童声dj免疫检验项目标准操作程序(DOC)

2020年10月23日发(作者：熊巧男)



XXXXXX医院

检验项目标准操作程序
( SOP)





责任部门: 免疫室
文件编号: XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号: B1 ,共 25 页
编 写 者: XXX XXX XXX
审 核 者: XXX
批 准 者:
批准日期: 2012年09月27日
实施日期: 2012年10月01日
科 主 任: XXX



目 录

1. 乙肝病毒表面抗原诊断操作规程……………………… 1
2. 乙肝病毒表面抗体诊断操作规程……………………… 2
3. 乙肝病毒e抗原诊断操作规程………………………… 3
4. 乙肝病毒e抗体诊断操作规程………………………… 4
5. 乙肝病毒核心抗体诊断操作规程……………………… 5
6. 甲型肝炎病毒IGM抗体诊断操作规程…………………6
7. 戊型肝炎病毒IgG抗体诊断操作规程………………… 7
8. 人类免疫缺陷病毒抗体检测规程……………………… 9
9. 抗双链DNA检测程序………………………………… 11
10.抗核抗体检测程序………………………………………12
-IgM四联检测规程……………………………13
12. EB病毒抗体检测程序…………………………………14
13.可提取性核抗体原自身抗体操作规程…………………15
14.抗精子抗体检测规程……………………………………17
15.抗子宫内膜抗体检测规程………………………………18
抗体检测规程…………………………………… 19
17.结核分支杆菌抗诊断试剂………………………………20
18.梅毒甲苯胺红不加热血清试验…………………………22
19.流行性出血热IGM………………………………………24
20. 丙型肝炎病毒抗体诊断……………………………… 25




XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称 项目标准操作流程


文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
乙肝病毒表面抗原诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔， 每孔加入阴性对
照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度
孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分
钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
样品OD值阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称

项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
乙肝病毒表面抗体诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔， 每孔加入阴性对
照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度
孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分
钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
样品OD值阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称

项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
乙肝病毒e抗原诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔， 每孔加入阴性对
照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度
孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分
钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
样品OD值阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称 项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室

乙肝病毒e抗体诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对
照（或阳性对照）各 1滴，并设空白对照1孔。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度
孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
Cutoff Value计算：
COV=阴性对照平均OD值+阳性对照平均OD值2标本 OD值大于等于
COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称 项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室

乙肝病毒核心抗体诊断操作规程

一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升（待测标本用生理盐水1：30稀释，检测结
果为临床意义，请 用户自行选择），设阴、阳性对照各两孔，每孔加入
阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔 。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度
孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分
钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
Cutoff Value计算：原倍血清COV=阴性对照平均OD值乘以0.3。
1：30稀释血清COV=阴性对照平均OD值乘以0.5。
标本OD值大于等于COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称

项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
甲型肝炎病毒IGM抗体诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、代待测标本用生理盐水作1：1000稀释，每孔加入 稀释标本100微升，
设阴，阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各2滴，并
设 空白对照1孔，封板，置37度孵育20分钟。
4、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复3
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤3次程序后拍干。
5、每孔加入HAVAg1滴，酶结合物1滴 （空白对照孔不加），充分混匀，
封板，置37度孵育20分钟。
6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
7、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育10分
钟。
8、每孔加终止液1滴，混匀。
9、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶 标仪比色，参考波
长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
COV=样品OD值阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则
为阴性。
阴性对照OD值低于0.05作0.05计高于0.05按实际OD值计。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
25

XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称

项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
戊型肝炎病毒IGg抗体诊断操作规程

一、测定步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每次实验均需设立空白对照2孔，阳性对照2孔，阴性对照2孔。
4、每孔加样品稀释液 100微升。（阳性对照孔、阴性对照孔除外）空白对
照直接加入样品稀释液100微升。
5 、加待测标本，每孔10微升。阳性对照、阴性对照不需稀释，直接加入
100微升于各相应孔内。震荡 混匀，封板，置37度孵育30分钟。
6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
7、每孔加入酶结合物100微升（或两滴），封板，置37度孵育30分钟。
8、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5
次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
9、每孔加显色剂A液、B液各50微升（或 一滴），充分混匀，封板，置37
度孵育10分钟。
10、每孔加终止液1滴，混匀。 11、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考
波长630nm）， 先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
Cutoff Value的计算：
COV=阴性对照平均OD值+0.22
标本OD值大于等于Cut off Value为阳性
标本OD值小于Cut off Value为阴性
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XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称 项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
阴性对照平均OD值小于0.05， 按实际计，若阴性对照平均OD大于等
于0.05，按0.05计。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、若试验结果阴阳性对照有疑问，该试验视为无效，需重做。
5、洗涤液用前需25倍稀释，若洗涤液出现结晶，可置37度使之溶解。
6、不同批号的试剂不可混用。
7、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。

















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XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
项目标准操作流程

人类免疫缺陷病毒抗体检测规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备
用。 4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一
型、二型各一孔，空白对 照一孔。
5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。
6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。
7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸 ，吸干板内液体，将洗涤液注满
各孔（约300微升孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分
钟。
9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满
各孔（约300微升孔），吸 干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10
分钟。
11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。
12、在酶标度数仪上，取波长 450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考
波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值 （加终止液后，务
必在15分钟内读数完毕）
二、结果判断：
抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。
Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5
计算）
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XXXXXXX医院检验科
检验项目标准操作规程
程序名称 项目标准操作流程

文件编号:
XXXX-JYK-MY-XM
版本修订号
:
B1

生效日期: 2012年10月01日
责任部门: 免疫室
标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。
标本OD值大于Cutoff Value为阳性。
三、注意事项：
1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。
2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格
防止交叉感染。
操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。
4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。
5、所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6、洗涤液若出现结晶，可置37度溶解。
7、粘胶纸不能反复使用。
8、微孔条 从冷藏环境中取出时，应在室温平衡至无潮气方可使用，未用完
的须放入有干燥剂的密封袋中保存。














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