胰蛋白酶(原)

2020年12月14日发(作者：卫包)
胰蛋白酶
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，EC3.4 .21.4。在脊椎动物中，作为消化酶而
起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为 胰液的成分而分泌，受肠激酶，
或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链 中赖氨酸和精氨酸
残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶 原、
磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排
列中，它成为不可缺少的工具。
1介绍
胰蛋白酶
中文名称:


中文同义词:
英文名称:
英文同义词:
CAS号:
分子式:
分子量:
EINECS号:
酶1:250;蛋白酶类
Trypsin
TRYPSIN;TRYPSIN,
9002-07-7
C6H15O12P3
≈24000
232-650-8
1-250;TRYPSIN, 1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN, HUMAN
PORCINE;TRYPSIN, PORCINE PANCREAS;ec3.4.4.4
胰蛋白酶;胰蛋白酶1：250（猪胰脏）;胰蛋白酶1：3 00（猪胰脏）;胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-E
PAN
牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分 子量23800[1]，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝
氨酸蛋白酶。除存在于脊椎动物外，还存 在于蚕、海盘车、蝲姑、放线菌等范围广泛的生物
体中。另外与高等动物的血液凝固和炎

胰蛋白酶降解物分析
症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方 面与胰蛋白酶具有
密切的关系，可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。胰糜蛋白酶 与弹
性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系，但其特异性则完全不同。

胰蛋白酶原的激活过程
胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。中国药品标准规 定按干燥品计算，每
1mg 的效价不得少于2500单位。 由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内 切酶，只断裂
赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。白色或米黄色结晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、
甘油、氯仿和乙醚。分子量24 000，pI 10.5，最适pH值7.8～8.5左右。pH>9 .0不可逆失活。
Ca2+对酶活性有稳定作用；重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑 制剂对其活
性有强烈抑制。临床用于抗炎消肿，工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。
2作用与用途
本品为蛋白质水解酶，能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的 肽链，能消
化溶解变性蛋质，对未变性的蛋白质无作用，因此，能使脓、痰液、血凝块等分解、变稀，< br>易于引流排除，加速创面净化，促进肉芽组织新生，此外还有抗炎症作用。临床上用于脓胸、
血胸 、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。喷雾吸入，
用于呼吸道疾病 。也可用于治疗毒蛇咬伤。还常用于动物细胞培养前对组织的处理。
剂量与用法
肌内注射，1 000～2 000U或5 000U用生理盐水或注射用水溶解，1次日。治毒蛇咬伤，取
本品2 000U，1～3支，加0.2 5%～0.5%盐酸普鲁卡因液(或注射用水)4ml～20ml溶解，以牙
痕为中心，在伤口周围作浸 润注射。或在肿胀部位上方作环形封闭1～2次，如病情需要可
重复使用。
副作用
1 寒战、发热、头痛、头晕、胸痛及腹痛、腹泻等。 2 不可用于急性炎症及出血空腔中。 3
肝、肾损伤、血凝异常和有出血倾向者忌用。
3细胞培养
胰蛋白酶的作用是使细胞 间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作
用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还 与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH 为 8.0 、
温度为 37℃ 时，胰酶溶液的作用能力 最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以
免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配
制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如： D-Hanks 液。终止消化时，可用
含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1. 称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的
双蒸水（若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右）或 PBS （ D-hanks ）液中。搅拌混匀，置
于 4℃ 内过夜。
2. 用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（ 0.22 微米微孔滤膜）
抽滤除菌。
3. 分装成小瓶于 -20℃ 保存以备使用可！
胰蛋白酶原trypsinogen
胰蛋白酶原trypsinogen 为胰蛋白酶的前体 。在胰脏中合成，存在于胰液里，分泌到十二指
肠中，通过十二指肠粘膜中的肠激酶的作用，在6位赖氨 酸和7位异亮氨酸之间切断。从N
端到第6位置之间的肽链（H-val-Asp4－Lys-OH）切 断时便出现活性（如牛）。这种激活作
用也可以通过胰蛋白酶的自我催化反应进行。牛胰蛋白酶原氨基酸 残基为229，分子量约为
2万4千。