中老年怎么补钙肠道病毒的分类与检测修订稿

2020年11月23日发(作者：傅继铎)





肠道病毒的分类与检测
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肠道病毒的分类与检测

摘 要

肠道病毒可引发多种感染，并且发病以综合症出现，一种综合症可有不同病毒
所引起，同一种病 毒可以导致不同综合症是肠道病毒感染的普遍现象。目前除脊髓
灰质炎外，尚无疫苗可供预防，是当前严 重影响人类健康的重要病原之一。肠道病
毒主要经粪一口或呼吸道传播，所以对肠道病毒感染作出准确、 及时的诊断是非常
必要的。肠道病毒（Enterovirus）是小RNA病毒科，有67个血清型。 人类肠道病
毒包括：脊髓灰质炎病毒（Poliovirus）、柯萨奇病毒（Coxsackievi rus）、埃可
病毒（Echo）、甲型肝炎病毒以及新型病毒。目前常用的检测肠道病毒的方法有病< br>毒分离培养、血清学鉴定、分子生物学方法，近年来，一些新型方法也使得肠道病
毒的检测快速化 与准确化。

关键词 肠道病毒诊断分类
1 肠道病毒形态特点

肠道病毒是球形、无包膜、核衣壳20面体立体对称。肠病毒属在酸性pH下，
在病毒制品中可 观察到空衣壳，有时可观察到少量（1%）的重颗粒。组单一的
VPg蛋白，但不编码L蛋白。不同肠道 病毒及肠道病毒与鼻病毒间整个序列一致性
大于50%，一种肠道病毒不同株之间整个核苷酸序列的一致 性大于75%。病毒主
要在肠道中，也能在、和其它一些中复制。大多数病毒无明显症状，病毒感染的临


床症状包括轻、脑炎、肌炎、和炎。耐酸和脂溶剂，不易被胃酸和胆汁灭活，在污
水和粪便中活数月。
2 肠道病毒的分类
2.1 脊髓灰质炎病毒
此病 症的典型临床经过六个阶段（、前驱期、、瘫痪期、恢复期和残留）。期间
表现为低热及、、、不安、嗜 睡、、症、、过敏，突发急性弛缓性麻痹等症状，最
后多遗留下终生残疾。脊髓灰质炎病毒通过患者的粪 便或分泌物传染。人类是脊髓
灰质炎病毒的唯一宿主，长期携带的情况（例如无症状，但仍持续排出病毒 长达6
个月以上）很罕见。服用脊髓灰质炎疫苗（现在我国使用I、II、III型混合糖丸疫
苗，是由减毒的脊髓灰质炎病毒制成的）是预防本病的主要措施。消灭脊髓灰质炎
最的手段是提高人群水 平，脊髓灰质炎野毒株在人群中的。
脊髓灰质炎病毒分为三个血清型；两种不同抗原：D抗原和C抗原 。D
（dense，致密）抗原：具有病毒RNA，为完整的病毒颗粒，又称N（native）抗原；C（coreless，无核心）抗原：不含RNA，是D颗粒经56 ℃灭活，RNA释放后
形成的无核酸空心衣壳，故又称H（heated）抗原；不同型别病毒C抗原可发生交
叉反应，但D抗 原无交叉反应；
传播方式主要是粪-口传播，所致疾病是脊髓灰质炎。中毒机理：粪－口途径传
播为主—上呼吸道，咽喉，肠道为侵入门户—先在局部粘膜和淋巴结中增殖—入
血，形成第一次病毒血 症—带有受体的靶组织（脊髓前角细胞、背根神经节细胞、
运动神经细胞等）—在靶细胞中再次增殖后形 成第二次病毒血症及临床症状。


检测方法第一是微生物学检查，检测方法：病毒 分离检查：取咽漱液、粪便等样
本，细胞培养出现CPE；血清学诊断：中和试验；病毒核酸测定。第二 是防治:口服
减毒活疫苗或者注射灭活疫苗.
柯萨奇病毒
柯萨奇病毒
[ 2]
对乳鼠的敏感性很高，根据它们乳鼠产生的病灶，柯萨奇病毒可
以分为a、b两组。a组有 23型，b组有6型病毒。A组病毒：诱发新生乳鼠弥漫性
骨胳肌炎，导致驰缓性麻痹。B组病毒：诱发 新生乳鼠局灶性骨胳肌炎，导致痉挛
性麻痹。通过型特异性，和试验。Elisa等可以对各型进行鉴定 。所有的b组及a
组的第9型有共同的组特异性抗原，在b组内病毒之间有交叉，但是a组病毒没有共同的组特异性抗原。a组某些型别的型特异性抗原可在37℃引起人类O型。
柯萨奇病毒A型感 染潜伏期1-3天，上呼吸道感染，起病急，流涕、咳嗽、咽
痛、发烧，全身不适。典型症状为疱疹性咽 峡炎，即在鼻咽部、会厌、舌和软腭部
出现小疱疹，粘膜红肿，淋巴滤泡增生、渗出，扁桃体肿大，伴吞 咽困难，食欲下
降。据调查（R0binson，1958）伴有口咽部疱疹和皮疹的急性热病中，79 %为柯萨克
A型病毒所致。
检测方法：1.病人体液（脑脊液、疱疹液、心包液、胸水等）分 离出病毒即可
确诊。）2．恢复期血清出现抗体，或双份血清抗体效价增高4倍以上。
埃可病毒
埃可病毒(ECHO)（ECHO- viruses）病毒即肠性细胞致病性人类孤独型病毒
（enteric cytopatho- genic human orphan virus）。只对人类有感染性，多发于
夏、秋季，绝大多 数是隐性感染。ECHO病毒分为30多个型（1-34型，其中8、


10、28 、34型已归入其他病毒）。各型致病力和致病类型也不同，如ECHO6、19型
致病力较强，它类似 于柯萨奇病毒B型引起急性胸痛和心肌病。主要经口-粪途径传
播，也可通过咽喉分泌物排除病毒经呼吸 道传播。病毒进入人体在咽部机肠粘膜细
胞增殖后，侵入血流，形成病毒血症。
ECHO病毒 感染的临床表现类似于风疹，第一孕季感染虽可累及胎儿，但很少引
起畸形。发病年龄～33岁，常见的 症状为上呼吸道感染、发烧、非化脓性脑膜炎和
皮疹。皮疹为斑丘疹或麻疹样皮疹，持续1～3天自然消 退。可从大便、咽分泌物和
脑脊液中分离出病毒。
防治：埃可病毒疹尚无特殊疗法。皮疹对症 处理。对易感的婴幼儿可注射丙
3～6ml，减毒可干扰本病毒的感染。ECHO-3，4，6，9，1 1型减毒活疫苗正在研制
中。目前尚未有特效治疗，主要采用对症和支持疗法。注射对新生儿严重感染可 能
有效，也有导致脱水及的可能，须酌情给予治疗。
甲型肝炎病毒
临床上表现为 急性起病，主要表现为乏力、食欲减退、及肝功能异常，部分病
例可出现黄疸。甲型肝炎病毒主要通过粪 口途径传播，传染源多为病人。甲型肝炎
的潜伏期为15-45天，病毒常在患者转氨酸升高前的5-6 天就存在与患者的血液和
粪便中。发病2-3周后，随着血清中特异性抗体的产生，血液和粪便的传染性 也随
之消失。从感染者的粪便中排出，通过不同的途径污染了食物和用具，又经过口侵
入人体。 这就是甲肝病毒的传播方式。
新型病毒


新型病毒指在1969年以 后鉴定的除脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒以
外的几种小RNA病毒，主要包括68-71共四 个血清型。其中68型分离自下呼吸道感
染者，69型分离自健康人肛门拭子，70型分离自急性出血性 结膜炎患者，71型分
离自无菌性脑膜炎患者的粪便和脑脊液。EV70主要引起流行性出血性结膜炎； EV71
感染主要引起手足口病，还可引起中枢神经系统和脊髓灰质炎样麻痹等多种神经系
统疾 病。
3 检测方法
病毒分离培养
利用组织培养技术从感染部位或传染源 分离出病毒并鉴定其特异性血清型是病毒
性疾病诊断的标准。病人标本是最常采集的标本。病毒培养对缩 短抗生素治疗和住
院期有积极作用，但是病毒的分离鉴定繁琐、费力、耗时，一般一周才能观察到细胞病理反应，而且许多肠道病毒不能进行细胞培养，或者可以培养但不出现细胞病
理效应。
血清学鉴定
[2]

分离病毒和利用组合血清中和试验是对病毒定型的重要 方法。肠道病毒的血清学
鉴定中，多选用组合血清。此方法检测中不适用于早期诊断，可作为回顾性诊断 ；
且由于肠道病毒血清型众多，临床使用检测价值有限，而多为流行病学采用。
分子生物学诊断
3.3.1 PCR技术
由于各型病毒具有共同基因组序列，也可检出几乎 所有血清型。PCR检测材料
用量少、快速、灵敏度高且具有特异性，并可通过设计不同的引物进行病毒 分型，


用于检测相当宽的肠道病毒血清型。卢亦愚
[3]
等人发 明了用肠道病毒核酸荧光定量
RT-PCR检测试剂盒及检测方法，灵敏度高，非常适用于如手足口病等 有肠道病毒感
染引起突发疫情的实验室早期诊断，该方法具有高特异性。
3.3.2 核酸杂交技术
[4]

由于EV各型间存在序列高度保守区，利用针对此保守区的通用互补脱氧核
糖核酸(cDNA)核酸探针可进行大范围的EV诊断。
其他新型方法
2000年，Notomi 等开发了一种新颖的恒温核酸扩增方法， 即所谓环介导等温扩
增法。
[5]
该方法利用一种链置换DNA 聚合(BstDNApolymerase)和两对特殊的引物，
特异地识别靶序列上的6 个独立区域 ，使反应在模板两端引物结合处循环出现环状
单链结构，从而保证引物可以在等温条件下(65℃左右) 与模板结合并进行链置换扩
增反应。
RT-LAMP 检测方法在满足特异性同时，灵敏度可达到普通RT-PCR 法的10-100
倍，或荧光RT- PCR 法的110 或与之在同一水平。
优点：（1）高特异性 （2）高灵敏度 （3）鉴定简便 （4）操作简单 （5）快
速、高效：整个扩增反应只需小时
[5]
。














参考文献


[1]
腾峥，张曦 上海市疾病预防控制中心微生物检验室 肠道病毒的检测方法及评价
[2]
张素兰，张霞平 柯萨奇病毒感染临床表现的多样性 中国医学文摘
[3]
卢亦愚，严菊英，徐昌平 浙江省疾病预防控制中心 肠道病毒核酸荧光定量RT-
PCR检测试剂盒及检测方法
[4]
杨秀惠，严延生 肠道病毒诊断与分类
[5]
何雅青 深圳市疾病预防控制中心 RT_LAMP技术在肠道病毒检测中的应用
[6]
赵化冰，尹光雅，赵宏 中国人民武警警察部队医学院 用环介导恒温扩增技术检
测肠道病毒的引物组及检测体系