体进行倍比稀释，应用试管法与RhD阳性红细
胞试剂反应，考察抗体效价。
1.3特异性
抗A抗体应与A
1
型、A
2
型、A
1
B、A
2
B型试剂红细胞发生
阳性反应，与B型、O型试剂红细胞为阴性反 应；
抗B抗体应与B型、A
1
B、A
2
B型试剂红细胞发生阳性反
应，与A
1
型、A
2
型、O型试剂红细胞为阴性反应；
抗D抗体应与RhD阳性试剂红细胞发生阳性反应，与RhD
阴性试剂红细胞为阴性反应。
所有阳性反应不应有双群现象等混合反应，所有阴性反
应不应有凝集、溶血等不易分辨现象。
1.4应提供不同批次抗体的验证资料。
1.5如为两株抗体混合，应提交验证资料说明混合比例。
2.填充物的选择：说明填充物如 凝胶、玻璃珠的特性，
如组成、粒径及其质量控制要求。应提交选择比较过程，提
交验证试验资 料。
3.填充缓冲液：应说明组成成分,并对外观、性状、pH
值等物理指标及功能性进行研 究验证。
（三）主要生产工艺及反应体系的研究资料
1.主要生产工艺介绍，可用流程图方式表示，并简要说
明主要生产工艺的确定依据。
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2.产品基本反应原理介绍。
3.主要生产工艺过程的研 究资料、每一步生产工艺的确
认资料及试验数据。如抗体浓度的选择确定过程、凝胶溶胀
条件（ 如介质、时间、温度等）的确定、填充量及填充过程
的研究资料，填充应确保均匀无气泡，以及质量控制 的要求。
4.主要反应体系的研究资料、每一步反应体系的确认资
料及试验数据。
反应体系的设臵应符合《全国临床检验操作规程》等公
认标准操作规范、指南或标准的要求。如红细胞悬 液制备要
求及红细胞浓度的确定、用量的要求、温度、时间等；应提
交离心条件的研究资料，建 议以离心力或固定离心机型号固
定转数和时间的方式设臵离心条件。
（四）分析性能评估资料
申请人应提交生产者在产品研制或成品验证阶段对试
剂进行的所有性能验证的研究资料，对于每 项分析性能的评
价都应包括具体研究目的、实验设计、研究方法、可接受标
准、实验数据、统计 方法等详细资料。有关分析性能验证的
背景信息也应在申报资料中有所体现，包括实验地点（实验
室）、适用仪器、试剂规格、批号、临床样本来源等。分析
性能评估的实验方法可以参考国内或国际有 关体外诊断产
品性能评估的指导原则进行。
产品性能研究所采用的仪器、试剂或其他物品如可 能均
应采用境内或境外已批准上市的产品，如红细胞试剂、抗人
球蛋白试剂、离心机等。 分析性能评估试验中应明确所有试验每种试剂的用量、
试剂红细胞的浓度、采用的试验方法。所有试 验方法应符合
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产品说明书的具体操作要求。
分析性能研究 应采用至少三批产品进行。如检测卡同时
适用于手工法及全自动血型分析仪，应分别进行性能验证并对两者性能进行比较。
建议着重对以下分析性能进行研究。
1.外观：检测卡应标识清 晰，不同抗体对应不同颜色，
封口应严密且能够整条撕脱，检测卡内填充物均匀，无干枯
现象， 液面高度一致，无明显倾斜，离心后应无气泡。
2.特异性：
抗A柱应与A
1型、A
2
型、A
1
B、A
2
B型试剂红细胞发生阳性反应，与B型、O型试剂红细胞为阴性反应；
抗B柱应与B型、A
1
B、A< br>2
B型试剂红细胞发生阳性反应，
与A
1
型、A
2
型 、O型试剂红细胞为阴性反应；
抗D柱应与RhD阳性试剂红细胞发生阳性反应，与RhD
阴性试剂红细胞为阴性反应。
Ctl柱（如有）均呈阴性反应。
所有阳性反应不应有双群现象等混合反应，所有阴性反
应不应有凝集、溶血等不易分辨现象。
3.灵敏度
3.1凝集强度要求
抗A柱与A
1
型试剂红细胞发生 凝集反应时，反应强度应
不小于4+，与A
2
型及A
2
B试剂红细 胞发生凝集反应时，反
应强度应不小于2+；与A
1
B试剂红细胞发生凝集反应时，反
应强度应不小于3+；
抗B柱与B型试剂红细胞发生凝集反应时，反应强度应
不小 于4+，与AB型（A
1
B或A
2
B）试剂红细胞发生凝集反应
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时，反应强度应不小于3+；
抗D柱与RhD阳性试剂红细胞发生凝集反应时，反应强
度应不小于4+。
3.2与试管法的比对试验
采用同样的A
1
型、A
2
型、 AB型、B型、RhD阳性试剂红
细胞，将试剂卡检测结果与试剂卡使用的抗体采用试管法的
检 测结果进行比较，依据各自的结果判定方法进行凝集强度
的判读，试剂卡凝集强度不得低于试管法。
所有阳性反应不应有双群现象等混合反应，所有阴性反
应不应有凝集、溶血等不易分辨现象。
4.重复性
采用A
1
型、A
2
型、B型、AB型、O型试 剂红细胞分别对
抗A柱和抗B柱进行重复性试验，采用RhD阳性和阴性试剂
红细胞对抗D柱进 行重复性试验，使用上述所有试剂红细胞
对Ctl柱（如有）进行重复性试验。
批内重复性采 用同一批次检测卡重复检测上述试剂红
细胞，重复次数不少于10次，比较同一批次检测卡不同次
检测之间的检测结果；
日间重复性采用同一批次检测卡每日重复检测上述试
剂红细胞，重复 天数不少于10天，比较同一批次检测卡不
同天检测之间的检测结果；
批间重复性采用至少三批检测卡对上述试剂红细胞进
行重复检测，比较不同批次间的检测结果。
批内、日间、批间重复性检测结果应分别对应一致，对
同一试剂红细胞的检测结果凝集强度差异 不超过1+。阴性结
果不应有凝集、溶血等不易分辨现象。
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5.临床样本验证
收集各ABO血型临床样本，包括RhD阴性样本，采用试
剂卡进 行检测，将血型鉴定和凝集强度结果与已上市试剂结
果进行比较。临床样本的收集应考虑涵盖肿瘤、血液 病、自
身免疫病和贫血患者、老人及儿童等病例来源。
6.收集临床弱凝集红细胞样本，验证 A、B、O、AB、RhD
阳性小于3+及各种凝集强度的情况，并提供各种凝集强度的
图片。
7.收集各种血型的直接抗人球蛋白试验阳性红细胞进行
检测验证。并提供直接抗人球蛋白试验 试剂及检测结果信
息。
8.收集弱D、部分D红细胞，考察验证抗D柱能否检出，
并 明确上述RhD血型的具体确定方法。
9.溶血、脂血、黄疸等样本的干扰评价。
10.抗凝剂的适用性研究验证。
（五）阳性判断值
提供充分的验证试验，体现不 同凝集强度的结果，并明
确不同凝集强度代表的具体意义，并应包含溶血、混合视野
双群等情况 ，明确具体的试验方法、实验步骤，提供不同凝
集强度的图例或相片。
（六）稳定性研究资料
稳定性研究资料主要涉及两部分内容，申报检测卡的稳
定性和适用样本的稳定性研究。前者主要 包括实时稳定性
（有效期）研究，申请人可根据实际需要选择合理的稳定性
研究方案，实验项目 应至少包括灵敏度、特异性、重复性。
稳定性研究资料应包括研究方法的确定依据、具体的实
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施方案、详细的研究数据以及结论。对于实时稳定性研究，
应提供至少 三批样品在实际储存条件下保存至成品有效期
后的研究资料。
应对样本稳定性进行研究，主要 包括室温保存、冷藏条
件下的有效期验证，可以在合理的温度范围内选择温度点
（温度范围）， 每间隔一定的时间段对储存样本进行全性能
的分析验证，从而确认不同类型样本的稳定性。
试 剂稳定性和样本稳定性两部分内容的研究结果应分
别在说明书【储存条件及有效期】和【样本要求】两项 中进
行详细说明。
（七）临床试验
临床试验总体要求及临床试验资料的内容应符合 《体外
诊断试剂临床试验指导原则》、
《办法》、“44号公告”
的规
定，以 下仅结合ABO、RhD血型抗原检测卡的具体特点对其临
床试验中应重点关注的内容进行阐述。
1.研究方法
按照法规要求应选择境内已批准上市、临床普遍认为质
量较好的同类产 品作为对比试剂，采用试验用体外诊断试剂
（以下称考核试剂）与之进行比较研究试验，证明考核试剂< br>与已上市产品或试管法等效。
2.临床试验单位的选择
应选择符合法规要求资质的临床试验机构进行临床试
验，不得选择血站进行临床试验。
3.病例选择
临床总病例数应不少于3000例。应采用临床患者进行
临床研究，供 血者样本不得作为临床病例纳入。应包括血型
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鉴定易产生干扰的病例 ，尽量选择多种疾病患者（如肿瘤患
者、自身免疫病患者、血液病患者）、老人、儿童（不同年
龄段）等。血型分布尽量均衡，ABO血型每种均应有统计学
意义，RhD阴性样本建议不少于50例。
4.实验过程
分别采用考核试剂与对比试剂依据各自的说明书对入
组临床样本进行血 型检测，记录结果应具体到凝集强度。
5.统计学分析
应分别进行考核试剂与对比试剂对 不同ABO血型、RhD
血型的阳性符合率、阴性符合率、总符合率的计算，并以四
格表的形式 进行列表，对定性结果进行Kappa检验以验证检
测结果的一致性。
6.结果差异样本的验证
对于两种试剂检测结果不一致（包括考核试剂与对比试
剂定 型结果不一致、考核试剂与对比试剂凝集强度差异较大,
如≥2+）的样本，应采用临床上公认较好的第 三种同类试剂
进行确认试验，同时应结合样本的复测结果进行综合分析，
最终应采用适合的方法 进行样本血型的最终确认。
如临床样本中包含凝集强度小于3+的样本，应进行进一
步确认，明确出现弱凝集的原因。 < br>7.临床试验数据记录表应作为临床试验报告附件提交。
临床试验数据记录表应列明所有病例的具 体临床诊断信息、
凝集强度和血型定型结果，如有不符样本应列明第三方确认
的结果。
8.临床试验中应注意考核试剂与对比试剂应严格遵守说
明书操作要求，如红细胞悬液浓度、离心条件 等，应与说明
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书一致。
（八）产品风险分析资料
产品风险分析资料应符合
“
44号公告”的基本要求，并参
照相应的行业标准进行风 险分析。风险分析中应充分考虑到各种
可能影响检测结果的因素，如
某些样本（如肿瘤患者、自 身免
疫病患者、血液病患者等）在进行血型定型检测时可能存在
一定的干扰
、抗体效价 随放臵时间延长的减弱对结果的影响等，
申请人应根据这些不确定的因素分析产品应用可能存在的风险。
（九）产品技术要求
申请人应当在原材料质量和生产工艺稳定的前提下，根据产
品研 制、性能评估等结果，依据国家标准、行业标准及有关文献，
按照《医疗器械产品技术要求编写指导原则 》（总局2014年第
9号通告）的有关要求，编写产品技术要求。产品技术要求应符
合《办法 》和“44号公告”的相关规定。

如果拟申报试剂已有相应的国家行业标准发布，则企
业标准的要求不得低于上述标准要求。
产品技术要求的性能指标应至少包括外观、灵敏度、特
异性、重复性、稳定性。
产品 技术要求的附录应包括主要原材料、生产工艺及半
成品检定要求。主要原材料应明确抗体来源、克隆号、 纯度、
效价、特异性以及功能性验证要求，应明确填充物来源及主
要特征、质量控制要求，缓冲 液应明确组成、pH值等特性及
质控要求；主要生产工艺应以流程图形式描述主要生产工艺
过程 ，并明确主要生产工艺的具体条件和质量控制点；半成
品检定应明确半成品的检验要求及方法。
（十）产品注册检验报告
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根据《办法》要求，申请注册 的第三类体外诊断试剂应
在国家食品药品监督管理局认可的、具有相应承检范围的医
疗器械检验 机构进行连续三个生产批次样品的注册检验。
（十一）产品说明书
说明书承载了产品预期用 途、试验原理、试验方法、检
测结果解释以及注意事项等重要信息，是指导实验室工作人
员正确 操作、临床医生针对检验结果给出合理医学解释的重
要依据，因此，产品说明书是体外诊断试剂注册申报 最重要
的文件之一。产品说明书的格式应符合
《体外诊断试剂说明书
编写指导原则》（ 总局2014年第17号通告）的要求，
境外产
品的中文说明书除格式要求外，其内容应尽量保 持与原文说
明书的一致性，翻译力求准确且符合中文表达习惯。产品说
明书的所有内容均应与申 请人提交的注册申报资料中的相
关研究结果保持一致，如某些内容引用自参考文献，则应以
规范 格式对此内容进行标注，并单独列明参考文献的相关信
息。
以下内容仅对ABO、RhD血型 抗原检测卡说明书的重点内
容进行详细说明，说明书其他内容应根据《体外诊断试剂说
明书编写 指导原则》要求进行编写。
1. 【预期用途】
1.1写明本试剂用于人ABO血型的正定 型检测及RhD血
型抗原的检测，同时明确不用于血源筛查，仅用于临床检验。
1.2说明与预期用途相关的临床适应症背景情况，说明
相关的临床或实验室诊断方法。
2.【储存条件及有效期】
说明试剂的储存条件及有效期。
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3.【样本要求】
明确红细胞制备和浓度要求，明确配套红细胞稀释液，
应使用生理盐水，说明溶血、脂血、黄疸样本是否可以使用，
或提供使用此类样本的最低要求。依据稳定 性研究结果写明
样本稳定性要求，明确抗凝剂要求。
4.【阳性判断值】
明确结果判断方法及标准，并通过不同凝集强度的图例
或照片进行详细解释。
5.【检验方法】
写明具体方法及操作步骤。
明确质控要求：应根据相关规定进行每日质控试验。
6.【检验方法的局限性】
6 .1未完全去除纤维蛋白原的标本，可能因纤维蛋白阻
碍红细胞沉降而影响检测结果，造成假阳性，建议 洗涤后重
新检测。
6.2被检标本染菌可能造成假阳性结果。
6.3实验室温度低 可能导致凝胶颗粒活动性减少，单个
红细胞穿过困难，从而导致假阳性结果。
6.4使用陈旧样本可能因细胞破碎，细胞膜浮于胶中或
胶面呈弱阳性反应。
6.5对弱D等检测情况进行说明。
6.6对检测结果凝集强度小于3+的情况应如何进行后续
处理进行详细说明。
7.【注意事项】
7.1检测卡在使用前应离心，并小心解开封口膜，避免
迸溅。
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7.2强调红细胞悬液浓度范围，不得过高或过低。
7.3微柱中出现溶血情况的处理。
7.4样本离心时间和离心力应严格按照说明书要求操作。
7.5其他。
三、起草单位
国家食品药品监督管理总局医疗器械技术审评中心
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